艾美捷 開曼生物SOD檢測(cè)試劑盒特點(diǎn)
超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)是生物體系中抗氧化酶系的重要組成成員,廣泛分布在微生物、植物和動(dòng)物體內(nèi)。
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分類
按照?SOD?中金屬輔基的不同,大致可將?SOD?分為三大類,分別為?Cu/Zn-SOD、Mn-SOD、?Fe-SOD。
①Cu/Zn-SOD: 呈藍(lán)綠色,主要存在于真核細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi),被認(rèn)為存在于比較原始的生物類群中且分布zui廣的一種。
②Mn-SOD:呈粉紅色,主要存在于原核生物和真核生物的線粒體中。
③Fe-SOD:呈黃褐色,主要存在于原核細(xì)胞中 。它們可以有效地清除超氧陰離子自由基(帶有?1?個(gè)未成對(duì)電子的同時(shí),還帶有?1?個(gè)負(fù)電荷),避免其對(duì)細(xì)胞過度的損傷,具有抗氧化、抗輻射及抗衰老等功能。
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超氧化物歧化酶(SOD)反應(yīng)機(jī)理
SOD?的催化作用是通過金屬離子?Mn+1 (氧化態(tài))和?Mn (還原態(tài))的交替電子得失實(shí)現(xiàn)的。一般認(rèn)為 超氧陰離子自由基首先與金屬離子形成內(nèi)界配合物,Mn+1被體內(nèi)的 超氧陰離子自由基還原為?Mn?,同時(shí)生成?O2?,Mn又被?HO2· 氧化為?Mn+1?,同時(shí)生成?H2O2。而?SOD?又被氧化為初始氧化態(tài)的?SOD。zui后,H2O2在過氧化氫酶的作用下,被催化分解為水(H2O)和?O2。
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超氧化物歧化酶(SOD)測(cè)定方法
超氧化物歧化酶活性的主要測(cè)定方法有直接法、鄰苯三酚自氧化法、細(xì)胞色素C還原法、化學(xué)發(fā)光法及熒光動(dòng)力學(xué)法等。近年來又建立了多種新方法,如免疫學(xué)方法、簡易凝膠過濾擴(kuò)散法、J譜氧電J法、微量測(cè)活方法等 ?。
1.直接法 原理是根據(jù)O2.-?或產(chǎn)生O2.-?的物質(zhì)本身的性質(zhì)測(cè)定O2.-的歧化量,從而確定SOD的活性。經(jīng)典的直接法包括:脈沖輻射分解法、電子順磁共振波法(EPR)、核磁共振法。由于所需的儀器設(shè)備價(jià)格昂貴,一般較少應(yīng)用。
2.鄰苯三酚自氧化法:原理是基于經(jīng)典的分光光度法,在堿性條件下,鄰苯三酚自氧化成紅桔酚,用紫外-可見光譜跟蹤波長為325nm、420nm或650nm(經(jīng)典為420nm),同時(shí)產(chǎn)生O2.-,SOD催化O2.-?發(fā)生歧化反應(yīng)從而抑制鄰苯三酚的自氧化,樣品對(duì)鄰苯三酚自氧化速率的抑制率,可反映樣品中的SOD含量。本法具有特異性強(qiáng),所需樣本量少(僅50μl),操作快速簡單,重復(fù)性好,靈敏度高,試劑簡單等優(yōu)點(diǎn)。
3.細(xì)胞色素C還原法:原理是黃嘌呤-黃嘌呤氧化酶體系中產(chǎn)生的O2.-使一定量的氧化型細(xì)胞色素C還原為還原型細(xì)胞色素C,后者在550nm有zui大光吸收。在SOD存在時(shí),由于一部分O2.-被SOD催化而歧化,O2.-還原細(xì)胞色素C的反應(yīng)速度則相應(yīng)減少,即其反應(yīng)受到抑制。將抑制反應(yīng)的百分?jǐn)?shù)與SOD濃度作圖可得到抑制曲線,由此計(jì)算樣品中SOD活性。本法是間接法中的經(jīng)典方法,但本法靈敏度較低。
4.化學(xué)發(fā)光法:原理是黃嘌呤氧化酶在有氧條件下,催化底物黃嘌呤或次黃嘌呤發(fā)生氧化反應(yīng)生成尿酸,同時(shí)產(chǎn)生O2.-。后者可與化學(xué)發(fā)光劑魯米諾反應(yīng),使其產(chǎn)生激發(fā)。SOD能清除O2.-從而抑制魯米諾的化學(xué)發(fā)光。本法可應(yīng)用于SOD的微量測(cè)定,不僅靈敏度高,簡便易行,而且特異性與準(zhǔn)確性至少與細(xì)胞色素C還原法類似。
5.免疫學(xué)方法:其測(cè)定的是SOD活性,免疫學(xué)方法則可測(cè)定樣品中SOD的質(zhì)量,因此特異性較好,是較理想的測(cè)定SOD方法,免疫法有放射免疫法、化學(xué)發(fā)光免疫分析法、ELISA法等。但其缺陷是只能測(cè)定抗體相應(yīng)的抗原,對(duì)于檢測(cè)不同種類的SOD,則須制備相應(yīng)的特異性抗體,手續(xù)繁瑣。
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超氧化物歧化酶(SOD)應(yīng)用領(lǐng)域
1.食品方面
SOD?在蔬菜水果中含量較高,如香蕉、山楂、刺梨、獼猴桃、大蒜等,其他如扇貝、雞肉等中也有分布。SOD?的活性在果皮中高于果肉,在新鮮水果中高于放置后的水果。并以各種形式被加工成保健品和食品添加劑等作為使用,如添加有?SOD?的牛奶、啤酒、軟糖等類型的食品營養(yǎng)強(qiáng)化劑 。
2.日化工業(yè)方面
皮膚衰老和損傷是人體衰老的重要特征,而人體衰老是由于活性氧類自由基堆積或清除產(chǎn)生障礙的后果,體內(nèi)的多余自由基會(huì)引起細(xì)胞損傷以及色素沉著。由于人的皮膚直接與氧氣接觸,會(huì)造成皮膚的老化和損傷。外源?SOD?的補(bǔ)充有利于延緩皮膚衰老、抗氧化、祛色斑的功用。故國內(nèi)外許多化妝品廠家都在自身產(chǎn)品中加入了一定比例的?SOD。如法國的雅詩蘭黛石榴水、日本的?SKII?神仙水,以及國內(nèi)大寶?SOD?蜜等。
3.抗炎方面
基于?SOD?是作用于超氧陰離子自由基的專一歧化反應(yīng)催化劑,故?SOD?作為醫(yī)藥產(chǎn)品,在治療因自由基作用而導(dǎo)致的炎癥、自身免疫性、心腦血管疾病等都有著顯著療效。SOD?可利用其抗氧化作用抑制關(guān)節(jié)炎、胸膜炎、急性氣管炎等炎癥類型 。
4.抗腫瘤方面
在人體內(nèi)SOD可有效的通過清除超氧陰離子自由基zui終能達(dá)到抑制癌細(xì)胞的效果,Mn-SOD表達(dá)效果更為突出 。
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艾美捷?開曼生物的超氧化物歧化酶(SOD)檢測(cè)試劑盒——經(jīng)過CiteAb權(quán)威驗(yàn)證的,被眾多研究人員信賴并選擇的一款SOD檢測(cè)試劑盒(2020年引文數(shù)量全球)
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艾美捷?開曼生物SOD檢測(cè)試劑盒特點(diǎn)如下:
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樣本類型:血清,血漿,紅和細(xì)胞裂解液,組織勻漿,細(xì)胞裂解液,線粒體
較精確度:組內(nèi)CV:3.2%,組間CV:3.7%
檢測(cè)范圍:0.005-0.05 units/ml(一個(gè)unit定義:50%超氧自由基歧化所需的酶量。)
檢測(cè)SOD的類型:可檢測(cè)所有三種類型SOD(Cu/Zn、Mn和FeSOD)