SPDP修飾穿膜肽交聯(lián)——制備穿膜肽-β-葡萄糖苷酶偶聯(lián)物并鑒定其穿膜活性和酶活性。方法：采用異型雙功能交聯(lián)劑N-琥珀酰亞胺基-3-(2-毗啶二硫)-丙酸酯(SPDP)將穿膜肽一增強(qiáng)型綠色熒光蛋白融合蛋白(CPPs-ECFP)、β-葡萄糖苷酶進(jìn)行共價(jià)交聯(lián),經(jīng)N-NAT Superflow Cartridge ,Sephadex G-75層析柱分離純化。采用還原型和非還原型聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PACE)對(duì)偶聯(lián)物進(jìn)行鑒定;偶聯(lián)物與E細(xì)胞共同孵育,置于熒光顯微鏡下觀察,鑒定其穿膜活性;采用β-葡萄糖苷酶測(cè)試盒(DBGD-100)鑒定其酶活性。

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結(jié)果偶聯(lián)物SDS-PACE非還原型電泳高分子量端可見明顯條帶,而還原型電泳分別在穿膜肽和β-葡萄糖苷酶分子量相應(yīng)位置可見明顯條帶;在熒光顯微鏡下與偶聯(lián)物共同孵育后的E細(xì)胞內(nèi)可見綠色熒光;用β-葡萄糖苷酶測(cè)試盒(DBCD-100)測(cè)定,偶聯(lián)物仍然保持良好的酶活性,約為同等濃度β-葡萄糖苷酶活性的80%。結(jié)論：應(yīng)用SPDP成功制備了穿膜肽-β-葡萄糖苷酶偶聯(lián)物,并且偶聯(lián)物保持良好穿膜活性和酶活性。

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產(chǎn)品名稱：SPDP-PEG-CH2CH3COOH

狀態(tài)：固體/粉末/溶液

產(chǎn)品規(guī)格：mg

保存：冷藏

儲(chǔ)藏條件：-20℃

儲(chǔ)存時(shí)間：1年

用途：科研

溫馨提醒：僅供科研，不能用于人體實(shí)驗(yàn)

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產(chǎn)品名稱：精氨酸特異性交聯(lián)劑

狀態(tài)：固體/粉末/溶液

產(chǎn)品規(guī)格：mg

保存：冷藏

儲(chǔ)藏條件：-20℃

儲(chǔ)存時(shí)間：1年

用途：科研

溫馨提醒：僅供科研，不能用于人體實(shí)驗(yàn)

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產(chǎn)品名稱：對(duì)-疊氮苯甲酰溴

狀態(tài)：固體/粉末/溶液

產(chǎn)品規(guī)格：mg

保存：冷藏

儲(chǔ)藏條件：-20℃

儲(chǔ)存時(shí)間：1年

用途：科研

溫馨提醒：僅供科研，不能用于人體實(shí)驗(yàn)

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相關(guān)產(chǎn)品：

對(duì)苯二異硫氰酸酯

乙二醇 -雙(琥珀酸 N-羥基琥珀酰亞胺酯)

二(N-羥基琥珀酰亞胺)戊二酸酯

癸二酸二(N-琥珀酰亞胺)酯

3,3'-二硫代雙(磺酸琥珀酰亞氨基丙酸酯)

瑞禧WFF.2022.12