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GelRed在凝膠電泳中的作用是什么?

2022-03-11 16:05 作者:BIOFOUNT范德生物  | 我要投稿

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GelRed在凝膠電泳中的作用是什么?
GelRed? 是一種超靈敏、極其穩(wěn)定且對環(huán)境安全的熒光核酸染料,旨在替代劇毒的溴化乙錠 (EtBr),用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠中的 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。

你可以用微波爐加熱?GelRed嗎?
可以將儲備溶液與您選擇的瓊脂糖粉末和電泳緩沖液預(yù)先混合,然后進(jìn)行微波或其他通常用于制備瓊脂糖凝膠的加熱程序。 GelRed? 與所有常用的電泳緩沖液兼容。GelRed 對熱敏感嗎?
1. 將 GelRed? 溶液加熱至 45-50°C 兩分鐘并渦旋以重新溶解。 2. 將染料在室溫下儲存以避免沉淀。如何稀釋GelRed?
使用 GelRed? 后染色很簡單,無需脫色和特殊緩沖液。只需將濃縮染料稀釋在 0.1 M NaCl 或水中,然后將凝膠在稀釋的染料溶液中孵育 30 分鐘。將 GelRed 添加到 DNA 溶液中會產(chǎn)生什么影響?
請記住,所有核酸染料都會對 DNA 的移動方式產(chǎn)生一定的影響。 GelRedTM 是一種比 EtBr 重得多的染料,GelRed 對 DNA 的親和力意味著凝膠中加載的 DNA 越多,GelRedTM 與 DNA 結(jié)合并扭曲該片段的運(yùn)動的次數(shù)就越多。DNA帶什么電荷?
帶負(fù)電
DNA 帶負(fù)電,因此,當(dāng)向凝膠施加電流時(shí),DNA 將向帶正電的電極遷移。我要添加多少 GelRed?
將 3 μl GelRed 添加到 30 ml 瓊脂糖中并徹底混合,不要產(chǎn)生氣泡。然后按照教練的演示倒入澆鑄托盤。在倒入凝膠之前讓瓊脂糖稍微冷卻,因?yàn)闊釟怛v騰的瓊脂糖會使凝膠裝置變形。GelRed 染料的用途是什么?它是如何工作的?
GelRedTM 是一種高度敏感的熒光核酸染料,當(dāng)被透照儀激發(fā)時(shí)會起作用。它旨在替代被認(rèn)為具有致癌性和致突變性的 EtBr。眾所周知,GelRedTM 非常敏感,無需脫色步驟。為什么 DNA 在與溴化乙錠或 GelRed 相互作用時(shí)會在紫外線下發(fā)出熒光?
溴化乙錠是一種嵌入劑,類似于 DNA 堿基對。由于其獨(dú)特的結(jié)構(gòu),它可以很容易地嵌入到 DNA 鏈中。溴化乙錠與 DNA 結(jié)合后發(fā)出強(qiáng)烈熒光的原因是堿基對之間存在疏水環(huán)境。什么使 DNA 帶負(fù)電荷?
解釋:由于磷原子和氧原子之間形成的鍵,DNA 的磷酸骨架帶負(fù)電荷。每個(gè)磷酸基團(tuán)都含有一個(gè)帶負(fù)電荷的氧原子,因此由于重復(fù)的磷酸基團(tuán),整個(gè) DNA 鏈都帶負(fù)電荷。DNA可以帶正電荷嗎?
DNA 帶負(fù)電,因此,當(dāng)向凝膠施加電流時(shí),DNA 將向帶正電的電極遷移。較短的 DNA 鏈比較長的鏈更快地通過凝膠移動,從而導(dǎo)致片段按大小順序排列。在水中使用 GelRed 10, 000x 是否安全?
GelRed? 10,000X 水溶液是最新配方,可消除處理 DMSO 的危害,提高安全性。我們還提供 GelRed? 10,000X DMSO 溶液(目錄號 G-720),供不希望更改其實(shí)驗(yàn)室方案的 GelRed? DMSO 現(xiàn)有用戶使用??梢栽?DMSO 中使用 GelRed 10, 000x 嗎?
我們還提供 GelRed? 10,000X DMSO 溶液(目錄號 G-720),供不希望更改其實(shí)驗(yàn)室方案的 GelRed? DMSO 現(xiàn)有用戶使用。 GelRed? 10,000X 在水和 DMSO 配方中的性能和穩(wěn)定性相當(dāng)。如何使用 GelRed 代替 EtBr?
GelRed? 和 EtBr 具有幾乎相同的光譜,因此您可以直接用 GelRed? 替換 EtBr,而無需更改現(xiàn)有成像系統(tǒng)。 GelRed? 可用于通過預(yù)制或凝膠后染色對瓊脂糖凝膠中的 dsDNA、ssDNA 或 RNA 進(jìn)行染色,也可用于通過凝膠后染色對聚丙烯酰胺凝膠進(jìn)行染色。


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