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組蛋白甲基化定量/轉(zhuǎn)移酶測定,及組蛋白H3磷酸化檢測解決方案

2020-12-17 17:12 作者:艾美捷  | 我要投稿

組蛋白修飾(histone modification)是指組蛋白在相關(guān)酶作用下發(fā)生甲基化、乙?;?、磷酸化、腺苷酸化、泛素化、ADP核糖基化等修飾的過程。今天我們來重點(diǎn)說說組蛋白甲基化、組蛋白磷酸化。

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一、組蛋白甲基化

組蛋白甲基化是由組蛋白甲基化轉(zhuǎn)移酶(histonemethyl transferase,HMT)完成的。甲基化可發(fā)生在組蛋白的賴氨酸和精氨酸殘基上,而且賴氨酸殘基能夠發(fā)生單、雙、三甲基化,而精氨酸殘基能夠單、雙甲基化,這些不同程度的甲基化J大地增加了組蛋白修飾和調(diào)節(jié)基因表達(dá)的復(fù)雜性。甲基化的作用位點(diǎn)在賴氨酸(Lys)、精氨酸(Arg)的側(cè)鏈N原子上。組蛋白H3的第4、9、27和36位,H4的第20位Lys,H3的第2、l7、26位及H4的第3位Arg都是甲基化的常見位點(diǎn)。

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研究表明·,組蛋白精氨酸甲基化是一種相對動態(tài)的標(biāo)記,精氨酸甲基化與基因激活相關(guān),而H3和H4精氨酸的甲基化丟失與基因沉默相關(guān)。相反,賴氨酸甲基化似乎是基因表達(dá)調(diào)控中一種較為穩(wěn)定的標(biāo)記。例如,H3第4位的賴氨酸殘基甲基化與基因激活相關(guān),而第9位和第27位賴氨酸甲基化與基因沉默相關(guān)。此外,H4—K20的甲基化與基因沉默相關(guān),H3—K36和H3—K79的甲基化與基因激活有關(guān)。但應(yīng)當(dāng)注意的是,甲基化個(gè)數(shù)與基因沉默和激活的程度相關(guān)。

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?【1】組蛋白甲基化定量

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組蛋白甲基化位點(diǎn)主要發(fā)生在H3和H4上面賴氨酸(K)和精氨酸(R)上,且能夠發(fā)生單、雙、三甲基化等。要按照數(shù)學(xué)的排列組合,那也是蠻多類型了,舉例EpiQuik 組蛋白H3修飾多重檢測試劑盒(比色法)(96 次),P-3100-96,EpiQuik組蛋白H3修飾定量試劑盒(比色法)是一組完全的、優(yōu)化的試劑組合,可以同時(shí)定量H3上面21個(gè)修飾方式,是一個(gè)簡單的Elisa檢測方法。

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【2】組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶(HMTs)分析測定

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組蛋白甲基化修飾的時(shí)候,需要甲基轉(zhuǎn)移酶來進(jìn)行催化。舉例:PRMT甲基轉(zhuǎn)移酶(II型特異性)活性/抑制分析試劑盒(比色法)(48次分析),P-3088-48

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PRMT甲基轉(zhuǎn)移酶(II型特異性)活性/抑制分析試劑盒(比色法)是包含zui佳試劑完整實(shí)驗(yàn)組件,它是為簡單,快速熒光法測定II型特異性PRMT甲基轉(zhuǎn)移酶(PRMT5和PRMT7)的活性/抑制而設(shè)計(jì)的.可用于檢測包括哺乳動物、植物、真菌和細(xì)菌等不同種屬來源的培養(yǎng)細(xì)胞或新鮮/凍存組織中的核提取物、純化的酶等樣本.

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二、組蛋白磷酸化

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組蛋白磷酸化是指在組蛋白的四個(gè)尾巴上添加一個(gè)磷酸基,涉及DNA的損傷。

有一些相關(guān)的檢測試劑盒和抗體研究。舉例原位組蛋白H3磷酸化(Ser10)檢測試劑盒(96次分析),P-7001-96,適用于培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞原位特異性測量組蛋白H3。

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EpiQuik原位組蛋白H3磷酸化(Ser10)檢測試劑盒可以原位檢測磷酸化的組蛋白H3(Ser10),操作方便,即時(shí)可用.本試劑盒提供了一整套必要的試劑和方法來檢測貼壁培養(yǎng)細(xì)胞中的磷酸化的組蛋白H3(Ser10).

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EpiQuik原位組蛋白H3磷酸化(Ser10)檢測試劑盒是一種組蛋白H3磷酸化(絲氨酸10)全細(xì)胞檢測技術(shù).檢測實(shí)驗(yàn)中,粘附細(xì)胞培養(yǎng)在常規(guī)的96孔板上,經(jīng)過您的實(shí)驗(yàn)處理后,將細(xì)胞固定并使其滲透性增加.組蛋白H3第10位的絲氨酸被磷酸化是靈敏的DNA損傷標(biāo)志.磷酸化的組蛋白H3(Ser10)可以通過HRP連接的次級抗體顯色反應(yīng)系統(tǒng)檢測,它的量與OD成正比.特點(diǎn)如下:

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1、操作十分快捷,3小時(shí)內(nèi)可完成; 2、獨(dú)創(chuàng)的比色度檢測方法,不接觸放射性物質(zhì),無需進(jìn)行電泳和色譜分析; 3、原位檢測組蛋白H3第10位絲氨酸的磷酸化,無需溶解細(xì)胞; 4、96孔板模式使研究人員能根據(jù)自己需要選擇手工或是高通量分析; 5、操作簡便、結(jié)果可靠、統(tǒng)一的分析條件。

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關(guān)于組蛋白甲基化、組蛋白磷酸化這一期就講到這里啦,后面還有其他的分類再陸續(xù)補(bǔ)充哦!

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http://www.amyjet.com/featured/histone-methylation.shtml


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