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血清的那些不可忽略的FAQ

2021-08-27 17:22 作者:Cas9X海星生物  | 我要投稿

在我們?nèi)粘5募毎麑嶒炛?,總會遇到各式各樣的問題,其中關(guān)于胎牛血清(FBS)的問題最多,今天小海星為大家匯總了血清一些常見問題,滿滿的干貨!

那些可以忽略的小卻重要的細節(jié):??1. 血清的保存溫度?? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?? ? ? ??

未拆封的血清應保存在-15℃至-20℃,避免反復凍融。拆封后的血清應無菌分裝成適當?shù)挠昧坎⒋娣庞?-15 ℃ 至 -20 ℃,2~8 ℃ 溶解后建議一個月內(nèi)使用。


?2. 血清的有效期是多久?? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ??

?大部分血清效期是 5 年,針對每個批次,請通過質(zhì)檢文件確定具體效期日期。


?3. 血清應如何融解?? ?? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ??
血清從冷凍箱取出后,置于2~8℃冰箱使之融解,不時規(guī)則地搖晃均勻,充分融解后分裝或使用。?


?4. 為什么有時血清中出現(xiàn)沉淀?是否需要去除?如何去除?

血清中的白色沉淀主要是脂蛋白、冷凝集素、玻連蛋白、胎球蛋白、磷酸鈣、膽固醇等、絮狀沉淀物主要是纖維蛋白。多種原因可能導致血清中沉淀的形成,最常見的原因之一是融化過程中,脂蛋白聚集所致。該現(xiàn)象一般不會影響產(chǎn)品質(zhì)量。若需要去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g 稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為血清中的絮狀物會阻塞過濾膜。


5. 血清是否需要做滅活處理??? ? ? ? ?? ? ? ? ? ? ? ? ??

血清是否需要滅活取決于您的應用。加熱可以滅活補體系統(tǒng)。激活的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究,培養(yǎng)ES 細胞,昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。

滅活過程中,會導致血清中某些成分被破壞,如氨基酸,維生素,生長因子等。所以只有在您的實驗對血清有特殊要求時,才會考慮對血清進行滅活處理。如您的實驗對血清中的某種組分敏感,需要去除該組分。最常見的情況是需要去除血清中的補體蛋白,因為補體在機體中參與細胞殺傷,巨噬細胞和淋巴細胞活化,肥大細胞和血小板組胺釋放,平滑肌收縮等過程,所以一般在免疫學相關(guān)研究中及肌細胞和干細胞的培養(yǎng)過程中需要對血清進行滅活處理。


?6. 如何進行血清滅活處理?? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?

?血清請先按上述「血清應如何融解」中的操作步驟融化和混勻,熱滅活時請將血清置于 56 ℃ 水浴 30 分鐘。為盡量減少熱滅活對血清品質(zhì)的影響,一次滅活的血清體積不宜過大。最好準備同樣的容器裝相等體積的水(與血清相同溫度),滅活時將裝有血清和水的容器同時放入 56 ℃ 水浴, 在裝水的容器中放置溫度計,加熱過程中不時輕輕旋轉(zhuǎn)混勻血清,當溫度計顯示達到 56 ℃ 左右,開始計時。56 ℃ 水浴后,建議馬上轉(zhuǎn)移到冰上降溫。

作者:海星生物

公眾號:Cas9X細胞基因編輯

以上內(nèi)容由海星生物(http://www.cas9x.com)提供

服務內(nèi)容:CRISPR/Cas9細胞基因編輯 載體構(gòu)建/病毒包裝 PDO/動物模型CDX 穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株 干細胞/原代細胞 培養(yǎng)試劑盒?

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