活性氧（ROS）參與許多退行性神經(jīng)系統(tǒng)病癥，如阿茲海默癥、帕金森癥、萎縮性脊髓側(cè)索硬化以及年老或外傷導(dǎo)致的腦功能紊亂等。此外活性氧是植物體內(nèi)正常代謝的信號(hào)小分子，在植物的生長(zhǎng)發(fā)育和抗逆反應(yīng)中具有重要作用。目前各領(lǐng)域中常見(jiàn)的四種ROS的檢測(cè)分析方法有：化學(xué)發(fā)發(fā)光法、熒光探針?lè)ā⒎止夤舛确?、電子順磁共振法?/p>

CheKine? 活性氧（ROS）檢測(cè)試劑盒提供了一種簡(jiǎn)單、靈敏、快速的ROS檢測(cè)方法，其原理是利用熒光探針DCFH-DA進(jìn)行活性氧檢測(cè)。DCFH-DA（二氯二氫熒光素-乙酰乙酸酯）可自由透過(guò)活細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，并被細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解，形成DCFH，DCFH無(wú)熒光且不能通透細(xì)胞膜，其可以被細(xì)胞內(nèi)的活性氧（ROS）氧化生成有熒光的DCF，使用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡檢測(cè)和觀察活細(xì)胞內(nèi)DCF的熒光信號(hào)強(qiáng)度，即可以分析細(xì)胞活性氧的水平。

操作步驟如下：

對(duì)于刺激時(shí)間較短（通常為2 h以內(nèi)）的細(xì)胞，建議先裝載探針，后用活性氧陽(yáng)性對(duì)照或感興趣的藥物刺激細(xì)胞；對(duì)于需要較長(zhǎng)時(shí)間刺激（通常為6 h以上）的細(xì)胞，建議先用活性氧陽(yáng)性對(duì)照或感興趣的藥物刺激細(xì)胞，后裝載探針。

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1.原位裝載探針?(僅適用于貼壁細(xì)胞)

2.收集細(xì)胞后裝載探針?(適用于貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞)

3.熒光顯微拍照

4.流式細(xì)胞分析操作方法

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文章來(lái)源：http://www.abbkine.cn/reactive-oxygen-species-ros-detection