重組蛋白質(zhì)藥物是由兩個或更多的氨基酸通過肽鍵連接而形成的生物活性化合物。與多肽類藥物相比，它們通常由更多的氨基酸組成，分子量更大，結(jié)構(gòu)更復(fù)雜。蛋白質(zhì)類藥物可以是自然存在的，如許多體內(nèi)酶和免疫球蛋白，也可以是通過基因工程技術(shù)人工設(shè)計和生產(chǎn)的，如單克隆抗體和重組蛋白疫苗。

重組蛋白表達(dá)純化產(chǎn)物的分析過程，特別是重組蛋白藥物的研發(fā)和工藝建立過程，需要對重組蛋白質(zhì)藥物的N端序列進(jìn)行確認(rèn)。目前，測定蛋白質(zhì)類藥物N末端的方法主要有Sanger法、酶降解法、Edman法、二硝基氟苯法（FDNB法）、丹磺酰氯法（DNS法）和基于質(zhì)譜的方法，其中Edman法和質(zhì)譜法在N末端序列分析中應(yīng)用最廣。

生物制品表征N端測序示意圖

質(zhì)譜法將蛋白消化成5-25個氨基酸的肽，隨即通過LC-MS/MS分析檢測，將采集的數(shù)據(jù)與理論序列數(shù)據(jù)庫進(jìn)行匹配，進(jìn)而確認(rèn)N端序列。質(zhì)譜可以測出封閉和修飾的蛋白藥物N末端，且已成為首選的全長抗體測序方法。Edman降解法與質(zhì)譜法不同，其不需要借助蛋白數(shù)據(jù)庫便可以直接進(jìn)行序列分析。但它不能用于N-末端封閉或修飾后的氨基酸殘基。

百泰派克生物科技（BTP），采用ISO9001認(rèn)證質(zhì)量控制體系管理實驗室，獲國家CNAS實驗室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)。我們?yōu)槟峁┗诟叻直尜|(zhì)譜平臺以及島津公司Edman測序系統(tǒng)的重組蛋白質(zhì)藥物N端測序服務(wù)。以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的N端測序技術(shù)可以實現(xiàn)對N端封閉和PEG化蛋白的序列測定，與Edman測序形成互補(bǔ)。此分析可以用于確認(rèn)重組重組蛋白質(zhì)藥物是否得到完整表達(dá)，檢測重組重組蛋白質(zhì)藥物表達(dá)過程是否發(fā)生斷裂，以及重組重組蛋白質(zhì)藥物N端序列是否發(fā)生修飾等。百泰派克生物科技還可根據(jù)需求提供定制化技術(shù)服務(wù)，歡迎免費咨詢。

百泰派克生物科技重組蛋白質(zhì)藥物表征內(nèi)容