辣根過氧化物酶?(HRP)?綴合物通過改進的?Nakane?和?Kawaoi?程序?(J. Histochem. Cytochem. 1974. 22 , 1084)?制備。過氧化物酶偶聯(lián)物通常用于免疫組織化學、蛋白質印跡和?ELISA。親和純化的抗辣根過氧化物酶和偶聯(lián)物可用于檢測辣根過氧化物酶抗原或用于放大含有?HRP?的試劑的信號。對于哺乳動物細胞的免疫染色，使用抗辣根過氧化物酶的優(yōu)勢在于降低背景，因為抗體不識別在這些細胞中發(fā)現(xiàn)的內源性過氧化物酶樣酶。

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艾美捷辣根過氧化物酶HRP標記親和純化驢抗兔IgG（H+L）二抗已通過?ELISA?和/或固相吸附測試，以確保與牛、雞、山羊、豚鼠、敘利亞倉鼠、馬、人、小鼠、大鼠和綿羊血清蛋白的交叉反應J小，但它可能會交叉與其他物種的免疫球蛋白發(fā)生反應。

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艾美捷辣根過氧化物酶HRP標記親和純化驢抗兔IgG（H+L）二抗參數(shù)：

目標：?兔

宿主：驢

抗體形式：?Whole IgG

特異性：?IgG (H+L)

J小交叉反應性：牛、雞、山羊、豚鼠、敘利亞倉鼠、馬、人、小鼠、大鼠、綿羊血清蛋白

偶聯(lián)物：辣根過氧化物酶

類別：?全?IgG?親和純化抗體

克隆性：多克隆

RRID：?AB_10015282

物理狀態(tài)：凍干固體

儲存和再水化：將凍干的固體儲存在?2-8°C。用指定體積的?dH2O?再水化，如果不清楚則離心。在使用當天準備工作稀釋液。在?2-8°C?下可穩(wěn)定保存約?6?周，為未稀釋液體。

純度：?使用與瓊脂糖珠偶聯(lián)的抗原，通過免疫親和層析從抗血清中純化抗體。

緩沖液：?0.01M?磷酸鈉，0.25M NaCl，pH 7.6

穩(wěn)定劑：?15 mg/ml?牛血清白蛋白（不含?IgG，不含蛋白酶）

建議的工作濃度或稀釋范圍：

1:500 - 1:5,000?用于免疫組織/細胞化學

1:5,000 - 1:100,000?用于?ELISA?和使用顯色底物的蛋白質印跡

1:10,000 - 1:200,000?用于使用?ECL?底物的蛋白質印跡

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稀釋因子以范圍的形式呈現(xiàn)，因為J佳稀釋度是許多因素的函數(shù)，例如抗原密度、滲透性等。實際使用的稀釋度須憑經(jīng)驗確定。

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Alexa Fluor? 488?偶聯(lián)抗體在?493 nm?處最大吸收光，并在?519 nm?附近發(fā)出峰值熒光。在水性封固劑中，它們比?FITC、Cy2?和?DyLight 488?更亮。建議使用?Alexa Fluor? 488?偶聯(lián)物，以在所有需要綠色熒光染料的免疫熒光程序中實現(xiàn)最高靈敏度，但包括在塑料封固劑中封固的方案除外。