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FITC/Cy2/Cy3/Cy5/Cy7/TRITC-Streptavidin熒光標(biāo)記Streptavidin介紹

2020-10-23 15:34 作者:星戈瑞-熒光居  | 我要投稿

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花菁染料-Streptavidin

Cy2-Streptavidin

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Cy7-Streptavidin

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Concanavalin A-CY系列


鏈霉親和素(SA)簡述:

鏈霉親和素(SA)是Streptomyces avidinii菌的分泌物,其分子量及結(jié)合生物素的能力與雞蛋清中的親和素相似,等電點(diǎn)6.0,非特異性結(jié)合遠(yuǎn)比親和素低。

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鏈霉親和素(SA)的來源:

SA 是Streptomyces avicllrdi菌培養(yǎng)過程中的分泌產(chǎn)物,主要通過2一亞氨基生物索親和層析法提純,1L培養(yǎng)液中含蛋白10~60mg。鏈霉親和素是四聚體蛋白,大小為66KDa。一分子鏈霉親和素可以高度特異性地與四分子生物素結(jié)合,兩者之間的親和力極為強(qiáng)烈。

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鏈霉親和素(SA)的應(yīng)用:

1.?enzyme immunoassays, 酶免疫測定

2.?immunohistochemistry, 免疫組織化學(xué)

3.?flow cytometry, 流式細(xì)胞儀

4.?Western blot, 原位雜交

5.?immunoblotting procedures免疫印跡程序

6.?Western blot免疫印跡

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鏈霉親和素(SA)的熒光標(biāo)記物及激發(fā)波長:

熒光標(biāo)記的鏈霉親和素(SA)的介紹:

FITC-Streptavidin:

FITC是廣泛使用的熒光基團(tuán),但其最大的缺點(diǎn)是淬滅快,使用抗淬滅劑可以減輕。

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花菁染料(Cy2,Cy3,Cy5,Cy7-Streptavidin):

Cy2比FITC更穩(wěn)定,且在表面熒光顯微鏡下,Cy2的熒光FITC更強(qiáng)。Cy3和Cy5比大多數(shù)熒光基團(tuán)更亮,更穩(wěn)定,背景更弱。二者常在共聚焦顯微實驗中作多標(biāo)記。但Cy5的缺點(diǎn)是不能用表面熒光顯微鏡觀察,因此通常用具有遠(yuǎn)紅外檢測器的共聚焦顯微鏡觀察。

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TRITC-Streptavidin:

TRITC,RRX,TR:TRITC經(jīng)常和FITC一起用于雙標(biāo)記實驗中,也可以使用RRX或TR,但TR會產(chǎn)生較高的背景。在使用裝有氪氫燈的激光共聚焦掃描顯微鏡作三標(biāo)記實驗時,RRX尤其有用,可以和Cy2(或FITC)及Cy5一起使用,因為RRX的發(fā)射波長在Cy2和Cy5中間,且和這兩者的重疊很少。

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