急性肺血栓栓塞癥動物模型【實(shí)驗(yàn)外包】

【造模機(jī)制】靜脈注射膠原蛋白與腎上腺素的混合血栓誘導(dǎo)劑，可致動物血液黏度增加，并處于應(yīng)激狀態(tài)，促使肺血栓形成；或?qū)⒆泽w血加凝血酶后形成的纖維蛋白原制備的自體血栓,由股靜脈輸人,可致急性肺栓塞(acute pulmonary embolism,APE)，臨床上稱肺血栓栓塞癥(pulmonary thromboembolism,PTE)。

【造模方法】

1.小鼠 PTE模型 尾靜脈注射膠原蛋白（225μ8/只）與腎上腺素（9μg/只）的混合誘導(dǎo)劑，注射后觀察5分鐘內(nèi)小鼠死亡數(shù)。

2.家兔PTE模型家兔，體重2.5～3.0kg,雌雄不限。在無菌條件下，自耳緣靜脈取血2ml，加入20U凝血酶后于5ml注射器內(nèi)混勻，室溫下靜置過夜，形成牢固血栓。將其制成直徑 2~4mm,長 7～10mm的圓柱形栓子后備用。靜脈緩慢推注戍***鈉(30mg/kg)麻醉動物，仰臥位固定，頸部剪毛后，碘酒酒精局部消毒，再切開一長約2cm的橫向切口。暴露并切開左側(cè)頸靜脈，插入5F導(dǎo)管，深度約4～5cm或直至右心房，經(jīng)導(dǎo)管注入栓子后快速推注生理鹽水5ml以防栓子滯留于導(dǎo)管或頸靜脈內(nèi)，栓子數(shù)目以兩個為宜。結(jié)扎頸靜脈并縫合切口后，持續(xù)密切觀察家兔的體征變化。觀察實(shí)驗(yàn)所需時限后，無菌條件下麻醉家兔，打開胸腔腹腔后，迅速取出肺臟、心臟、肝臟、主動脈和脂肪等器官和組織。沿其走行剝離肺動脈樹。因肺組織失血變白，可很快找到注入栓子，再以其為標(biāo)志區(qū)分并獲取所需栓塞或非栓塞的肺動脈及其相應(yīng)肺組織。

3.犬PTE模型，實(shí)驗(yàn)組在消毒平皿內(nèi)預(yù)先加入膠原蛋白 20mg，后采犬自體靜脈血10m置于消毒平皿內(nèi)，并加入凝血酶200U，靜置2小時后，切成約 5mm×5mm×5mm 的凝血塊,將其懸浮于 10ml生理鹽水中備用。用 3%戊***鈉 1ml/kg(30mg/kg)肌注麻醉犬，經(jīng)股靜脈注入血栓，隨后給予10ml生理鹽水快速推入，建立急性 PTE 模型。

【模型特點(diǎn)】

1.小鼠 PIE 模型 尾靜脈注射膠原蛋白與腎上腺素混合誘導(dǎo)劑后,小鼠出現(xiàn)呼吸急促，5分鐘內(nèi)小鼠死亡。

3.犬PIE模型 該模型在血流動力學(xué)變化顯示：栓塞后，心率明顯增快，肺毛細(xì)血管楔壓（PAWP）基本不變，肺動脈平均壓（PAMP)、肺動脈收縮壓（PASP）、肺動脈舒張壓（PADP）栓塞后即刻明顯升高，栓塞約1小時左右上述指標(biāo)下降。血管造影、CT檢測呈現(xiàn)肺栓塞典型陽性表現(xiàn)。病理檢測大體標(biāo)本可見肺膨脹不均勻，頂部指向肺門的楔形梗死灶，胸膜及切面可見散在出血點(diǎn)灶，顯微鏡下可見多處肺動脈血栓栓塞。D二聚體檢測在栓塞后約30分鐘左右明顯升高，1~2小時達(dá)到高峰，48小時左右開始下降，7天左右恢復(fù)正常。

2.家兔 PIE模型 注入栓子后10~20分鐘，家兔均出現(xiàn)呼吸急促，口唇發(fā)紺和肺內(nèi)干濕啰音等肺栓塞體征，解剖檢查肺內(nèi)血栓形成。家兔體積比鼠大，有利于做肺的數(shù)字減影檢查和查找栓子。

【應(yīng)用范圍】用于探討急性肺血栓栓塞癥發(fā)病機(jī)制研究及其防治措施和藥物療效的評價研究。

【注意事項(xiàng)】控制所注射的栓子大小,避免過大體積栓子直接栓塞肺主干動脈或心臟冠狀動脈主干，而導(dǎo)致動物猝死。

【模型評估】本模型復(fù)制方法，具有操作方便、重復(fù)性好的優(yōu)點(diǎn)。

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