一、名詞解釋(2分×15, 共30分) 等電聚焦電泳 P/O比 NADPH 核酶 酶的活性中心 酶活力單位 酮體 乙醛酸循環(huán) 糖異生作用 RNA剪接 多順?lè)醋? 分子伴侶 反饋抑制 聯(lián)合脫氨基作用 第二信使 二、是非判斷題(1分×15, 共15分；正確的標(biāo) √，錯(cuò)誤的標(biāo)×) 1. ? ? ?淀粉、糖原和纖維素都屬于均一多糖。（ ?） 2. ? ? ?肽平面是指肽鍵的所有4個(gè)原子和與之相連的兩個(gè)α碳原子，形成的具有一定剛性的平面，以便使肽鏈保持結(jié)構(gòu)上的相對(duì)穩(wěn)定性。（ ?） 3. ? ? ?聚丙烯酰胺凝膠電泳可用于分離蛋白質(zhì)，但不能分離核酸。（ ?） 4. ? ? ?在競(jìng)爭(zhēng)性抑制中，底物、抑制劑爭(zhēng)相與酶結(jié)合，但這種結(jié)合是不可逆的。（ ?） 5. ? ? ?同工酶是指能催化同一種化學(xué)反應(yīng)，但其分子結(jié)構(gòu)卻有所不同的一組酶。（ ?） 6. ? ? ?Southern印跡用于分析RNA, 而Northern印跡用于分析DNA。（ ?） 7. ? ? ?種子發(fā)芽時(shí)可將脂肪轉(zhuǎn)化為糖，有可能是通過(guò)乙醛酸循環(huán)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。（ ?） 8. ? ? ?非糖物質(zhì)合成葡萄糖的過(guò)程稱為糖異生，是糖酵解途徑的簡(jiǎn)單逆轉(zhuǎn)。（ ?） 9. ? ? ?四氫葉酸是一碳單位的載體，它在嘌呤和嘧啶核苷酸生物合成中發(fā)揮重要作用。（ ?） 10. ? 已從大腸桿菌中分離到DNA聚合酶Ⅰ、DNA聚合酶Ⅱ和DNA聚合酶Ⅲ。其中DNA聚合酶Ⅰ是一個(gè)多亞基酶，是主要負(fù)責(zé)DNA復(fù)制的酶。（ ?） 11. ? 啟動(dòng)子是指RNA聚合酶識(shí)別、結(jié)合和開(kāi)始轉(zhuǎn)錄的一段DNA序列。（ ?） 12. ? 密碼子專一性主要由前兩位堿基決定，第3位堿基的重要性不大，此稱為密碼子的兼并性。（ ?） 13. ? 在原核生物mRNA前體的加工中，其5’端形成帽子結(jié)構(gòu)，3’端加上多聚腺苷酸（poly A）尾巴。（ ?） 14. ? 代謝途徑阻斷可通過(guò)加入酶抑制劑或采用基因敲除的手段來(lái)實(shí)現(xiàn)。（ ?） 15. ? 根據(jù)當(dāng)前認(rèn)識(shí)，限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別DNA的序列多屬回文結(jié)構(gòu)。（ ?） 三、簡(jiǎn)答題(1-4題每題7分， 5-8題每題8分, 共60分) 1. ?列舉3種生物化學(xué)領(lǐng)域的英文刊物，以及您如何利用網(wǎng)絡(luò)資源獲取生化方面的研究信息。 2. ?簡(jiǎn)述蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)和超二級(jí)結(jié)構(gòu)。 3. ?簡(jiǎn)述磷酸戊糖途徑及其生物學(xué)意義。 4. ? ? ?簡(jiǎn)述中心法則的基本內(nèi)容，哪些方面是目前的研究熱點(diǎn)？ 5. ? ? ?簡(jiǎn)述聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）的原理和應(yīng)用。 6. ? ? ?凝膠過(guò)濾層析(gel filtration chromatography)與親和層析的原理有何不同？ 7. ? ? ?瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯凝膠電泳的原理有何不同？ 8. ? ? ?糖酵解的主要步驟及關(guān)鍵酶？ 四、分析論述題(15分×3, 共45分) 1. ? ? ?蛋白質(zhì)分離和提純的常用方法及原理。 2. ? ? ?正常菌株中某酶由3亞基組成，具有催化活性，其突變株中該酶喪失了催化活性，試從基因序列、代謝和酶的結(jié)構(gòu)等方面分析酶失活的原因。 3. ? ? ?下面英文摘自2005年3月的Proc Natl Acad Sci USA，談?wù)勂渲兴N(yùn)含的生化知識(shí)、原理和技術(shù)手段, 以及您對(duì)此項(xiàng)研究的概括評(píng)價(jià)。 Title: Biosynthesis of a D-amino acid in peptide linkage by an enzyme from frog skin secretions. Abstract D-amino acids are present in some peptides from amphibian skin. These residues are derived from the corresponding L-amino acids present in the respective precursors. From skin secretions of Bombinae, we have isolated an enzyme that catalyzes the isomerization of an L-Ile in position 2 of a model peptide to D-allo-Ile. In the course of this reaction, which proceeds without the addition of a cofactor, radioactivity from tritiated（含氚的）water is incorporated into the second position of the product. The amino acid sequence of this isomerase（異構(gòu)酶）could be deduced from cloned cDNA and genomic DNA. After expression of this cDNA in oocytes（卵母細(xì)胞）of Xenopus laevis, isomerase activity could be detected. Polypeptides related to the frog skin enzyme are present in several vertebrate species, including humans.

一、名詞解釋

等電聚焦電泳：一種以蛋白質(zhì)等電點(diǎn)為基礎(chǔ)的電泳技術(shù)，通過(guò)在pH梯度中將蛋白質(zhì)分離成不同等電點(diǎn)的帶，用于研究蛋白質(zhì)的異構(gòu)體、修飾和相互作用等。

P/O比：細(xì)胞在進(jìn)行氧化磷酸化過(guò)程中，每用掉1個(gè)氧分子生成3個(gè)ATP的比值。P代表ADP轉(zhuǎn)化為ATP的過(guò)程，O代表氧氣參與氧化過(guò)程。

NADPH：還原型輔酶NADP+的還原形式，參與很多生物化學(xué)反應(yīng)，如光合作用中的光反應(yīng)和酮糖途徑中的反應(yīng)。

核酶：催化RNA水解、合成和修飾的酶類，包括核糖核酸酶和核糖核酸合成酶等。

酶的活性中心：酶分子中特定的區(qū)域，能與底物結(jié)合并催化化學(xué)反應(yīng)，包括底物結(jié)合位點(diǎn)和催化位點(diǎn)。

酶活力單位：用于表示酶活性的單位，通常是單位時(shí)間內(nèi)催化底物轉(zhuǎn)化的量。

酮體：由肝臟在低碳水化合物飲食或饑餓狀態(tài)下合成的物質(zhì)，包括乙酰乙酸、β-羥丁酸和丙酮。

乙醛酸循環(huán)：細(xì)胞內(nèi)的一種代謝途徑，將乙醛酸轉(zhuǎn)化為乙酰輔酶A，并進(jìn)一步參與三羧酸循環(huán)和氧化磷酸化。

糖異生作用：細(xì)胞內(nèi)一系列反應(yīng)，將非糖物質(zhì)轉(zhuǎn)化為葡萄糖或其他糖類物質(zhì)的過(guò)程，用于維持能量供應(yīng)和碳源平衡。

RNA剪接：在基因表達(dá)過(guò)程中，將前體mRNA中的非編碼區(qū)域剪切掉，將編碼區(qū)域連接起來(lái)形成成熟mRNA的過(guò)程。

多順?lè)醋樱篋NA雙螺旋結(jié)構(gòu)中的兩條鏈，其中一條鏈從5’端到3’端的方向與另一條鏈相反。

分子伴侶：能與其他蛋白質(zhì)相互作用并調(diào)節(jié)其結(jié)構(gòu)和功能的蛋白質(zhì)，包括分子伴侶和分子伴侶復(fù)合物。

反饋抑制：在酶催化的代謝途徑中，產(chǎn)物或中間產(chǎn)物通過(guò)調(diào)節(jié)酶的活性來(lái)抑制自身的合成，以維持代謝平衡。

聯(lián)合脫氨基作用：在氨基酸代謝中，將氨基酸轉(zhuǎn)化為酮體或其他化合物，并釋放出氨基團(tuán)的過(guò)程。

第二信使：在細(xì)胞內(nèi)傳遞信號(hào)的分子，可以增強(qiáng)或抑制細(xì)胞內(nèi)的某些反應(yīng)，如環(huán)磷酸腺苷、環(huán)鳥(niǎo)苷酸和二鳥(niǎo)苷酸等。

二、是非判斷題

淀粉、糖原和纖維素都屬于均一多糖。（√）

肽平面是指肽鍵的所有4個(gè)原子和與之相連的兩個(gè)α碳原子，形成的具有一定剛性的平面，以便使肽鏈保持結(jié)構(gòu)上的相對(duì)穩(wěn)定性。（√）

聚丙烯酰胺凝膠電泳可用于分離蛋白質(zhì)，但不能分離核酸。（×）

在競(jìng)爭(zhēng)性抑制中，底物、抑制劑爭(zhēng)相與酶結(jié)合，但這種結(jié)合是不可逆的。（×）

同工酶是指能催化同一種化學(xué)反應(yīng)，但其分子結(jié)構(gòu)卻有所不同的一組酶。（√）

Southern印跡用于分析RNA, 而Northern印跡用于分析DNA。（×）

種子發(fā)芽時(shí)可將脂肪轉(zhuǎn)化為糖，有可能是通過(guò)乙醛酸循環(huán)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。（×）

非糖物質(zhì)合成葡萄糖的過(guò)程稱為糖異生，是糖酵解途徑的簡(jiǎn)單逆轉(zhuǎn)。（√）

四氫葉酸是一碳單位的載體，它在嘌呤和嘧啶核苷酸生物合成中發(fā)揮重要作用。（√）

已從大腸桿菌中分離到DNA聚合酶Ⅰ、DNA聚合酶Ⅱ和DNA聚合酶Ⅲ。其中DNA聚合酶Ⅰ是一個(gè)多亞基酶，是主要負(fù)責(zé)DNA復(fù)制的酶。（×）

啟動(dòng)子是指RNA聚合酶識(shí)別、結(jié)合和開(kāi)始轉(zhuǎn)錄的一段DNA序列。（√）

密碼子專一性主要由前兩位堿基決定，第3位堿基的重要性不大，此稱為密碼子的兼并性。（√）

在原核生物mRNA前體的加工中，其5’端形成帽子結(jié)構(gòu)，3’端加上多聚腺苷酸（poly A）尾巴。（√）

代謝途徑阻斷可通過(guò)加入酶抑制劑或采用基因敲除的手段來(lái)實(shí)現(xiàn)。（√）

根據(jù)當(dāng)前認(rèn)識(shí)，限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別DNA的序列多屬回文結(jié)構(gòu)。（√）

三、簡(jiǎn)答題

列舉3種生物化學(xué)領(lǐng)域的英文刊物，以及您如何利用網(wǎng)絡(luò)資源獲取生化方面的研究信息。

答案可能會(huì)根據(jù)個(gè)人實(shí)際情況有所不同，以下是一些常見(jiàn)的生物化學(xué)領(lǐng)域的英文刊物：

Journal of Biological Chemistry (JBC)

Nature

Cell

Biochemistry

Journal of Molecular Biology

Protein Science

Molecular Cell

EMBO Journal

Science

利用網(wǎng)絡(luò)資源獲取生化方面的研究信息可以通過(guò)以下途徑：

在各大學(xué)、科研機(jī)構(gòu)的圖書(shū)館網(wǎng)站上搜索相關(guān)的期刊文章和論文。

使用學(xué)術(shù)搜索引擎（如Google Scholar、PubMed）來(lái)查找特定的研究文章和綜述。

關(guān)注生化領(lǐng)域的學(xué)術(shù)社交媒體平臺(tái)（如ResearchGate、Academia.edu），瀏覽其他研究人員的研究和發(fā)表的文章。

參加學(xué)術(shù)會(huì)議和研討會(huì)，了解最新的研究成果和前沿領(lǐng)域的進(jìn)展。

加入學(xué)術(shù)研究團(tuán)隊(duì)或?qū)嶒?yàn)室，與導(dǎo)師和同事合作開(kāi)展研究，并獲得最新的研究信息。

簡(jiǎn)述蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)和超二級(jí)結(jié)構(gòu)。

蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)是指由多個(gè)氨基酸殘基之間的氫鍵和其他非共價(jià)相互作用所形成的穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。常見(jiàn)的二級(jí)結(jié)構(gòu)包括α-螺旋和β-折疊片。α-螺旋由螺旋形狀的氨基酸殘基鏈組成，氫鍵連接相鄰的殘基。β-折疊片由多個(gè)β鏈狀殘基組成，通過(guò)氫鍵連接相鄰的殘基。蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)對(duì)于蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性和功能起著重要的作用。

超二級(jí)結(jié)構(gòu)是指由多個(gè)二級(jí)結(jié)構(gòu)單元相互組合而成的更大的結(jié)構(gòu)單元。常見(jiàn)的超二級(jí)結(jié)構(gòu)包括蛋白質(zhì)的域和蛋白質(zhì)的亞單位。域是蛋白質(zhì)的一部分，具有相對(duì)獨(dú)立的結(jié)構(gòu)和功能。亞單位是由多個(gè)蛋白質(zhì)鏈組成的復(fù)合物，每個(gè)鏈都可以有自己的二級(jí)結(jié)構(gòu)。蛋白質(zhì)的超二級(jí)結(jié)構(gòu)決定了蛋白質(zhì)的整體結(jié)構(gòu)和功能。

簡(jiǎn)述磷酸戊糖途徑及其生物學(xué)意義。

磷酸戊糖途徑，也被稱為糖酵解過(guò)程，是一種將葡萄糖分解為丙酮酸或乳酸的代謝途徑。主要分為糖分解和氧化磷酸化兩個(gè)階段。

在糖分解階段，葡萄糖經(jīng)過(guò)多個(gè)酶催化反應(yīng)轉(zhuǎn)化為丙酮酸。這個(gè)過(guò)程產(chǎn)生少量的ATP和NADH，并且生成丙酮酸或乳酸來(lái)釋放能量。

在氧化磷酸化階段，丙酮酸進(jìn)一步代謝為乙酰輔酶A，并進(jìn)入三羧酸循環(huán)。在三羧酸循環(huán)中，乙酰輔酶A被氧化為二氧化碳，產(chǎn)生更多的ATP和NADH。

磷酸戊糖途徑在細(xì)胞內(nèi)提供了能量和中間產(chǎn)物。它是細(xì)胞內(nèi)能量代謝的重要途徑，產(chǎn)生的ATP可以用于細(xì)胞的生化反應(yīng)和細(xì)胞的機(jī)械運(yùn)動(dòng)。此外，磷酸戊糖途徑還為細(xì)胞提供了合成生物分子所需的中間產(chǎn)物。

簡(jiǎn)述中心法則的基本內(nèi)容，哪些方面是目前的研究熱點(diǎn)？

中心法則是生物化學(xué)中的一個(gè)重要概念，指出細(xì)胞內(nèi)的代謝和生物化學(xué)反應(yīng)都是圍繞細(xì)胞核酸的遺傳信息進(jìn)行的。具體包括以下內(nèi)容：

遺傳信息從DNA轉(zhuǎn)錄成RNA，然后翻譯成蛋白質(zhì)。

遺傳信息從DNA復(fù)制，確保遺傳物質(zhì)的傳遞和穩(wěn)定性。

遺傳信息通過(guò)DNA重組和基因表達(dá)的調(diào)控來(lái)響應(yīng)內(nèi)外環(huán)境的變化。

目前的研究熱點(diǎn)主要集中在以下方面：

基因調(diào)控：研究如何通過(guò)轉(zhuǎn)錄因子、調(diào)控序列和染色質(zhì)結(jié)構(gòu)來(lái)調(diào)控基因的表達(dá)。

RNA的功能：研究RNA在轉(zhuǎn)錄后修飾、剪接和運(yùn)輸?shù)冗^(guò)程中所起的作用，以及非編碼RNA的功能。

代謝調(diào)控：研究代謝途徑中的調(diào)控機(jī)制，以及細(xì)胞如何在不同環(huán)境條件下調(diào)整代謝通路。

蛋白質(zhì)的功能和結(jié)構(gòu)：研究蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能，以及蛋白質(zhì)的互作和調(diào)控機(jī)制。

這些研究熱點(diǎn)的目的是深入理解生命的基本原理和細(xì)胞的功能調(diào)控機(jī)制，為治療疾病和開(kāi)發(fā)新藥物提供基礎(chǔ)。

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