什么是天然凝膠電泳？

在天然凝膠電泳中，目標(biāo)生物分子（DNA、RNA 或蛋白質(zhì)）在穿過凝膠時(shí)保持其正?；蛱烊唤Y(jié)構(gòu)。 生物分子根據(jù)形狀和長(zhǎng)度進(jìn)行分離。 因此，在這種電泳中，生物分子根據(jù)其天然結(jié)構(gòu)的大小、形狀和凈電荷進(jìn)行分離，同時(shí)保留其功能和活性。

圖1.天然凝膠電泳

DNA、RNA 和蛋白質(zhì)等生物分子通常帶有凈負(fù)電荷。 具有較高負(fù)電荷密度的生物分子將遷移得更快。 此外，與較大的生物分子相比，較小的生物分子將具有較小的摩擦力，因此它們也將遷移得更快。 因此，天然凝膠電泳中的生物分子根據(jù)其質(zhì)量和電荷進(jìn)行分離。

什么是變性凝膠電泳？

在變性凝膠電泳中，目標(biāo)生物分子在通過凝膠時(shí)不會(huì)保持其正?；蛱烊唤Y(jié)構(gòu)。 它根據(jù)長(zhǎng)度分離生物分子。 變性凝膠電泳破壞了生物分子的復(fù)雜結(jié)構(gòu)，因此分子在電泳時(shí)僅根據(jù)其質(zhì)量進(jìn)行分離。

圖2.變性凝膠電泳

變性凝膠電泳的一個(gè)常見例子是 SDS PAGE（SDS 聚丙烯酰胺凝膠電泳），用于蛋白質(zhì)分離。 在 SDS PAGE 中，蛋白質(zhì)樣品在陰離子洗滌劑如 SDS（十二烷基硫酸鈉）存在下于 100oC 加熱。 這種還原劑會(huì)破壞蛋白質(zhì)的二硫鍵并破壞其蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)。 SDS 還賦予蛋白質(zhì)整體負(fù)電荷。 該過程使蛋白質(zhì)能夠僅根據(jù)其大小或質(zhì)量進(jìn)行分離。 SDS PAGE 也可用于確定蛋白質(zhì)的分子量。

天然凝膠電泳和變性凝膠電泳的相似之處

• 天然凝膠電泳和變性凝膠電泳是兩種不同類型的凝膠電泳技術(shù)，用于分離生物分子，例如 DNA、RNA 和蛋白質(zhì)。

• 兩者都是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)。

• 生物分子的大小可以通過使用兩種凝膠電泳技術(shù)來確定。

• 分子梯用于確定兩種凝膠電泳技術(shù)中生物分子的大小。

天然凝膠電泳和變性凝膠電泳的區(qū)別

在變性凝膠電泳中，生物分子在穿過凝膠時(shí)保持其正?；蛱烊唤Y(jié)構(gòu)，而在變性凝膠電泳中，生物分子在穿過凝膠時(shí)不保持其正常或天然結(jié)構(gòu)。 因此，這是天然凝膠電泳和變性凝膠電泳之間的主要區(qū)別。 此外，在天然凝膠電泳中不使用 SDS（十二烷基硫酸鈉）和 DTT（二硫蘇糖醇）等還原劑，而在凝膠電泳中使用這類還原劑進(jìn)行變性。