基因編輯原理

CRISPR/Cas9系統(tǒng)是一種原核生物的免疫系統(tǒng)，是細菌用來抵抗病毒和外源質(zhì)粒入侵的一種防御機制。目前最成熟且應(yīng)用最廣的是TypeII的CRISPR/Cas9系統(tǒng)，其原理是利用gRNA特異性識別靶序列，并引導(dǎo)Cas9核酸內(nèi)切酶對靶序列的PAM上游進行切割，從而造成靶位點DNA雙鏈斷裂，隨之利用細胞的非同源末端連接（NHEJ）或同源重組（HDR）的方式對切割位點進行修復(fù)，實現(xiàn)DNA水平的敲除、敲入或點突變。

基因敲入方案

gRNA和Cas9復(fù)合物造成靶位點DNA雙鏈斷裂后，細胞以外源攜帶敲入片段的Donor作為模板進行同源重組修復(fù)（HDR），將敲入片段重組到基因組靶位點。

基因敲入載體

雙gRNA載體（含cas9）+Donor 載體

Donor Vector

· 質(zhì)量控制標準

提供載體酶切和測序驗證報告。

· 基因編輯載體應(yīng)用

針對不同基因編輯對象：不同類型細胞系，斑馬魚及大小鼠等。

針對不同基因編輯目的：移碼敲除，片段敲除，精確敲除，定點突變，片段敲入等，提供對應(yīng)的gRNA載體和打靶載體供客戶選擇。

注明 | 文章是源井生物原創(chuàng)，轉(zhuǎn)載請注明。

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