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艾美捷丙二醛(MDA)elisa檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理和注意事項(xiàng)

2023-04-14 15:28 作者:艾美捷  | 我要投稿

艾美捷丙二醛(MDA)elisa檢測(cè)試劑盒#EKF60157檢測(cè)原理:

該試劑盒基于競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)方法。該試劑盒中提供的微量滴定板已預(yù)先涂有目標(biāo)在反應(yīng)過程中,樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的靶標(biāo)與固相載體上固定量的靶標(biāo)競(jìng)爭(zhēng)用于靶特異性的生物素化檢測(cè)抗體上的位點(diǎn)。洗滌過量的綴合物和未結(jié)合的樣品或標(biāo)準(zhǔn)品并將HRP鏈親和素(SABC)加入每個(gè)微孔板孔中并孵育。然后TMB基板溶液添加到每個(gè)井中。通過加入硫酸溶液和顏色變化終止酶底物反應(yīng)在450nm的波長(zhǎng)下用分光光度法測(cè)量。然后通過以下方式確定樣品中目標(biāo)的濃度將樣品的OD與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較。

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丙二醛(MDA)elisa檢測(cè)試劑盒組成:

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丙二醛(MDA)elisa檢測(cè)試劑盒操作注意事項(xiàng)

1.為了檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)操作的有效性和樣品稀釋比例的適當(dāng)性,進(jìn)行中試建議使用標(biāo)準(zhǔn)品和少量樣品。

2.打開后和使用前,請(qǐng)保持盤子干燥。

3.在使用試劑盒之前,旋轉(zhuǎn)試管,并將所有組件降到試管底部。

4.TMB試劑應(yīng)避光保存。

5.洗滌過程非常重要,不完全洗滌容易造成假陽(yáng)性和高背景。

6.對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試和樣品測(cè)試,建議使用雙孔分析法。

7.在測(cè)定時(shí)不要讓微孔板干燥,因?yàn)楦稍锏钠桨鍟?huì)使平板上的活性成分失活。

8.不要重復(fù)使用尖端和管道,以避免交叉污染。

9.請(qǐng)不要將試劑混合在我們公司的不同試劑盒中。不要混合其他制造商的試劑。

10.為了確保準(zhǔn)確的結(jié)果,在培養(yǎng)步驟中有必要適當(dāng)粘附平板密封劑

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需要但未提供的材料

1.微孔板閱讀器(波長(zhǎng):450nm)

2.37°C培養(yǎng)箱

3.自動(dòng)洗板機(jī)

4.精密單通道和多通道移液管及一次性吸頭

5.清潔管道和埃彭多夫管道

6.去離子水或蒸餾水

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洗滌

手動(dòng):在不接觸側(cè)壁的情況下丟棄板中的溶液。用吸水濾紙或其他東西拍打?yàn)V板吸收性材料。用350毫升洗滌緩沖液完全填充每個(gè)孔,浸泡1到2分鐘,然后從板,并將板拍打在吸收性濾紙或其他吸收性材料上。

自動(dòng):抽吸所有井,然后用350ul洗滌緩沖液洗滌平板。最后一次清洗后,翻轉(zhuǎn)盤子,拍上盤子吸收性濾紙或其他吸收性材料。建議將墊圈設(shè)置為浸泡1分鐘。(注:設(shè)置針頭的高度;確保液體可以被完全吸干)

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樣品稀釋:

用戶應(yīng)估計(jì)測(cè)試樣品中目標(biāo)蛋白的濃度,并選擇適當(dāng)?shù)南♂屢蜃右允瓜♂尩哪繕?biāo)蛋白濃度落在試劑盒的較佳檢測(cè)范圍內(nèi)。用提供的稀釋劑稀釋樣品緩沖區(qū),并且可能需要進(jìn)行幾次試驗(yàn)。試樣必須與稀釋緩沖液充分混合。還有標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品應(yīng)在實(shí)驗(yàn)前制作。如果樣品濃度非常高,先用PBS稀釋樣品,然后用樣品稀釋液稀釋樣品。


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