進(jìn)行脫氧核糖核酸酶 (DNase) 測(cè)試以了解生物體水解 DNA 并將其用作碳源的能力，而碳源又將用作生物體生長(zhǎng)的能量。

一種 DNase 瓊脂培養(yǎng)基，呈淡綠色，主要用作差異培養(yǎng)基。 它具有細(xì)菌生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)。

如果培養(yǎng)基中的有機(jī)體將 DNA 分解成更小的片段，它就有能力產(chǎn)生脫氧核糖核酸酶。 DNA 分解的一個(gè)指標(biāo)是它不與甲基綠結(jié)合。 顏色最終會(huì)消失，您會(huì)注意到菌落周?chē)幸粋€(gè)無(wú)色區(qū)域。

圖1：DNA水解測(cè)試； A象限和B象限呈陽(yáng)性，而C象限呈陰性。

圖2：陽(yáng)性 DNase 測(cè)試的特點(diǎn)是接種線(xiàn)周?chē)幸粋€(gè)清晰的區(qū)域。 如果瓊脂始終保持綠色和透明，則測(cè)試為陰性

DNase Test 的用途是什么？

進(jìn)行它是為了找出生物體水解脫氧核糖核酸的能力。

它有助于區(qū)分具有產(chǎn)生脫氧核糖核酸酶能力的金黃色葡萄球菌和其他不具有產(chǎn)生 DNase 能力的葡萄球菌。

它可用于進(jìn)行凝固酶測(cè)試，尤其是在沒(méi)有血漿時(shí)。 它也是比凝固酶測(cè)試更可靠的測(cè)試，因?yàn)橛袝r(shí)凝固酶測(cè)試的結(jié)果難以解釋。

它能夠區(qū)分卡他支原體與人類(lèi)來(lái)源的革蘭氏陰性雙球菌，如淋病奈瑟菌和腦膜炎奈瑟菌。

實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

媒介

• DNase瓊脂（含甲基綠指示劑）

試劑

• 鹽酸，但僅在介質(zhì)沒(méi)有指示劑時(shí)使用。

• 本生燈

• 接種環(huán)

脫氧核糖核酸酶 (DNase) 測(cè)試如何進(jìn)行？

注意：確保瓊脂板表面清潔干燥。 通過(guò)簡(jiǎn)單地在板上畫(huà)線(xiàn)將瓊脂板分成三部分。

圖 3：板的左側(cè)測(cè)試為陰性，而右側(cè)的 DNase 測(cè)試測(cè)試為陽(yáng)性。

接種

接種可以通過(guò)兩種方式進(jìn)行。

1.點(diǎn)接種——使用一個(gè)環(huán)，接觸一個(gè)有機(jī)體菌落并接種到盤(pán)子的一小塊區(qū)域上。 它通常放置在板的一個(gè)部分的中心。 孵化后，您會(huì)注意到直徑約 10 毫米的厚斑塊的生長(zhǎng)。 將板在 37 攝氏度下孵育至少 24 小時(shí)。

2.條帶/線(xiàn)條紋接種 – 使用大量約 4 厘米長(zhǎng)的接種物畫(huà)一條線(xiàn)。 從邊緣開(kāi)始，直到瓊脂板的中心。 在 37 攝氏度的溫度下孵育至少 24 小時(shí)。

注意：如果您使用的介質(zhì)沒(méi)有指示劑，您需要做的是加入足量的 1N 鹽酸。 讓它在那里靜置幾分鐘，以便試劑可以完全吸收到板中。 幾分鐘后，在深色背景下檢查板。

結(jié)果解釋

陽(yáng)性

陽(yáng)性結(jié)果的特征是測(cè)試生物體周?chē)袩o(wú)色介質(zhì)。 這意味著被測(cè)試的生物體具有水解 DNA 的能力。 DNase 測(cè)試陽(yáng)性生物的例子有：

• 金黃色葡萄球菌
  

• 粘質(zhì)沙雷氏菌

• M.卡他哈利斯

• 一些空腸彎曲桿菌菌株?

陰性

如果介質(zhì)的顏色（綠色）保持不變，則測(cè)試為陰性。 它只是意味著被測(cè)試的生物體沒(méi)有水解 DNA 的能力。 例子是：

• 表皮葡萄球菌
  

• 淋病奈瑟菌