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SSR引物?Indel引物?批量設(shè)計(jì)也來了~

2022-05-21 20:35 作者:CJchen-0410  | 我要投稿

寫在前面

早前,「TBtools」開放了 SSRminer 功能,可以快速在全基因組范圍內(nèi)鑒定 SSR,這個(gè)在分子標(biāo)記開發(fā)上似乎還是有點(diǎn)作用。前兩天,咱們也釋放了「Batch qPCR Primer Design」這個(gè)功能,可用于批量對轉(zhuǎn)錄本序列(mRNA/Exon/CDS)進(jìn)行引物設(shè)計(jì),感覺還是不錯(cuò)的。尤其是現(xiàn)在很多人一做就是幾十個(gè)基因。既然如此,我們也完全可以針對 SSR 所在區(qū)域設(shè)計(jì)引物,用于分子標(biāo)記開發(fā)。對吧,這個(gè)邏輯沒啥問題。而 SSR 可以,那么 Indel 區(qū)間也可以。于是有了今天這個(gè)插件「Batch Target Region Primer Design」。

插件簡介

「Batch Target Region Primer Design」的使用與「Batch qPCR Primer Design」的使用是類似的,最大的區(qū)別,那么是輸入文件。對于今天這個(gè)插件,我們需要的輸入文件是兩個(gè):

  1. 參考序列信息(具體看目標(biāo)區(qū)間從啥序列鑒定出來),F(xiàn)asta格式,用于獲取目標(biāo)區(qū)間的序列

  2. 目標(biāo)區(qū)間信息,格式為?ChrID \t StartPos \t EndPos;對于SSR區(qū)域,用戶完全可以使用「TBtools」的 SSRminer 功能得到;而對于 Indel 或者其他區(qū)間,則按相應(yīng)格式整理即可。注意到,最重要的,其實(shí)只是前三列。

具體界面如下

圖片

注意到,不是每一個(gè)區(qū)間都能設(shè)計(jì)到可用的引物。只輸出能設(shè)計(jì)出合適引物的引物序列。
具體使用如下

圖片

結(jié)果文件如下,與之前的類似

圖片

拓展內(nèi)容

事實(shí)上,只要是引物,我們就可以用「Primer Check」插件功能,查看引物是否能較好的擴(kuò)增或者是擴(kuò)增的產(chǎn)物在當(dāng)前材料中是否特異。
先把引物的表格格式轉(zhuǎn)換為 Fasta 格式。

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隨后使用「Primer Check」進(jìn)行引物查找

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寫在最后

Emmm,路漫漫其修遠(yuǎn)兮....很多功能,一個(gè)一個(gè)釋放吧。


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