GPCRs是人類最大的膜蛋白家族，負(fù)責(zé)感覺(jué)調(diào)節(jié)和細(xì)胞反應(yīng)等功能，被認(rèn)為是制藥行業(yè)最有價(jià)值的藥物靶點(diǎn)之一。?Abnova擁有強(qiáng)大、可靠、經(jīng)濟(jì)高效的蛋白質(zhì)脂質(zhì)體重組系統(tǒng)高通量平臺(tái)和針對(duì)GPCR的單克隆抗體（Mab）的生產(chǎn)研究，以克服缺乏合適抗原生產(chǎn)高質(zhì)量單克隆抗體的障礙。

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通過(guò)優(yōu)化脂質(zhì)體存在下的無(wú)細(xì)胞蛋白質(zhì)合成和通過(guò)非連續(xù)蔗糖密度梯度離心的純化過(guò)程，合成了可溶性重組的GPCR蛋白脂質(zhì)體抗原。?Abnova不僅能夠生產(chǎn)適合功能分析的GPCR蛋白脂質(zhì)體，而且還能生成具有敏感性、特異性和廣泛動(dòng)態(tài)范圍的定制單克隆抗體。另外，以定制的GPCR單克隆抗體的高成功率也擴(kuò)大了Abnova的領(lǐng)域，使Abnova也能提供針對(duì)各種膜蛋白的單克隆抗體。

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蛋白脂質(zhì)體表達(dá)的技術(shù)比較：

??傳統(tǒng)的表達(dá)系統(tǒng)?雙電層/透析技術(shù)?雙層膜自動(dòng)化系統(tǒng)

?穩(wěn)定性?低?中?高

?溶解性?低?中?高

?產(chǎn)量?低?低?高

?多樣性?低?中?高

?通透量?低?低?高

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艾美捷Abnova?GPCR單克隆抗體實(shí)例介紹：

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圖1：野生型DRD1的表面等離子體共振（SPR）分析

用SPR測(cè)定DRD1的配體結(jié)合活性，其中多巴胺和組胺被固定在測(cè)量細(xì)胞和參考細(xì)胞上，處于同一水平。野生型DRD1與多巴胺特異性結(jié)合，KD?值為0.7X10-6 M。

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圖2：抗DDD1小鼠血清的親和力分析

采用Scatchard圖結(jié)合ELISA對(duì)36株小鼠單克隆抗體的親和力進(jìn)行了評(píng)估。小鼠單克隆抗體的Kd值范圍為從10-7 M到10-10M，其中一半的小鼠對(duì)DRD1表現(xiàn)出高度敏感性。

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圖3：GPCR小鼠血清的特異性分析

使用ELISA評(píng)估針對(duì)3種不同GPCR的小鼠單克隆抗體，包括GHSR（A類）、PTGER1（A類）和T1R1（C類）。所有抗GPCR單克隆抗體均顯示出與預(yù)期目標(biāo)抗原的特異性相互作用。

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參考文獻(xiàn)：

Takeda, H., et.al. (2015). Scientific Reports. DOI: 10.1038/srep11333

Goren, M.A. and Fox, B.G. (2008). Protein Expression and Purification. DOI:10.1016/j.pep.2008.08.002

Nozawa, A., et. al. (2016). Plant Cell Physiology. DOI:10.1093/pcp/pcm150

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Abnova現(xiàn)有抗體數(shù)量100000多種，蛋白近25000多種，其通過(guò)基因組學(xué)手段生產(chǎn)出的幾萬(wàn)種重組蛋白和抗體，J大的擴(kuò)展了生物試劑應(yīng)用的視野和多樣性。艾美捷科技是Abnova的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。