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自動(dòng)化核酸質(zhì)控常青樹——安捷倫2100生物分析儀

2022-05-26 15:03 作者:分子科普小feng子  | 我要投稿

核酸質(zhì)控在我們做生物實(shí)驗(yàn)時(shí)是一項(xiàng)可能會(huì)被忽視,但是其實(shí)很重要的工作。因?yàn)槲覀兊暮怂豳|(zhì)量會(huì)直接影響到我們之后的實(shí)驗(yàn)成敗,如果沒有對(duì)核酸進(jìn)行質(zhì)量控制,我們甚至可能會(huì)在下游實(shí)驗(yàn)中得到錯(cuò)誤的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

而我們傳統(tǒng)的核酸質(zhì)控往往采用凝膠電泳的方法。步驟繁瑣,耗時(shí)耗力,實(shí)驗(yàn)效率較低。也容易產(chǎn)生人為誤差,影響質(zhì)控分析結(jié)果。而且對(duì)于多次結(jié)果之間也無法直接比較,更多的依靠我們對(duì)于條帶的主觀判斷。

那么我們有沒有靈敏度更高,實(shí)驗(yàn)效率更好實(shí)驗(yàn)步驟更簡(jiǎn)單的核酸質(zhì)控方式呢?

答案是 當(dāng)然有!

2100生物分析儀于1999年上市,是安捷倫自動(dòng)化電泳產(chǎn)品中的常青樹,也是目前在安捷倫樣本質(zhì)控產(chǎn)品中唯一一臺(tái)可以檢測(cè)DNA,RNA和蛋白質(zhì)的儀器。儀器配套DNA,RNA和蛋白質(zhì)的多款檢測(cè)試劑盒,可以檢測(cè)不同靈敏級(jí)別和不同分子量的核酸和蛋白,操作非常便宜。與傳統(tǒng)凝膠電泳方法相比,可以減少人工實(shí)驗(yàn)步驟,只需三步就可以實(shí)現(xiàn)樣本質(zhì)控。

該生物分析儀擁有專利數(shù)字化評(píng)價(jià)RNA質(zhì)量體系:RIN值。可以清晰精準(zhǔn)的對(duì)RNA質(zhì)量進(jìn)行評(píng)估,是業(yè)內(nèi)公認(rèn)的RNA檢測(cè)金標(biāo)準(zhǔn)。RIN值數(shù)字為1到10。 數(shù)字越大表示核酸質(zhì)量越好。 如果我們下游需要做測(cè)序的話,我們核酸RIN值必須要大于7,不然我們就會(huì)面臨測(cè)序失敗風(fēng)險(xiǎn)。

2100生物分析采用微控流芯片技術(shù),運(yùn)行和分析軟件同一個(gè),簡(jiǎn)單易操作,可以提供準(zhǔn)確的結(jié)果,檢測(cè)核酸濃度,純度,和完整性。檢測(cè)會(huì)通過獨(dú)創(chuàng)的芯片來實(shí)行,在芯片背后就有著微流孔道。

操作原理

1. 樣品自樣品孔處沿微通道移動(dòng)

2. 樣品被注入分離微通道

3. 樣品組分通過電泳被分離

4. 各組分通過其熒光被檢測(cè),并被轉(zhuǎn)換成膠樣圖像(條帶)和電泳色譜圖(峰)

不同的樣本類型有相對(duì)應(yīng)的試劑盒可以選擇。試劑盒中就包含儀器配套的芯片和所有試劑。試劑中包含染料,Gel,Marker和標(biāo)準(zhǔn)品。在第一次使用試劑盒的時(shí)候需要把染料和Gel混合,并且渦旋混勻,形成Mix。Mix避光儲(chǔ)存在4℃中,這樣后續(xù)可以繼續(xù)使用。在正式實(shí)驗(yàn)前,所有的試劑必須提前取出,恢復(fù)至室溫,才能進(jìn)行下一步操作。


在上機(jī)之前需要進(jìn)行芯片制備。在購買2100生物分析儀的時(shí)候會(huì)配置芯片工作臺(tái)。首先需要將芯片放置在芯片工作臺(tái)上通過針管注入染料膠Mix,整個(gè)過程需要等待一分鐘,直到Mix注滿芯片下方的微孔道。然后我們只需要按照說明書指導(dǎo)開始加樣即可。

等芯片制備完畢之后,我們就可以上機(jī)檢測(cè)啦。在電腦上操作也非常簡(jiǎn)單,新人友好,很容易上手,屬于有手就會(huì)的簡(jiǎn)單程度。

第一步:確認(rèn)芯片是否正確放入儀器

當(dāng)你的芯片準(zhǔn)備就緒的時(shí)候,你的軟件上就會(huì)出現(xiàn)芯片的圖案。如果你的軟件上出現(xiàn)了其他圖案,他們也有各自所代表的含義,需要我們進(jìn)一步調(diào)整。

像下圖這樣,就表示你已經(jīng)可以開始進(jìn)行下一步操作啦。

第二步:選擇檢測(cè)類型

我們可以選取右邊的ASSAYS 按鍵,選擇我們檢測(cè)的類型:DNA,RNA 或者蛋白質(zhì)檢測(cè)。

第三步:設(shè)置樣本信息和選擇文件儲(chǔ)存位置

我們對(duì)樣本進(jìn)行標(biāo)注或者添加別的信息,設(shè)置好儲(chǔ)存位置,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后就可以在電腦指定的文件夾里找到我們的Row data。

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第四步:開始分析

等上述內(nèi)容都設(shè)施妥當(dāng)之后,我們只需要用鼠標(biāo)按一下綠色的START按鈕,就可以開始我們的檢測(cè)了。


以單細(xì)胞RNA樣本為例,我們可以選擇膠圖或者是電泳峰圖進(jìn)行結(jié)果的展示。軟件也會(huì)顯示出樣本RNA的RIN值。從圖中可以樣本在18s和28s有兩個(gè)明顯的峰值,沒有過多雜峰,膠圖也很清新,沒有明顯拖帶。RIN值等于9.4。 由此可見,這個(gè)樣本的RNA完整度非常不錯(cuò)。

屏幕對(duì)面的你,如果學(xué)?;蛘邌挝挥?100生物分析儀的話,趕緊上車吧!下單試劑盒,輕松做實(shí)驗(yàn),省錢又省心!今天的科普就到這里啦,咱們青山不改,綠水長流!下周見!

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自動(dòng)化核酸質(zhì)控常青樹——安捷倫2100生物分析儀的評(píng)論 (共 條)

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