重復(fù)懸吊應(yīng)激致小鼠性行為缺損模型【疾病動物模型】

【造模機(jī)制】應(yīng)激是在內(nèi)外環(huán)境劇變的刺散下,機(jī)體出現(xiàn)的在精神、神經(jīng)、內(nèi)分泌和免疫等方面的綜合應(yīng)答狀態(tài),可引起生殖內(nèi)分泌功能障礙,表現(xiàn)為睪丸分泌睪酮水平的下降,性行為缺損。懸吊應(yīng)激方法是以動物尾部為支點(diǎn)將其懸吊于水面上,造成動物身體和心理應(yīng)激。動物接受同種應(yīng)激源一定時間后可產(chǎn)生耐受性,通過延長懸吊時間可增加應(yīng)激強(qiáng)度,避冤色動物產(chǎn)生耐受現(xiàn)象。

【造模方法】1.動物和試劑雄性昆明小鼠,體重 25～30g,繩子,水槽,溫度計等。2.模型制備小鼠以尾部為支點(diǎn)將其懸吊于水面上,以前肢剛接觸水面為準(zhǔn),水溫(20±2)℃,每日 1 次,連續(xù) 10 天,并逐漸延長應(yīng)數(shù)時間:第 1~3 天懸吊 2 小時,第 4～6 天懸吊3小時,第7~5 天懸吊 4 小時,第 10~11 天懸吊 5 小時,懸吊時間為 9:00～14:00。每次解除懸吊后 10 分鐘給藥,連續(xù) 15～30 天。懸吊第10 天開始,將雄性小鼠放入單只飼養(yǎng)的動情期雌性小鼠籠中。3.樣本采集和觀察指標(biāo)觀察記錄 20 分鐘內(nèi)如下性行為:舔,跨騎和交配的發(fā)生數(shù)、發(fā)生率及跨騎潛伏期,并取血測定血漿皮質(zhì)酮和睪酮水平。亦可取雌性小鼠與雄性小鼠合籠(雌*雄=3：1),置于暗室內(nèi)觀察,記錄合籠至第 1 次交配的時間(交配潛伏期)及 20 分鐘內(nèi)交配次數(shù)。

【模型特點(diǎn)】重復(fù)懸吊應(yīng)激 5天,小鼠性行為開始下降,重復(fù)應(yīng)激 10 天,小鼠性行為明顯減低,表現(xiàn)為舔、跨騎和交配數(shù)明顯減少,跨騎潛伏期顯著延長,跨騎和交配率明顯降低。血漿皮質(zhì)酮明顯增高,而睪酮水平顯著降低。

【應(yīng)用范圍】用懸吊應(yīng)激模型,小鼠連續(xù)應(yīng)激 10 天,并循環(huán)增加應(yīng)激強(qiáng)度,每次應(yīng)激前30 分鐘,服用待測藥物,觀察待測藥物對應(yīng)激性性行為低下的保護(hù)作用。結(jié)果表明,應(yīng)激模型組小鼠性行為明顯減少,甚至達(dá)到缺損的程度,同時血漿睪酮水平明顯降低。

【注意事項】懸吊時小鼠間應(yīng)有一定的距離,以免小鼠相互攀爬,同時應(yīng)注意小鼠自身的攀爬。

【模型評價】機(jī)體重復(fù)接觸同種性質(zhì)同種強(qiáng)度的應(yīng)激原,會對其產(chǎn)生耐受性,但不同應(yīng)激原之間無交叉耐受性,而且耐受性出現(xiàn)的快慢和應(yīng)激原的性質(zhì),強(qiáng)度和接觸的頻率密切相關(guān),應(yīng)激強(qiáng)度越大,產(chǎn)生耐受性所需要的時間就越長。根據(jù)這一性質(zhì),本文循環(huán)增加應(yīng)激強(qiáng)度,即延長應(yīng)激時間,使機(jī)體始終處于對應(yīng)激原敏感狀態(tài)即高水平皮質(zhì)酮狀態(tài),以造成應(yīng)激性損傷模型。

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