果蠅性活力實(shí)驗(yàn)?zāi)P汀颈本?shí)驗(yàn)外包】
果蠅性活力實(shí)驗(yàn)?zāi)P?/strong>【北京實(shí)驗(yàn)外包】
【造模機(jī)制】果蠅具有世代周期短,容易飼養(yǎng),繁殖力強(qiáng)的特點(diǎn),是研究延緩獲老藥物及行為遺傳學(xué)的良好材料。本試驗(yàn)將藥物加入培養(yǎng)基中,觀察藥物對(duì)果蟾性活力的影響,
【造模方法】
1.動(dòng)物和培養(yǎng) 黑腹果蠅。培養(yǎng)皿、恒溫生化培養(yǎng)箱[(25土2)℃,相對(duì)濕度 50%~時(shí)間75%。果蠅培養(yǎng)基:培養(yǎng)基含玉米粉 10g、白糖 13.5g.晾脂 1.5g.丙酸 1ml,干醛母粉1.2g,加水至100g。配制后加入藥物,使培養(yǎng)基含藥為1%。培養(yǎng)條件:取 3*8 培養(yǎng)管內(nèi)裝(1.5±0.2)cm 厚度的含藥培養(yǎng)基,培養(yǎng)溫度(23±1)℃,相對(duì)濕度 60%~80%,自然光照時(shí)間。
2.模型制備 果蠅性活力實(shí)驗(yàn)方法接下述實(shí)驗(yàn)步驟依次重復(fù)進(jìn)行:
①收集 8 小時(shí)內(nèi)羽化的果蠅成蟲,用乙醚麻醉后按雌,雄分養(yǎng)。雄果蠅隨機(jī)分組,每組 10管,每管 1 只;
②實(shí)驗(yàn)開始后,用3~4 天齡的處女蠅以 3:1 的比例放人雄果蠅中,記錄交配潛伏期(合管后開始交配的時(shí)間)、振翅次數(shù)(交配前雄蠅追逐雌蠅時(shí)的振翅動(dòng)作),交配時(shí)間:
③于 1 小時(shí)后,用 CD麻醉,分出雌蠅,另管放置;
④每 2 周重復(fù)步驟2 和 3,計(jì)4次,中途有意外死亡,則補(bǔ)人預(yù)備組雄果蠅,
3.觀察指標(biāo)觀察記錄黑腹果蠅的交配潛伏期,交配前振翅次數(shù)、交配時(shí)間。
【模型特點(diǎn)】若藥物能縮短黑腹果蠅的交配潛伏期,延長(zhǎng)交配時(shí)間,增加振翅次數(shù),則認(rèn)為藥物可增強(qiáng)果蠅性活力。若作用效果相反則認(rèn)為該種物質(zhì)(比如鉛)對(duì)性活力產(chǎn)生毒性作用。
【應(yīng)用范圍】
1.檢測(cè)菜藥物增強(qiáng)果蠅性活力的作用提示該藥物可能也對(duì)糾正男性性功能低下方面有一定的實(shí)用價(jià)值。
2.化學(xué)污染物等(如鉛)對(duì)果蠅性活力的毒性作用由于人群調(diào)查及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)客觀條件的限制,某些指標(biāo)難于從中獲取直接的觀察結(jié)果,特別是鉛對(duì)生殖內(nèi)分泌系統(tǒng)的毒性作用所致性行為、生殖能力的改變。為了解這些化學(xué)污染物的生殖毒性作用及其潛在的遠(yuǎn)期效應(yīng)提供資料。
【注意事項(xiàng)】
1.果蠅生長(zhǎng)的最適應(yīng)溫度為 20~25℃,大于 30℃果蠅不育或死亡,低溫則生活力下降,故一般采用 21~22℃,相對(duì)濕度為50%~60%。
2.藥物在培養(yǎng)基中應(yīng)分散均勻培養(yǎng)環(huán)境溫、濕度應(yīng)恒定,并保持無菌條件。
3.實(shí)驗(yàn)前,雄蠅未有過交配行為。
【模型評(píng)價(jià)】果蠅是真核生物,具有與人類相似的生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖、衰老等階段。在研究果蠅近百年的歷史上,人類取得了舉世矚目的成就,特別是在遺傳生物學(xué)方面的研究成果,為最終完成人類基因組計(jì)劃提供了理論的指導(dǎo)和技術(shù)上的支持。果蠅的應(yīng)用相當(dāng)廣泛,在藥物和功能食品研究中,果蠅常用作延緩衰老實(shí)驗(yàn)?zāi)P?在毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序和方法中,果蠅伴性隱性致死試驗(yàn)用于檢測(cè)化學(xué)物質(zhì)的遺傳毒性。
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