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皮質(zhì)醇快速檢測Elisa試劑盒分析原理

2022-05-06 15:46 作者:艾美捷  | 我要投稿

皮質(zhì)醇(cortisol)是從腎上腺皮質(zhì)中提取出的是對糖類代謝具有最強作用的腎上腺皮質(zhì)激素,即屬于糖皮質(zhì)激素的一種.是通過腎上腺皮質(zhì)線粒體中的11β-羥化酶的作用,由11-脫氧皮質(zhì)醇生成.皮質(zhì)醇也可通過11-β-羥類固醇脫氫酶(11-β-hydroxysteroid dehydrogena-se)的作用變成皮質(zhì)素.鼠類無皮質(zhì)醇.

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艾美捷?皮質(zhì)醇快速檢測Elisa試劑盒,是基于免疫競爭的實驗,經(jīng)由乙酰膽堿酯酶示蹤的皮質(zhì)醇與自由皮質(zhì)醇相互競爭皮質(zhì)醇單克隆抗體結(jié)合位點的原理來檢測樣本中的皮質(zhì)醇.

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艾美捷?皮質(zhì)醇快速檢測Elisa試劑盒特點:

該試劑盒屬于競爭免疫試驗用于定量尿液,血液 和其他生物流體樣本的皮質(zhì)醇.該實驗僅需2個小時的孵育和一個小時的顯色時間就可以完成實驗,靈敏度為400ng/ml.最低檢測為110ng/ml.穩(wěn)定期為一年,保存在-20度.

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艾美捷?皮質(zhì)醇快速檢測Elisa試劑盒分析原理:

基于游離皮質(zhì)醇和皮質(zhì)醇-乙酰膽堿酯酶(AChE)結(jié)合物(皮質(zhì)醇表達(dá)AChE示蹤劑)之間的競爭,以獲得有限數(shù)量的皮質(zhì)醇單克隆抗體結(jié)合位點。由于當(dāng)游離皮質(zhì)醇的濃度變化時,皮質(zhì)醇表達(dá)的乙酰膽堿酯酶示蹤劑的濃度保持不變,因此能夠與皮質(zhì)醇單克隆抗體結(jié)合的皮質(zhì)醇表達(dá)的乙酰膽堿酯酶示蹤劑的量將與井中游離皮質(zhì)醇的濃度成反比。這種抗體-皮質(zhì)醇復(fù)合物與先前附著在井上的山羊抗鼠IgG結(jié)合。清洗培養(yǎng)皿以去除任何未結(jié)合的試劑,并將Ellman試劑(其中含有用于乙酰膽堿酯酶的底物)添加到培養(yǎng)皿中。這種酶促反應(yīng)的產(chǎn)物具有明顯的黃色,并在412nm處強烈吸收。通過分光光度法測定的這種顏色的強度與結(jié)合到孔中的皮質(zhì)醇表達(dá)乙酰膽堿酯酶示蹤劑的量成正比,這與培養(yǎng)期間孔中存在的游離皮質(zhì)醇的量成反比,該過程的示意圖如下圖1所示。


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