“研究基礎(chǔ)”，應(yīng)該是很多人在課題申報中最尷尬，最糾結(jié)的部分。

不用過多的講什么大道理強調(diào)“研究基礎(chǔ)”的重要性，相信大家都清楚的。比如，“科學假說”是國科金的魂，“研究基礎(chǔ)”是根；或者說，國科金需要的是“科學的”假說，而不是空想的假說，而“科學”的核心是要有根據(jù)的，不能閉門造車。

繼續(xù)請出這個表情包來震場子。

部分人尷尬、糾結(jié)的原因無非是巧婦難為無米之炊，前期數(shù)據(jù)太少。對于這類群體的粉絲，如果實在前期數(shù)據(jù)太少，那只能是勸大家厚積薄發(fā)，再多充實下數(shù)據(jù)；如果還有些數(shù)據(jù)，那就繼續(xù)積累基礎(chǔ)的同時，也申請著嘗試下，拼拼人品。

在這里，小仲給大家分享下國科金研究基礎(chǔ)的基本內(nèi)容，粉絲朋友可以根據(jù)自己實際情況，安排自己的進度（如果您對標書依然吃不準，或者想獲得更多的私人建議，歡迎給我們留言，我們會免費給大家回復(fù)。）

先上結(jié)論：

根據(jù)實驗的性質(zhì)，小仲將整個實驗內(nèi)容分為三部分：驗證、功能和通路；

最理想的研究基礎(chǔ)，應(yīng)該做到驗證和功能層面，將通路作為待證實部分；

下面，小仲分別進行詳述驗證、功能和通路的意思。

一、驗證

本質(zhì)上說，是我們通過文獻查詢/二代測序/數(shù)據(jù)挖掘等各種渠道獲得了某個候選基因，我們認為該基因和臨床表型可能存在關(guān)系。在探討機制之前，需要確認這個基因與臨床表型間的相關(guān)性。

p?對臨床樣本、細胞/動物樣本中篩選出的關(guān)鍵基因（hub基因或者通路基因）進行qPCR（mRNA/基因表達）

p?WB/IHC/IF（蛋白表達）等檢測

p?比如下圖

二、功能

對表達符合預(yù)期的基因，進一步論述該基因與表型之間的因果關(guān)系，則為基因的功能試驗。

p?在體外（細胞系）、體內(nèi)（一般是動物模型）中進行目的基因的敲低/過表達

p?檢測細胞表型（增殖、凋亡、侵襲、遷移、克隆形成、細胞周期、特定分子指標變化等）和動物表型（疾病指標變化）

p?比如下圖

三、通路

探索該基因通過何種方式實現(xiàn)對臨床表型的影響，通常為一些熟知的熱門通路，比如NF-KB、Wnt等。

p?在功能實驗基礎(chǔ)上，從體內(nèi)、體外去檢測一些熱門信號通路

p?做完基因敲低/過表達之后，做轉(zhuǎn)錄組測序，哪個通路有差異，就找哪個通路，比我們一個個通路去試錯，其實效率更高

p?比如下圖

四、實例展示

比如在‘基于RBBP4介導(dǎo)的自噬性死亡研究雷公藤甲素抗非小細胞肺癌的作用機制’這篇標書中，技術(shù)路線圖的3列，則分別對應(yīng)著驗證、功能和通路三部分。諸位粉絲可以對比體會一下。

小編有話說

其實很難掌控到底什么程度才是剛剛好，小仲給大家提供一個基本邏輯和思路供大家參考。大家根據(jù)自己的經(jīng)費、周期、實驗條件等情況來實際安排，做到自己當前情況下的最優(yōu)解即可，其余的就交給玄學了。