詳細解說---生物信號采集處理系統(tǒng)是如何做離體蛙心灌流實驗的
作為蛙心起搏點的靜脈竇能按一定節(jié)律自動產(chǎn)生興奮。因此，只要將離體失去神經(jīng)支配的蛙心保持在適宜的環(huán)境中，在一段時間內(nèi)仍能產(chǎn)生節(jié)律性興奮和收縮活動；另一方面，心臟正常的節(jié)律性活動有賴于內(nèi)環(huán)境理化因素的相對穩(wěn)定，所以改變灌流液的成分，則可以引起心臟活動的改變。那么觀察鈉、鉀、鈣三種離子以及腎上腺素、乙酰膽堿等因素對心臟活動的影響，ZL-620生物信號采集處理系統(tǒng)就成了不可少的實驗設(shè)備。
一起看看實驗過程~~
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【實驗對象】
蟾蜍。
【實驗器材】
蛙類解剖手術(shù)器材、蛙釘、蛙板、林格液、滴管、蛙心夾、蛙心插管、微調(diào)固定器、鐵支架、滑輪、搪瓷杯、縫線、張力換能器、培養(yǎng)皿、ZL-620生物信號采集處理系統(tǒng)。0.65%NaC1、2%CaCl2、1%KCl、1：10000腎上腺素溶液和1：10000乙酰膽堿溶液。
ZL-620生物信號采集處理系統(tǒng)
【方法和步驟】
1．離體蛙心制備
（1）取蟾蜍一只，搗毀腦和脊髓，將其仰臥固定于蛙板上。從劍突下將胸部皮膚向上剪開（或剪掉），然后剪掉胸骨，打開心包，暴露心臟。
圖2-12-1 ?蛙心各部分組成示意圖
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（2）在主動脈干下方穿2根線。一條在左主動脈上端結(jié)扎作插管時牽引用，另一根則在動脈圓錐上方系一松結(jié)，用于結(jié)扎和固定蛙心插管。
（3）左手持左主動脈上方的結(jié)扎線，用眼科剪在松結(jié)上方左主動脈根部剪一小斜口，右手將盛有少許林格液的大小適宜的蛙心插管由此剪口處插入動脈圓錐。當插管冰到達動脈圓錐時，再將插管稍稍后退，并轉(zhuǎn)向心室中間方向，在心室收縮期插入心室（圖2-12-2）。蛙心插管是否進入心室，可根據(jù)插管內(nèi)林格液的液面是否能隨心室的舒縮而上下波動來判斷。如蛙心插管已進入心室，則將預(yù)先準備好的檢結(jié)扎緊，并固定在蛙心插客的側(cè)鉤上，以免蛙心插管滑出心室。剪斷主動脈左右分支。
圖2-12-2?插管插入心室示意圖
（4）輕輕提起蛙心插管以抬高心臟，用一根線在靜脈竇與腔靜脈交界處做一結(jié)扎，結(jié)扎線應(yīng)盡量下壓，以免傷及靜脈竇。在結(jié)扎線外側(cè)剪斷所有組織，將蛙心游離出來。
（5）用新鮮林格液反復(fù)換洗蛙心插管內(nèi)含血的林格液，直至蛙心插管內(nèi)無血液殘留為止。此時離體蛙心已制備成功，可供實驗。
2．實驗裝置 ????????????????????????
（1）按圖2-12-3將蛙心插管固定在鐵支架上，用蛙心夾在心室舒張期夾住心尖，并將蛙心夾的線頭通過滑輪連至張力換能器的應(yīng)變?nèi)旧?，此線應(yīng)有一些的緊張度。
（2）按圖2-12-3連接線路，張力換能器輸出線接一通道（亦可選擇其他通道）。
圖2-12-3?蛙心灌流儀器連接方法
（3）打開計算機，啟動ZL-620生物信號采集處理系統(tǒng)。點擊菜單“實驗/常用生理學實驗”，選擇“離體蛙心灌流”。ZL-620放大器和采樣參數(shù)如所示。?
3．實驗觀察
（1）描記正常的蛙心搏動曲線，注意觀察心中頻率、心室的收縮和舒張幅度。
（2）把蛙心插管內(nèi)的林格液全部更換為等量的0.65%NaCl溶液，觀察心臟活動及曲線變化。當效應(yīng)明顯時應(yīng)及時吸出灌流液，用新鮮林格液反復(fù)換洗數(shù)次，待曲線恢復(fù)正常后做下一步。
（3）滴入2%CaCl2溶液1~2滴，觀察及換液方法同上。
（4）滴入1%KCl溶液1~2滴，觀察及換液方法同上。
（5）滴入1：10 000的腎上腺素溶液1~2滴，觀察及換液方法同上。
（6）滴入1：10 000的乙酰明堿溶液1~2滴，觀察方法同上。
【注意事項】
制備蛙心標本時，勿傷及靜脈竇。
上述各實驗項目一旦出現(xiàn)作用應(yīng)立即用新鮮林格液換洗，以免心肌受損，而且須待心跳恢復(fù)正常后方能進行下一步實驗。
蛙心插管內(nèi)液面應(yīng)保持恒定，以免影響結(jié)果。
滴加藥品和換取新鮮林格液，須及時做標記，以便觀察分析。
吸新鮮林格液和吸蛙心插管內(nèi)溶液的吸管應(yīng)區(qū)分用，不可混淆使用。同時，吸管不能接觸蛙心插管壁，以免影響實驗結(jié)果。
化學藥作用不明顯時，可再適量滴加，密切觀察藥劑量添加后的實驗結(jié)果。
【實驗結(jié)果】
?????將實驗結(jié)果打印輸出，并加注說明。
【思考題】
上述各種因素對心臟收縮活動有什么影響？為什么？
林格液何以能維持蛙心搏動？哺乳動物心臟離體后是否也能搏動？
