胰蛋白酶是一種胰腺絲氨酸蛋白酶，具有基于帶正電荷的賴氨酸和精氨酸側(cè)鏈的底物特異性（Brown?和?Wold 1973）。這種酶由胰腺分泌，參與食物蛋白質(zhì)的消化和其他生物過程。胰蛋白酶是一種中等大小的球狀蛋白質(zhì)，作為無活性的酶原胰蛋白酶原產(chǎn)生（Chen et al. 2009）。

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歷史：

1876?年，胰蛋白酶由?Kuhne?首次命名，他描述了這種胰酶的蛋白水解活性。他比較了胰蛋白酶和胃蛋白酶，發(fā)現(xiàn)區(qū)分因素是最佳?pH?值。1931?年，Northrop?和?Kunitz?在?1930?年首次純化胃蛋白酶后不久通過結(jié)晶純化胰蛋白酶。

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1974?年確定了三維結(jié)構(gòu)，作為胰蛋白酶所屬的絲氨酸內(nèi)肽酶?S1?家族的原型。

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在?1980?年代末和?1990?年代初，使用重組胰蛋白酶的定點(diǎn)誘變確定了特定氨基酸殘基的作用（Sprang等人1987、McGrath等人1989、Corey?和?Craik 1992?和?Corey等人1992）。

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在?1990?年代后期，人們研究了胰蛋白酶在遺傳性胰腺炎中的作用，并確定?Arg117His?的突變是防止自溶從而引起胰腺炎的原因。

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今天，胰蛋白酶繼續(xù)用于開發(fā)細(xì)胞和組織培養(yǎng)方案（Soleimani等人2009、Banumathi等人2009?和?Yang等人2009），以及通過肽測(cè)序技術(shù)鑒定蛋白質(zhì)（Manz等人. 2004?和?Schuchert等人2009）。在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，胰蛋白酶在胰腺疾病中的作用，包括囊性纖維化?(Tzetis et al. 2007, and Li et al. 2009)?和慢性胰腺炎?(Chen et al. 2009)，一直是當(dāng)前研究的主題，并且胰蛋白酶已被用于模擬骨關(guān)節(jié)炎中關(guān)節(jié)軟骨的分解（Wang et al. 2008）。

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艾美捷Worthington胰蛋白酶特異性：

胰蛋白酶切割賴氨酸和精氨酸氨基酸殘基?C?端側(cè)的肽。如果脯氨酸殘基位于切割位點(diǎn)的羧基側(cè)，則不會(huì)發(fā)生切割。如果酸性殘基位于裂解位點(diǎn)的任一側(cè)，則水解速率已顯示較慢。

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艾美捷Worthington胰蛋白酶分子特征：

牛胰腺表達(dá)兩種形式的胰蛋白酶，主要的陽離子形式和次要的陰離子形式。這些蛋白質(zhì)序列具有?72%?的同一性，而它們的編碼區(qū)具有?78%?的同一性。

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這些蛋白質(zhì)中的每一種都被進(jìn)一步加工成替代形式。催化胰蛋白酶包含一個(gè)靈活的“自溶環(huán)”（殘基?G145-V157）（Schroeder?和?Shaw 1968?和?Bartunik等人1989），并且在該環(huán)內(nèi)的?K148-S149?處占主導(dǎo)地位的單鏈形式?B-胰蛋白酶的自溶導(dǎo)致形成A-胰蛋白酶。在?K193-D194?的進(jìn)一步自溶導(dǎo)致?Psi-胰蛋白酶的形成（Fehlhammer?和?Bode 1975）。

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陽離子和陰離子胰蛋白酶蛋白均以胰蛋白酶原酶原形式表達(dá)，具有?15?個(gè)殘基信號(hào)肽?(M1-A15)?和?8?個(gè)殘基前肽?(F16-K23)。所有已知胰蛋白酶的三維折疊都是高度保守的。此外，催化三聯(lián)體和催化三聯(lián)體側(cè)翼的區(qū)域是高度保守的（Hartley 1970）。 ?

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艾美捷Worthington胰蛋白酶的應(yīng)用：

組織解離，尤其是與其他酶如膠原酶和彈性蛋白酶結(jié)合時(shí)

通過“胰蛋白酶消化”收獲細(xì)胞

線粒體分離

蛋白質(zhì)的體外研究

從塑料和玻璃中去除單層細(xì)胞

各種血凝程序

流式細(xì)胞儀?DNA?分析的樣品制備

胰蛋白酶圖譜

指紋和測(cè)序工作

環(huán)境監(jiān)測(cè)

降低組織培養(yǎng)中的細(xì)胞密度

傳代細(xì)胞

切割融合蛋白

從純化的糖蛋白中產(chǎn)生糖肽