從2019年爆發(fā)新冠以來，核酸檢測對大眾來說已經(jīng)快變成日常生活的一部分了，而且目前對絕大多數(shù)人來說，其重要性幾乎可以和吃飯睡覺相比。核酸檢測技術(shù)越來越為廣大人民所熟悉。不知道大家想過沒有，檢測人員面對成千上萬管樣本和步驟繁瑣的檢測步驟，如何保證整個實(shí)驗(yàn)過程中樣本不會出現(xiàn)混淆、差錯、污染和交叉污染？前段時間出現(xiàn)的假陽性報(bào)告到底是什么情況？其實(shí)說到底，這些都和實(shí)驗(yàn)室管理有關(guān)。醫(yī)院及檢驗(yàn)所的核酸檢測系統(tǒng)自動化程度較高，出錯的概率還是極低的，即便如此，一旦出現(xiàn)了問題，還是會造成極其嚴(yán)重的后果和極其惡劣的影響。因此，實(shí)驗(yàn)室中對檢測過程的監(jiān)管成為一項(xiàng)重要工作。

科研工作者在實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常需要操作數(shù)量較多的樣本，確保樣品不污染不混淆是非常重要的。作為一家生物科研服務(wù)公司，歐易技術(shù)實(shí)驗(yàn)中心主要為廣大科研工作者提供技術(shù)服務(wù)，每天處理的樣本有幾千份，那么我們是如何保證這些樣本不出差錯呢？

在質(zhì)量管理體系中有要求：做我所寫，寫我所做。我們的實(shí)驗(yàn)人員在大量的實(shí)踐中摸索出了一套自己的方案，來防止各種錯誤，可以更好的為客戶提供優(yōu)質(zhì)可靠的服務(wù)，讓客戶放心。

下面以一個流程相對簡單的項(xiàng)目的執(zhí)行過程為例給大家做個介紹。

實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

每次實(shí)驗(yàn)前先將實(shí)驗(yàn)中所需的試劑和儀器準(zhǔn)備好：各類儀器打開，提前30min將磁珠由4℃冰箱取出平衡至室溫，試劑提前解凍，標(biāo)記好當(dāng)天實(shí)驗(yàn)要用到的所有樣本管。當(dāng)然，最重要的事情是核對好當(dāng)天要開展實(shí)驗(yàn)的樣本，樣本核對使用清單，核對一個標(biāo)記一個，按照順序擺放好。

圖1 | 樣本名與任務(wù)單一一核對

實(shí)驗(yàn)中

（1）轉(zhuǎn)移樣本：

這個步驟是把1.5ml樣本管中的核酸樣本轉(zhuǎn)移到八連管中，便于后續(xù)的排槍操作。將八連管標(biāo)記好順序，把樣本按照圖2的對應(yīng)順序逐一從1.5ml 樣本管中轉(zhuǎn)移需要體積的樣本到對應(yīng)編號的八連管內(nèi)，每加完一排后將八連管與對應(yīng)樣本管拍照記錄，有幾排樣本，需要拍幾張照片，如做到第四排，則是第四張照片（圖3）：

圖2?|?加完第一排樣本

圖3?|?加到第四排樣本

（2）PCR程序選擇及試劑配制：

樣本取好之后，先在PCR儀中將要使用的PCR程序調(diào)出，拍照確認(rèn)所選程序正確（圖4）。之后進(jìn)行PCR試劑的配制：將提前解凍的試劑按照SOP上的順序擺放好，如遇到管蓋顏色相同的，一定要看清楚試劑名稱，確認(rèn)試劑無誤，拍照（圖5）。

圖4?|?PCR程序調(diào)用

圖5?|?試劑按加樣順序擺放

（3）純化：

PCR程序完成后，樣本需要進(jìn)行磁珠純化，純化磁珠提前轉(zhuǎn)移需要的體積到96孔板中，再將樣本按照順序加到對應(yīng)的96孔板中，與磁珠混合，樣本轉(zhuǎn)移前后均拍照確認(rèn)（圖6，圖7）。

圖6?|?第一排樣本與磁珠混合

圖7?|?純化細(xì)節(jié)

（4）加接頭及barcode：

barcode是測序時用于區(qū)別樣本的一段序列，一般由6堿基或8堿基組成。因?yàn)樵撔蛄惺怯脕韰^(qū)分樣本的，所以這個步驟是整個實(shí)驗(yàn)過程的重中之重，為確保接頭信息無誤，加完一排蓋一排；全部加完后拍照，檢查時查看接頭體積大小。

圖8?|?樣本及接頭擺放

圖9?|?完成加接頭及barcode

（5）文庫轉(zhuǎn)移：

建好的文庫純化結(jié)束后需要從純化用的96孔板中轉(zhuǎn)移至新的八連排內(nèi)；轉(zhuǎn)移完一排蓋一排，防止加串排。

圖10?|?吸取純化板中的樣本

圖11?|?轉(zhuǎn)移至新的八連管中

圖12?|?吸取第二排純化板中的樣本?

圖13?|?轉(zhuǎn)移至第二排新八連管，第一排的樣本管蓋已蓋好

（6）文庫轉(zhuǎn)管：

由于八連管不便于標(biāo)記，所以還需要將八連管中的文庫再轉(zhuǎn)移到標(biāo)記好的1.5ml樣本管中，轉(zhuǎn)移完成后將八連管和1.5ml樣本管擺好拍照確認(rèn)。

圖14?|?八連管中的文庫和標(biāo)記好的1.5ml管

圖15?|?完成文庫從八連管到1.5ml樣本管的轉(zhuǎn)移

以上就是一個項(xiàng)目的實(shí)驗(yàn)操作過程，每個步驟都進(jìn)行記錄和拍照，真正做到“做我所寫，寫我所做；做我所拍，拍我所作”。實(shí)驗(yàn)結(jié)束，將這些照片上傳到電腦，既可用于復(fù)盤當(dāng)天實(shí)驗(yàn)操作是否正確無誤，也便于后續(xù)項(xiàng)目回顧查詢，核對實(shí)驗(yàn)細(xì)節(jié)。

通過以上的各個步驟記錄，歐易公司技術(shù)部確保了實(shí)驗(yàn)過程的嚴(yán)謹(jǐn)性，避免了樣本混淆和差錯，為客戶提供真實(shí)可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。即使問題出現(xiàn)了數(shù)據(jù)異常，這些照片提供了快速排查的相關(guān)信息，可以迅速排除操作過程中的問題，使定位問題的速度更快，準(zhǔn)確性更高，結(jié)果也更具有說服力。

這些防錯小技巧，你學(xué)會了么？

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