藥物熒光標記:Paclitaxel-FITC 綠色熒光素FITC標記紫杉醇
Paclitaxel-FITC 綠色熒光素標記紫杉醇,其中紫杉醇是一種天然藥物,是一種可以促進微血管聚合和穩(wěn)定已聚微管的藥物,較多用于多種類型的實體瘤癌癥。作為一個具有活性的二萜生物堿類化合物,分子式為C47H51NO14,相對分子質(zhì)量853.91。為白色結(jié)晶性粉末,無臭,無味,難溶于水,易溶于甲醇、乙腈、氯仿、丙酮等有機溶劑。
???大部分文獻中提到的是FTTC熒光標記的原理是利用異硫氰基與氨基形成共價結(jié)合,對于結(jié)構(gòu)中無氨基的物質(zhì)需要先衍生反應(yīng)后再標記,如無氨基的多糖、藥物需要先與酪胺偶聯(lián)產(chǎn)生氨基后再與FTTC反應(yīng).由于紫杉醇的結(jié)構(gòu)中沒有氨基,無法直接標記,大部分科研人員使用谷氨酸作為linker,先合成谷氨酸–紫杉醇復(fù)合物,再與FTTC反應(yīng),最終得到紫杉醇–谷氨酸-FTTC復(fù)合物
異硫氰酸酯能與蛋白質(zhì)或抗體的伯胺基發(fā)生反應(yīng),帶有NH2基團的小分子藥物均可用FITC進行熒光標記。異硫氰酸熒光素FITC常作為熒光探針應(yīng)用于制備分子生物學(xué)或糖類聚合物的結(jié)合物分子,例如葡聚糖、殼聚糖、活性基團等。
FITC的碳酰胺鍵可與抗體蛋白上的賴氨酸氨基結(jié)合,形成FITC-蛋白質(zhì)結(jié)合物,即熒光抗體或熒光結(jié)合物??贵w分子最多可標記15~20個FITC分子。標記的抗體仍能保持與相應(yīng)抗原結(jié)合的能力,在熒光源紫外線或藍紫光的刺激下產(chǎn)生黃綠色熒光,通過熒光顯微鏡觀察或使用流細胞儀進行分析,從而定性、定位或定量抗原。

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