今天瑞禧生物小編給大家分享的是外泌體標(biāo)記Celltracker CM-DiI活細(xì)胞示蹤劑CM-DiI/Calcein, AM, Ultrapure Grade鈣黃綠素的知識(shí)，和小編一起來(lái)看看吧！

外泌體熒光標(biāo)記是外泌體功能研究中的必要的技術(shù),然而在實(shí)際操作中對(duì)于使用多少的外泌體、加入多少的熒光染料、以及最終標(biāo)記的效率是多少，這些問(wèn)題都是不清楚的，給操作人員帶來(lái)了不少困擾。

本研究目的是使用不同劑量的熒光染料標(biāo)記外泌體,通過(guò)納米流式儀檢測(cè)外泌體熒光效率以及染色后外泌體重新純化后的熒光效率。

實(shí)驗(yàn)方法:

1，細(xì)胞培養(yǎng)

293T細(xì)胞通過(guò)外泌體專用無(wú)血清培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，收集細(xì)胞上清液，通過(guò)0.45 um濾器過(guò)濾處理。

2，外泌體分離提取

通過(guò)Umibio細(xì)胞上清液外泌體提取試劑盒的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，提取的外泌體通過(guò)納米流式檢測(cè)儀進(jìn)行顆粒濃度和 BCA 方法進(jìn)行蛋白濃度測(cè)定。

3，外泌體熒光染料標(biāo)記

·配制染料工作液:用 DiluentC試劑（染色試劑盒自帶）稀釋染料儲(chǔ)存液，配制濃

度為100 nM的染料工作液(PKH67);

·稀釋染料工作液:按照﹖倍梯度通過(guò)Diluentc稀釋100 nM的染料工作液;·向各實(shí)驗(yàn)組中加入10 uL對(duì)應(yīng)濃度的染料，混勻后取10 uL進(jìn)行納米流式檢測(cè);·在標(biāo)記的外泌體樣品中補(bǔ)加入1 mL 的 PBs,使用試劑盒再次提取外泌體以去除游離染料;

相關(guān)產(chǎn)品：

近紅外熒光cy3標(biāo)記外泌體

AIE熒光分子標(biāo)記外泌體

近紅外熒光iRFP682蛋白標(biāo)記外泌體

近紅外熒光CD63蛋白標(biāo)記外泌體

外泌體包裹紅色熒光(FMDV-VP3)

FITC標(biāo)記外泌體

TRITC標(biāo)記外泌體

CY3標(biāo)記外泌體

CY3.5標(biāo)記外泌體

CY5標(biāo)記外泌體

CY5.5標(biāo)記外泌體

CY7標(biāo)記外泌體

CY7.5標(biāo)記外泌體

RXYWX.2022.4.27