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新西蘭|低極性人參皂苷(Rg3)提取

2021-06-27 16:35 作者:TMR出版集團(tuán)  | 我要投稿

?來源??TMR Publishing Group

?作者??Traditional Medicine Research 編輯部??

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研究表明,新西蘭主要人參皂苷的平均含量遠(yuǎn)高于中國和韓國的人參。生人參中存在的主要人參皂苷是極性人參皂苷,這些主要的人參皂苷含有多個分子結(jié)構(gòu)較大的糖部分,不能被人體完全吸收,而低極性人參皂苷,可以很容易地穿過腸壁,與極性人參皂苷相比,表現(xiàn)出相對較高的生物和藥理活性。因此,將主要人參皂苷轉(zhuǎn)化為極性較低的人參皂苷將顯著提高新西蘭種植人參的生物利用度和藥理活性。本研究采用不同的提取條件,來調(diào)節(jié)人參皂苷不同成分的濃度分布。

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研究方法

酸提取

稱取約1 g人參粉,加入20 mL一定濃度的(0.5、0.25、0.125和0 mol/L)HAc水溶液中。超聲提取1h,離心,取上清液,重復(fù)三次,合并上清液。用NaOH水溶液調(diào)節(jié)至中性,用正丁醇對人參皂苷進(jìn)行液-液萃取,洗滌三次除去雜質(zhì)。將剩余的正丁醇溶液蒸發(fā)濃縮,冷凍干燥成粉末。


堿提取

稱取約1 g人參粉,加入20mL一定濃度的(0.4、0.2、0.1和0 mol/L)NaOH水溶液中。超聲提取1h,離心,取上清液,重復(fù)三次,合并上清液。用HAc水溶液調(diào)節(jié)至中性,用正丁醇對人參皂苷進(jìn)行液-液萃取,洗滌三次除去雜質(zhì)。將剩余的正丁醇溶液蒸發(fā)濃縮,冷凍干燥成粉末。


高溫前處理

稱取約1 g人參粉,加入40 mL去離子水中,在高壓釜中分別提取10、20和40 min。過濾,上清液用正丁醇進(jìn)行液-液萃取。洗滌三次除去雜質(zhì)。將剩余的正丁醇溶液蒸發(fā)濃縮,冷凍干燥成粉末。


不同酸堿度下高溫制備人參提取物

稱取約1 g人參粉,加入不同酸堿度(3.0、5.0、7.0、9.0和11.0)的40 mL去離子水中。在高壓釜中萃取100min。過濾,上清液用NaOH或HAc水溶液調(diào)節(jié)至中性。水層用正丁醇進(jìn)行液-液萃取。洗滌三次除去雜質(zhì)。將剩余的正丁醇溶液蒸發(fā)濃縮,冷凍干燥成粉末。


高效液相色譜測定

色譜條件:流動相由去離子水(A)和甲基纖維素(B)組成,梯度洗脫,0-15 min 20% B、15-25 min 20-31% B、25-35 min 31-35% B、35-40 min 35-36% B、40-45 min 36-39% B、45-75 min 39-95% B、75-85 min 95-20% B和20 % B再沖5min,柱溫25℃,流速為1mL/min,進(jìn)樣量20 μL,檢測波長203 nm。

人參皂苷的百分比按下式計算:人參皂苷X的百分比=人參皂苷X的含量/總?cè)藚⒃碥蘸俊?100%,總?cè)藚⒃碥蘸繛?3種定量人參皂苷的總量。

結(jié)果

不同提取條件對人參皂苷高效液相色譜圖的影響

用HPLC-UV法分析了不同處理產(chǎn)生的人參皂苷成分。采用23種人參皂苷標(biāo)準(zhǔn)品建立高效液相色譜法。人參皂苷在20至75分鐘內(nèi)彼此分離良好(圖A)。極性人參皂苷峰出現(xiàn)在20-45分鐘之間,低極性人參皂苷峰分布在50-75分鐘之間。與未處理的人參根(圖B)相比,所有處理過的人參根提取物的高效液相色譜圖都有不同程度的變化(圖C-H)。

A.人參皂苷標(biāo)準(zhǔn)混合物


B.去離子水在50℃超聲提取1h


C.0.5 mol/L HAc水溶液在50℃超聲提取1h


D.0.4mol/L氫氧化鈉水溶液在50℃超聲提取1h


E.去離子水在121℃(0.1兆帕)下提取40min


?F.pH 3.0的水溶液在121℃(0.1兆帕)下提取100min


G.pH 7.0的水溶液在121℃(0.1兆帕)下提取100min


H.?pH 11.0的水溶液在121℃(0.1兆帕)下提取100?min


不同提取條件對人參皂苷轉(zhuǎn)化的影響

酸處理可以將極性人參皂苷轉(zhuǎn)化為極性較低的人參皂苷,如Rg3,這種轉(zhuǎn)化在測試濃度范圍內(nèi)(0-0.5 mol/L)存在酸劑量依賴性效應(yīng)。雖然酸處理增強了轉(zhuǎn)化,但是酸促進(jìn)轉(zhuǎn)化非常低,難以滿足工業(yè)生產(chǎn)的需要。

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不同HAc濃度下提取的極性人參皂苷百分比(A)和Rg3百分比(B)。p < 0.05


在堿性溶液中,只有極少數(shù)極性人參皂苷(Sbcd和Segf)轉(zhuǎn)化為低極性人參皂苷。


不同濃度的氫氧化鈉處理產(chǎn)生的極性人參皂苷、Sbcd和Segf的百分比。Sbcd是人參皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Rc和Rd的總和,指極性PPD型人參皂苷。Segf是人參皂苷Re、Rg1和Rf的總皂苷,指極性PPT型人參皂苷。極性是指總的極性人參皂苷,由Sbcd和Segf組成。

高溫處理對極性人參皂苷向低極性人參皂苷的轉(zhuǎn)化表現(xiàn)出顯著的影響。隨著處理時間的增加,Segf含量顯著降低,而低極性人參皂苷顯著增加。在低極性人參皂苷中,Rg3占低極性人參皂苷總量的一半以上,是通過Sbcd降解獲得的。此外,Segf會降解形成低極性人參皂苷Rk3和Rh4。

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Sbcd (A)、Segf (B)、低極性人參皂苷(C)和Rg3 (D)在121°C(0.1 MpA)下提取不同時間的百分比。p < 0.05

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高溫提取是將極性人參皂苷轉(zhuǎn)化為低極性人參皂苷的有效方法。此外,酸性溶劑可以促進(jìn)這種轉(zhuǎn)化,而堿性提取條件會導(dǎo)致相反的效果。

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Sbcd (A)、Segf (B)、低極性人參皂苷(C)和Rg3 (D)在不同的酸堿度下于121°C(0.1 Mpa)提取100min的百分比。

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結(jié)論

酸處理可以促進(jìn)極性人參皂苷降解為低極性人參皂苷,在高溫低酸堿度條件下,極性人參皂苷幾乎可以全部轉(zhuǎn)化為低極性人參皂苷。相反,堿處理可能對這種轉(zhuǎn)化有負(fù)面影響。



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引用格式


Chen W, Xu WL, Shi DX, Balan P, Popovich D.. Enrichment of the less polar ginsenoside (Rg3) from ginseng grown in New Zealand by post-harvest processing and extraction.?Tradit Med Res. 2021;6(4):39. doi:10.12032/TMR20210606233


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