為華生物分享FITC熒光的顏色,fitc激發(fā)波長和發(fā)射波長,FITC熒光標(biāo)記的運(yùn)用
異硫氰酸熒光素FITC呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光。fitc的激發(fā)波長是460nm~550nm,發(fā)射光波長為520nm~530nm,F(xiàn)ITC純品為黃色或橙黃色結(jié)晶粉末,易溶于水和酒精溶劑。具有高吸收率、優(yōu)良的熒光量子產(chǎn)率和良好的水溶性等特點(diǎn)。FITC在冷暗干燥處可保存多年,是應(yīng)用最廣泛的熒光素,有吸濕性。
異硫氰酸熒光素(FITC)具有永久性標(biāo)記生物分子的獨(dú)特檢測性能,可用于檢測或跟蹤共軛物與其他生物分子的相互作用。

FITC的異硫氰酸酯能與蛋白質(zhì)或抗體的伯胺基發(fā)生反應(yīng),帶有NH2基團(tuán)的小分子藥物均可用FITC進(jìn)行熒光標(biāo)記。
異硫氰酸熒光素FITC常作為熒光探針應(yīng)用于制備分子生物學(xué)或糖類聚合物的結(jié)合物分子,例如葡聚糖、殼聚糖、活性基團(tuán)等。FITC常用作蛋白質(zhì)或多糖的不同底物的標(biāo)記試劑,以及標(biāo)記抗體(IgG)以及其它免疫應(yīng)用。其異硫氰酸基團(tuán)可與蛋白的氨基末端或者伯胺反應(yīng)從而實(shí)現(xiàn)包括抗體,凝集素在內(nèi)的蛋白標(biāo)記。除了用作蛋白質(zhì)標(biāo)記物,還可用作蛋白質(zhì)熒光示蹤劑,標(biāo)記抗體用以快速鑒定病原體,以及用于蛋白質(zhì)和多肽(HPLC)的微量測序。
FITC的碳酰胺鍵可與抗體蛋白上的賴氨酸氨基結(jié)合,形成FITC-蛋白質(zhì)結(jié)合物,即熒光抗體或熒光結(jié)合物。抗體分子最多可標(biāo)記15~20個FITC分子。標(biāo)記的抗體仍能保持與相應(yīng)抗原結(jié)合的能力,在熒光源紫外線或藍(lán)紫光的刺激下產(chǎn)生黃綠色熒光,通過熒光顯微鏡觀察或使用流細(xì)胞儀進(jìn)行分析,從而定性、定位或定量抗原。
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