回避實驗是利用動物的好暗避光（明暗穿梭）、對厭惡刺激（如足電擊）的恐懼和記憶而建立起來的。所以對實驗者（而不是對動物）而言，回避實驗在技術(shù)上與暗示關(guān)聯(lián)條件恐懼相類似。所用的刺激為溫和的足電擊，發(fā)生的反應(yīng)是動物逃避曾經(jīng)受到電擊刺激的地方。根據(jù)動物的逃避方式分為主動回避和被動回避（active and passive avoidance）。前者要求動物主動從有厭惡刺激的箱中逃離；后者則要求動物遏制自己而不進(jìn)入有厭惡刺激的箱。根據(jù)所用儀器設(shè)備的不同又可分為穿梭回避、跳臺回避、Y-形迷宮回避。這里主要介紹前兩種回避。

???一、 實驗設(shè)備

???（一）穿梭回避實驗設(shè)備 ?包括穿梭箱、刺激控制器和計算機。這里介紹上海欣軟信息科技有限公司生產(chǎn)的穿梭箱。它包括左右兩個同等大?。?0.3cm*15.9cm*21.3cm）的隔室（compartment）。其中一隔室采用暗箱設(shè)計，周邊是黑板，形成暗箱（主動回避可不用暗箱）。兩隔室之間由一個拱形門（8.9cm*11.4cm）相聯(lián)，門可由實驗者根據(jù)實驗需要關(guān)上或打開。隔室地板為不銹鋼柵欄（直徑：大鼠4.8mm，小鼠3.175mm）。暗箱一側(cè)的柵欄地板與刺激器相聯(lián)，并可給予電擊；明箱一側(cè)則不與刺激器相聯(lián)，故沒有電流通過。

???（二） 跳臺回避實驗裝置 ?將上述穿梭箱的中門移去，代之以一個平臺（可隨上海欣軟SuperApas穿梭箱配套），即可改裝成跳臺回避實驗裝置。這里介紹上海欣軟信息科技有限公司生產(chǎn)的跳臺回避裝置。它包括一個15cm*25cm*10cm的透明有機玻璃跳臺箱、一個隔音外箱（48cm*62cm*24cm）和一臺脈沖電刺激器組成。跳臺箱底部的柵欄與刺激器相聯(lián)，中央固定一個3.5cm*3.5cm*2.5cm的木制平臺。實驗時，將跳臺箱放入隔音箱內(nèi)，以防外界干擾。

??二、實驗方法

??（一）小鼠穿梭被動回避實驗（mouse step-through passive avoidance）

1、單次電擊刺激訓(xùn)練

（1）將小鼠放入明箱，10s后，將明暗箱之間的門打開。多數(shù)品系的小鼠有很強的探究行為，喜暗惡光。因此，小鼠會很快進(jìn)入暗箱。

（2）小鼠（四肢）完全進(jìn)入暗箱后，立即將中門關(guān)上，并給予一次電擊。電擊強度為能引起小鼠退縮和發(fā)聲的最小電流。根據(jù)小鼠品系不同，電流范圍為0.2~0.8mA(100V，50~60Hz AC)，持續(xù)1~2s。

（3）讓小鼠在暗箱內(nèi)停留10s（以使讓動物形成箱與電擊之間的關(guān)聯(lián)），將小鼠放回籠內(nèi)。清潔操作箱。進(jìn)行下一只動物的訓(xùn)練。

2、記憶保持測試（retention test） ?

電刺激訓(xùn)練24h后，將小鼠放回明箱，中門打開，但不給電擊。記錄5min內(nèi)動物進(jìn)入暗箱的潛伏期。正常小鼠或許能夠記住前一天在暗箱中遭受的電擊，因而通常不會進(jìn)入暗箱(在明箱的潛伏期達(dá)到最大，即300s)；即使進(jìn)入暗箱，也非常緩慢，“裹足不前”。計算機還可同時記錄動物在穿梭箱內(nèi)的活動情況，包括運動距離、運動時間、站立次數(shù)和時間，以及靜止時間等。這些參數(shù)對評價動物的一般狀態(tài)很有價值。

????（二）大鼠穿梭被動回避實驗（rat step-through passive avoidance） ?

實驗方法基本與小鼠相同，僅稍作修改：大鼠放入明箱時要背朝關(guān)閉的中門，1min后將中門打開；足電擊強度為0.5mA，3s；記錄時間為3min。

????（三）小鼠穿梭主動回避實驗（mouse step-through active avoidance） ?

方法與被動回進(jìn)相似，但無論是訓(xùn)練還是測試，都將動物放在暗箱。訓(xùn)練時從暗箱給予足電擊（電擊強度與小鼠被動回避相同），小鼠必須主動離開暗箱，通過中門進(jìn)入明箱以逃避電擊。然后將小鼠放回籠內(nèi)。24h后，將小鼠放回暗箱，記錄5min內(nèi)動物逃離暗箱并進(jìn)入明箱的潛伏期。

????（四）小鼠跳臺回避實驗( mouse step-down ?inhibitory avoidance) ?

實驗包括兩次相隔至少60min的電擊訓(xùn)練和一次24h后的記憶保持測試。

1、訓(xùn)練

????(1) 將小鼠放在平臺上。當(dāng)它往下跳至柵欄地板（以四肢均接觸地板為準(zhǔn)）時，給予0.4mA的電擊，持續(xù)5s。電流強度為能夠引起小鼠發(fā)聲和退縮的最小電流。將小鼠放回籠內(nèi)，清潔操作箱，進(jìn)行下一只小鼠的訓(xùn)練。

????(2) 1h后重復(fù)上述訓(xùn)練一次，記錄跳臺潛伏期。如動物在平臺上滯留的時間超過60s，即認(rèn)為它已經(jīng)記住先前的厭惡刺激，不給電擊，將其放回籠內(nèi)。多數(shù)動物能達(dá)到此標(biāo)準(zhǔn)。少數(shù)動物的跳臺潛伏期少于60s，則在1h后再重復(fù)訓(xùn)練一次。如仍不達(dá)標(biāo)，則予淘汰。

????(3) 記憶保持測試在第一次訓(xùn)練后的24h進(jìn)行。方法與訓(xùn)練相同，但不給電擊。記錄小鼠從平臺跳下的潛伏期。如小鼠5min仍不跳下平臺，則終止實驗。實驗除記錄跳臺潛伏期外，還記錄達(dá)到回避標(biāo)準(zhǔn)的動物數(shù)。回避標(biāo)準(zhǔn)為：記憶保持測試的潛伏期大于第二次訓(xùn)練潛伏期的3倍且超過60s。一般以平均保持潛伏期為判斷記憶力的定性指標(biāo)，達(dá)標(biāo)動物的百分比為記憶的定量指標(biāo)。

???大鼠跳臺回避實驗與小鼠類似，只是跳臺箱和平臺的規(guī)格較大，分別為50cm。25cm×25cm 和?25cm×7cm×2.5cm。

??? Y-形或T-形迷宮回避實驗：3個臂中只有1個臂的柵欄底部可產(chǎn)生足電擊。動物在該臂遭受電擊后，必須逃避到其他臂方可免受電擊。這樣動物根據(jù)周圍環(huán)境進(jìn)行空間定位，可記住遭受厭惡刺激的臂的位置而避免進(jìn)入此臂。

????三、注意事項

（1）回避實驗廣泛用于認(rèn)知藥物的評篩。作用于M膽堿能受體、Glutamate受體、GABA受體和內(nèi)啡肽受體的藥物均可影響動物的回避行為。根據(jù)實驗?zāi)康牟煌?，可選擇不同時間給藥，訓(xùn)練后立即給藥，可檢測藥物對記憶保持的影響；記憶保持測試前給藥，可檢測藥物對記憶恢復(fù)（retrieval）或再現(xiàn)( recall)的影響。

（2）結(jié)合轉(zhuǎn)基因、基因敲除或基因下調(diào)等技術(shù)，回避實驗也可用于評價基因?qū)τ洃浀挠绊?。它既可測定動物的短期記憶（記憶保持測試在第一次訓(xùn)練后的3h內(nèi)進(jìn)行），也可測定動物的長期記憶（記憶保持測試在第一次訓(xùn)練后的24h或更長時間進(jìn)行）。

（3）凡能產(chǎn)生以下作用的藥物或基因變化均可影響回避行為，從而產(chǎn)生假陽性或假陰性結(jié)果：視力缺陷、痛閾變化、鎮(zhèn)靜和運動功能減弱或喪失等。

（4）回避實驗和條件恐懼實驗均采用溫和電刺激。同一動物對這兩種實驗中的共同成分（足電擊）會有連帶效應(yīng)，即在一個實驗中對電刺激的反應(yīng)會帶到另一實驗中去。因此，為避免這種泛化作用，這兩類實驗不要在同一組動物中進(jìn)行。

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