導(dǎo)讀

BRAFV600E突變發(fā)生在約10%的結(jié)直腸癌（CRC）患者中，能夠驅(qū)動(dòng)MAPK信號(hào)組成性激活。BRAFV600E?CRC患者預(yù)后不良，對標(biāo)準(zhǔn)治療的反應(yīng)較差，中位總生存期（OS）為BRAF野生型CRC患者的一半。近年來，免疫檢查點(diǎn)阻斷（ICB）療法，特別是阻斷PD-1途徑的藥物，已徹底改變了多種癌癥的治療。但I(xiàn)CB對CRC患者的治療效果較差，特別是轉(zhuǎn)移性微衛(wèi)星穩(wěn)定（MSS）CRC患者對ICB的應(yīng)答率幾乎為0。

近期，美國食品和藥物管理局批準(zhǔn)了BRAF抑制劑encorafenib與抗EGFR抗體西妥昔單抗聯(lián)合治療BRAFV600E?CRC。但該治療方案的客觀緩解率（ORR）僅為20%，臨床獲益不持久，中位無進(jìn)展生存期（PFS）僅為4.3個(gè)月。因此，目前迫切需要新的有效療法來治療這種疾病。

近日，美國麻省總醫(yī)院癌癥中心、哈佛醫(yī)學(xué)院的研究人員合作在Nature Medicine上發(fā)表了題為“Combined PD-1, BRAF and MEK inhibition in BRAFV600Ecolorectal cancer: a phase 2 trial”的文章。研究團(tuán)隊(duì)進(jìn)行了一項(xiàng)proof-of-concept單組Ⅱ期臨床試驗(yàn)，研究了BRAFV600E?CRC中BRAF/MAPK通路抑制和ICB之間的潛在協(xié)同作用。結(jié)果顯示，在臨床結(jié)局良好的患者中，腫瘤細(xì)胞固有免疫程序的誘導(dǎo)更強(qiáng)，MAPK抑制更完全；患者來源類器官免疫程序誘導(dǎo)與MAPK抑制程度相關(guān)。該研究揭示了腫瘤細(xì)胞中MAPK抑制與免疫應(yīng)答之間存在一定的協(xié)同作用，并提示進(jìn)一步的臨床評估可從優(yōu)化的靶向和免疫組合入手。

研究團(tuán)隊(duì)此前在BRAFV600E?CRC中使用BRAF靶向治療組合進(jìn)行的臨床試驗(yàn)表明，BRAF通路抑制與免疫應(yīng)答之間存在潛在聯(lián)系。為探究這種潛在的協(xié)同機(jī)制，研究團(tuán)隊(duì)分析了早期BRAFV600E?CRC患者BRAF/EGFR抑制劑±MEK抑制劑聯(lián)合臨床研究中，71例患者的大量單細(xì)胞RNA測序（RNAseq）數(shù)據(jù)（圖1）。結(jié)果顯示，與無應(yīng)答者相比，應(yīng)答者的T細(xì)胞特征（表明T細(xì)胞水平增加）顯著增高，T細(xì)胞的基線水平和細(xì)胞毒性T細(xì)胞特征也與目標(biāo)病變大小與基線的最佳百分比變化相關(guān)。

此外，與配對基線活檢相比，所有CRC患者在治療15天后的T細(xì)胞、細(xì)胞毒性T細(xì)胞和其他免疫特征都有所增加，表明BRAF通路抑制后腫瘤中T細(xì)胞和免疫浸潤增加。以上結(jié)果表明，BRAFV600E?CRC中BRAF/MAPK抑制與免疫應(yīng)答之間存在潛在相互作用。

基于上述數(shù)據(jù)，研究團(tuán)隊(duì)啟動(dòng)了一項(xiàng)概念性、單組Ⅱ期臨床試驗(yàn)，共納入37名BRAFV600E?CRC患者，聯(lián)用spartalizumab（PDR001）、BRAF抑制劑（dabrafenib）、MEK抑制劑（trametinib）對其進(jìn)行治療（圖2）。主要終點(diǎn)為ORR，次要終點(diǎn)為PFS、疾病控制率（DCR）、緩解持續(xù)時(shí)間和OS。

在37例患者中，有9例獲得了確切的緩解，有1例患者獲得了未證實(shí)的緩解。該治療方案ORR為24.3%（微衛(wèi)星不穩(wěn)定患者ORR為25%）、DCR為70.3% 、中位PFS為4.3個(gè)月、中位OS為13.6個(gè)月，相較dabrafenib聯(lián)合trametinib方案（ORR 7%，中位PFS 3.5個(gè)月），臨床結(jié)局更好。

為了解BRAF/MAPK通路抑制與腫瘤免疫應(yīng)答的潛在相互作用，研究團(tuán)隊(duì)對所有CRC患者的同一腫瘤病灶進(jìn)行了配對預(yù)處理和治療后第15天的腫瘤活檢，收集了23組腫瘤樣本進(jìn)行scRNAseq（圖3）。通過比較治療前和治療中活檢的單個(gè)細(xì)胞群豐度變化，研究團(tuán)隊(duì)觀察到，與PFS<6個(gè)月的患者相比，PFS>6個(gè)月的患者腫瘤上皮細(xì)胞顯著減少，CD45+免疫細(xì)胞、T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞增加。此外，與預(yù)處理相比，治療第15天腫瘤細(xì)胞中差異表達(dá)基因（DEG）顯示，PFS>6個(gè)月患者的免疫相關(guān)基因表達(dá)顯著增加，在PFS<6個(gè)月患者中未觀察到該現(xiàn)象。上述結(jié)果表明，PFS較長的患者腫瘤內(nèi)免疫應(yīng)答更強(qiáng)、MAPK通路抑制更完全。

最后，為評估MAPK抑制與腫瘤細(xì)胞內(nèi)特異性免疫程序誘導(dǎo)之間的潛在關(guān)系，研究團(tuán)隊(duì)從10例患者的基線腫瘤活檢中成功生成了類器官模型，并使用DT對其進(jìn)行處理，通過定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（qPCR）檢測基因表達(dá)（圖4）。結(jié)果顯示，與PFS<6個(gè)月患者的類器官相比，PFS>6個(gè)月患者的類器官中IFN反應(yīng)相關(guān)基因（IFIT1、IFIT2、IFIT3和IRF1）和趨化因子活性（CXCL9, CXCL10和CXCL11）基因的表達(dá)顯著增加。此外，來源于患者的類器官免疫程序誘導(dǎo)水平與MAPK抑制水平呈正相關(guān)。這些數(shù)據(jù)證實(shí)，MAPK通路抑制以腫瘤細(xì)胞固有的方式驅(qū)動(dòng)免疫基因表達(dá)的誘導(dǎo)，并不依賴于來自腫瘤免疫微環(huán)境的刺激。該研究結(jié)果為MAPK的抑制程度可能與免疫基因誘導(dǎo)程度直接相關(guān)提供了進(jìn)一步的證據(jù)。

綜上所述，研究團(tuán)隊(duì)確定了BRAF/MAPK抑制和免疫應(yīng)答之間潛在的協(xié)同機(jī)制，發(fā)現(xiàn)了腫瘤細(xì)胞內(nèi)由MAPK通路抑制觸發(fā)的關(guān)鍵免疫程序證據(jù)，并證實(shí)了BRAF/MAPK抑制誘導(dǎo)免疫基因是腫瘤細(xì)胞固有的，不依賴于腫瘤微環(huán)境中的細(xì)胞。該研究結(jié)果提示，將針對BRAF/MAPK通路的其他治療方法與免疫療法相結(jié)合可能會(huì)增強(qiáng)免疫反應(yīng)，從而改善患者的預(yù)后狀況。

參考文獻(xiàn)：

Tian J, Chen J.H, Chao S.X. et al. Combined PD-1, BRAF and MEK inhibition in BRAFV600Ecolorectal cancer: a phase 2 trial. Nat Med 29, 458–466 (2023). https://doi.org/10.1038/s41591-022-02181-8

來源：測序中國