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外泌體包裹紅色熒光(FMDV-VP3)/包載了CDK1-siRNA的脂質(zhì)雜合型外泌體囊泡的制備

2022-04-26 15:26 作者:瑞禧生物小曉  | 我要投稿

今天瑞禧生物小編給大家分享整理的是外泌體包裹紅色熒光(FMDV-VP3)/包載了CDK1-siRNA的脂質(zhì)雜合型外泌體囊泡的制備,一起來看看!

設(shè)計并制備了脂質(zhì)雜合型外泌體囊泡,以期在實現(xiàn) siRNA高效遞送以及消除脫離靶組織后副作用的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步提高納米載體靶向性,全面克服siRNA納米載體的脫離靶組織問題。該雜合型外泌體囊泡是以細(xì)胞Sk-hep1來源的外泌體為基礎(chǔ),依次經(jīng)破膜、反復(fù)離心去除內(nèi)容物、并與DPPC (Dipalmitoylphosphatidylcholine)磷脂雜合得到的。

其中,外泌體膜的應(yīng)用可以使脂質(zhì)雜合型外泌體囊泡繼承外泌體天然的核酸遞送行為及其“歸巢”性能,而加入DPPC磷脂進(jìn)行雜合則可以提高囊泡的穩(wěn)定性。該脂質(zhì)雜合型外泌體囊泡可以通過電穿孔的方式實現(xiàn)對siRNA的高效包載及保護(hù),且具有卓越的穩(wěn)定性和安全性。通過巨噬細(xì)胞對脂質(zhì)雜合型外泌體囊泡的攝取以及炎癥因子檢測的實驗,說明了脂質(zhì)雜合型外泌體囊泡在體內(nèi)的長循環(huán)以及克服血液清除的能力;

脂質(zhì)雜合型外泌體囊泡在小鼠體內(nèi)的組織器官分布結(jié)果則說明了其在部位良好的“歸巢”靶向性。進(jìn)一步對脂質(zhì)雜合型外泌體囊泡的胞內(nèi)命運進(jìn)行研究,結(jié)果顯示,其在進(jìn)入母細(xì)胞的內(nèi)涵體后的命運與外泌體幾乎一致,可經(jīng)胞內(nèi)囊泡分選途徑被遞送至高爾基體中,有效避開溶酶體對遞送載體及siRNA的降解。

最后,同樣以包載了CDK 1-siRNA的脂質(zhì)雜合型外泌體囊泡在細(xì)胞水平、動物水平的基因沉默效率進(jìn)行了評價。結(jié)果顯示,經(jīng)由脂質(zhì)雜合型外泌體囊泡遞送的CDK1-siRNA在細(xì)胞水平及動物水平均具有生物學(xué)活性,可以有效沉默CDK1基因的表達(dá),在展現(xiàn)出顯著的效果的同時對正常的肝細(xì)胞及組織。

針對非siRNA遞送載體存在的遞送效率低及脫離靶組織問題,依次設(shè)計并制備了脂質(zhì)液晶納米粒和脂質(zhì)雜合型外泌體囊泡實現(xiàn)了siRNA的高效遞送并克服了siRNA遞送載體的脫離靶組織問題。本文為基于脂質(zhì)的siRNA遞送系統(tǒng)的合理設(shè)計提供了新思路和新方法,為 siRNA類用于臨床轉(zhuǎn)化提供了新的可能。

相關(guān)產(chǎn)品:

miR-486-3p修飾外泌體

miR-7/IGF1R修飾外泌體

miR-130a修飾外泌體

miR--664--5p修飾外泌體

miR-342-5p修飾外泌體

近紅外熒光cy3標(biāo)記外泌體

AIE熒光分子標(biāo)記外泌體

近紅外熒光iRFP682蛋白標(biāo)記外泌體

近紅外熒光CD63蛋白標(biāo)記外泌體

RXYWX.2022.4.26

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