sulfo-Cy7-PEG-NHS，關(guān)于熒光染料CY7以及熒光的產(chǎn)生原理

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熒光的產(chǎn)生：

熒光，又作“螢光”，是指自然界中的一種光致發(fā)光的冷發(fā)光現(xiàn)象。當某種物質(zhì)經(jīng)某一特定波長的入射光照射后，便會發(fā)射出強度和顏色不同的光，而且一旦停止入射光的照射，發(fā)光現(xiàn)象也隨之立即消失，這種發(fā)光現(xiàn)象被稱為熒光。熒光的產(chǎn)生這個過程是一種光電效應(yīng)，是分子吸收光能后被激發(fā)，從第一激發(fā)單線態(tài)的最低振動能級立即返回至基態(tài)能級時而出射的光。

熒光的產(chǎn)生過程如所示，通常情況下，熒光分子都處于基態(tài)，吸收光能后，熒光分子的電子因被激發(fā)而處于激發(fā)態(tài)，基態(tài)與激發(fā)態(tài)都有單重態(tài)和三重態(tài)兩種類型。其中，S表示單線態(tài)，T表示三線態(tài)，So，S，S……，表示基態(tài)，第一，第二……，激發(fā)單重態(tài)，能量由低到高。在室溫下，熒光染料分子大部分處于基態(tài)的最低振動能級。當受到光的照射或其他能量激發(fā)后，吸收了與它所具有特征的頻率相同的能量后，分子中電子就由原來的基態(tài)能級躍遷至Si激發(fā)態(tài)或者是Sz激發(fā)態(tài)中各個不同的振動能級。而當分子受到激發(fā)從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)后，通?？梢酝ㄟ^兩種不同途徑來釋放激發(fā)態(tài)能量回到基態(tài)。第一種途徑是有著伴隨光子放出的輻射躍遷，這類包括磷光(Phos)和熒光（FI）兩個過程。第二種途徑為非輻射躍遷，它發(fā)生是沒有光子的放出，能量的釋放是通過其它形

式耗散，包括振動弛豫（VT)、系間竄躍(ISC)、內(nèi)轉(zhuǎn)換(IC)等。通常一般情況下，分子被激發(fā)從基態(tài)躍遷至激發(fā)態(tài)后，分子會通過內(nèi)轉(zhuǎn)換、振動弛豫等不同的方式快速地從第一電子激發(fā)態(tài)（St）降落到最低振動能級。再從最低振動能回落到基態(tài)(S）的振動能級時，并輻射出光子釋放出能量，發(fā)設(shè)出熒光。

因此，熒光染料在光照和其他能量激發(fā)后的衰變過程，正是以輻射衰變并釋放出光子的形式回到基態(tài)的過程。由于熒光產(chǎn)生過程是熒光分子被激發(fā)后電子從處于第一激發(fā)態(tài)的最低能級躍遷并回落至基態(tài)(S0)，而與熒光分子中的電子被外界激發(fā)而導(dǎo)致的躍遷能級無關(guān)，所以熒光分子激發(fā)光的波長與熒光分子的發(fā)射光譜的波長并無直接關(guān)系，而是取決于熒光分子基態(tài)中不同能級分布的情況，因此熒光發(fā)射光譜與吸收光譜非常相似，并呈現(xiàn)鏡像對稱。

此外熒光發(fā)射之前其部分能量會通過了內(nèi)轉(zhuǎn)換等形式被消耗，所以其發(fā)射光的能量就會比吸收光要小，因此往往熒光的特征發(fā)射波長比其吸收光的波長要長。熒光分子在被激發(fā)時，電子雖然可以由基態(tài)躍遷至不同的激發(fā)態(tài)，但是熒光發(fā)射時只能是從第一激發(fā)態(tài)的最低振動能級回落至基態(tài)，因此熒光發(fā)射光譜一般也只有一個特定的熒光帶，而與紫外可見光吸收光譜不同，后者可以有幾個吸收帶。

cy7熒光染料：

Cy7 (Cyanine 7) 是一種近紅外花青素?zé)晒馊玖?，磺化Cy7(Sulfo-Cy7)是它的水溶型，常常統(tǒng)稱為Cy7。由于它的熒光波長(em：~770 nm)恰好處于肌體近紅外窗口 I 的區(qū)域(肌體的血液，體液和在此區(qū)域背景熒光弱，并且長波長光子的穿透性較強)，所以Cy7常常應(yīng)用于小動物活體體內(nèi)成像中。

Cy7熒光肉眼不可見，所以在顯微鏡頭下觀察時需要借助CCD相機在成像軟件中顯示。另外近紅外濾片較少見，很多熒光顯微鏡(包括共聚焦顯微鏡)并不配備，但是流式細胞儀(flow cytometry)常常配備有Cy7濾片組，IVIS等小動物成像系統(tǒng)、Odyssey近紅外熒光掃描儀等設(shè)備也配備有。Cy7是常用熒光染料，Cy7可以用來標記核酸，蛋白，抗體，多肽，納米粒等，它是常見的小動物顯影劑之一。

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