高尿酸血癥腎病動物模型【疾病動物模型代做】

【造模機(jī)制】酵母(即核糖核酸)可致體內(nèi)嘌呤代謝紊亂,黃嘌呤氧化酶活性增加,加速了尿酸的生成,血尿酸升高,造成腎小球的損害,腎功能受損。腺嘌呤在黃嘌呤氧化酶作用下轉(zhuǎn)變?yōu)闃O難溶于水的 2,8—二羥基腺嘌呤,沉積于腎小管,引起腎小管阻塞,進(jìn)而導(dǎo)致血清尿酸、肌酐、尿素氨顯著上升。酵母是原發(fā)性致病因素,腺嘌呤是繼發(fā)性致病因素,兩者相加造模效果更好。

【造模方法】

1.動物和嘌呤飼料選用清潔級 SD雄性大鼠,體重(200土20)g,分籠飼養(yǎng),讓其適應(yīng)環(huán)境1 周,自由飲水進(jìn)食。然后將動物隨機(jī)分為對照組和模型組,其中對照組 40 只,模型組80 只。造模用高酵母,嘌呤飼料制備:將酵母干粉、腺嘌呤均勻拌入粉碎的大鼠顆粒飼料中,重新壓粒成型。酵母干粉、腺嘌呤在飼料中的含量分別為 10％和 0.1％。酵母干粉，UNIPATH 公司產(chǎn)品:腺嘌呤,Merck 公司產(chǎn)品。

2.模型制備模型組給予高嘌呤飼料,控制酵母、腺嘌呤的進(jìn)食量分別為 10g/kg、100mg/kg,對照組則給予普通顆粒飼料,兩組動物自由飲水。

3.樣本采集和指標(biāo)測定在給予高嘌呤飼料后的第 7 天、第 12 天、第 19 天,對照組及模型組各取 10 只大鼠,斷頭采血,分離血清,檢測肌酐、尿素氮及尿酸含量;打開大鼠腹腔,取左腎,肉眼觀察其變化,稱重后用 10％甲醛溶液固定,以觀察腎組織形態(tài)學(xué)改變。19天后,模型組剩余大鼠停用高嘌呤飼料,改用普通飼料喂養(yǎng),以觀察其自然恢復(fù)情況。在停用高嘌呤飼料后第 7天、第 15 天、第 24 天,第 38 天,第 52 天時(shí),對照組及模型組各處死 10 只大鼠,做前述生化與病理觀察。

【模型特點(diǎn)】

1.病變典型,變化明顯用高酵母、腺嘌呤飼料喂養(yǎng) 19 天,大鼠血清中尿酸、肌酐、尿素氮明顯升高(P<0.01),腎臟出現(xiàn)與臨床痛風(fēng)腎病相類似的病理改變。光鏡下可見腎小管細(xì)胞腫脹,腎小管間質(zhì)部位可見較多尿酸鹽結(jié)晶沉積,間質(zhì)有灶性淋巴單核細(xì)胞反應(yīng),個(gè)別區(qū)域有灶性纖維化。

2.周期較長,有自然恢復(fù)趨勢停用酵母,腺嘌呤飼料后,大鼠有自然恢復(fù)趨勢,但周期較長(>52 天)。停用高酵母、腺嘌呤飼料后,動物血清中尿酸、肌酐、尿素氮水平繼續(xù)上升,在停用高嘌呤飼料 15 天時(shí)達(dá)到高峰,24 天時(shí) 3 項(xiàng)指標(biāo)開始回落,同時(shí)觀察到的腎臟病理改變也有所減輕,兩者存在一致性。到 52 天時(shí),模型組大鼠尿酸、肌酐、尿素氮已有較大幅度下降,但與對照組比較仍然較高,提示腎功能要完全恢復(fù)可能還需要一段時(shí)間。因此,在造模后 2 個(gè)月內(nèi),可用該模型進(jìn)行藥物降血尿酸、改善腎功能的療效觀察。

【應(yīng)用范圍】研究高尿酸血癥腎病的發(fā)病機(jī)制和治療方法。特別適合痛風(fēng)腎病的實(shí)驗(yàn)研究和痛風(fēng)腎病的臨床和新藥開發(fā)研究。

【注意事項(xiàng)】

1.酵母 10％與腺嘌呤 0.1%的比例需合用同時(shí)飼喂大鼠 17 天模型成功率 100％。單獨(dú)用酵母粉造模成功率低(約 30％),很不穩(wěn)定,且動物腎臟病理改變也不典型。

2.腺嘌呤的用量控制在 100mg/kg 采用此劑量與酵母 10g/kg 合用效果好,如用300mg/kg 劑量給大鼠灌胃給藥造模,發(fā)現(xiàn)腎臟損害十分嚴(yán)重,腎組織結(jié)構(gòu)完全破壞,根本無逆轉(zhuǎn)的可能,無法觀察藥物療效。

【模型評估】用酵母、腺嘌呤飼料喂養(yǎng)大鼠,可造成較為理想的高尿酸血癥腎病動物模型,具有一定的創(chuàng)新性,為痛風(fēng)腎病的研究提供了更加合適的實(shí)驗(yàn)條件,有利于痛風(fēng)腎病的臨床和新藥開發(fā)研究。腹腔注射藥物法高尿酸血癥維持時(shí)間較短,不能形成穩(wěn)定持久的高尿酸血癥,可作為觀察藥物預(yù)防的模型,但不利于觀察藥物對高尿酸血癥的治療作用,并且與臨床高尿酸血癥在病因上有很大差異,也不能進(jìn)一步探討高尿酸血癥的發(fā)病機(jī)制。

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