在家也可做:蛋白質(zhì)的雙縮脲反應
蛋白質(zhì)的雙縮脲反應(實驗原理簡單、比較容易操作。)是一個反應原理較為簡單,較為容易進行的實驗。這里介紹一下這個反應的原理,實驗過程十分安全,大家有實驗條件的可以自行在家中嘗試。
首先,當尿素加熱到180℃時,2分子尿素縮合,放出1分子氨,形成雙縮脲。反應方程如圖所示:

雙縮脲中含有-CO-NH-,在堿性條件下可以與Cu2+螯合形成螯合物,該螯合物為紫紅色。其結(jié)構(gòu)如圖所示:

看到這里,大家應該能意識到該實驗檢測蛋白質(zhì)的依據(jù)是什么了。因為蛋白質(zhì)是由多個氨基酸以肽鍵鏈接而成的,所以二肽以上的多肽分子中含有多個與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的結(jié)構(gòu)。固蛋白質(zhì)或二肽以上的多肽也可以在堿性條件下與Cu2+反應生成紫紅色物質(zhì),且顏色深淺與蛋白質(zhì)含量成正相關(guān)。但是這同時說明,具有相似結(jié)構(gòu)的物質(zhì)都會影響到實驗的結(jié)果,如含有-CS-NH2、-CH2-NH2、-CRH-NH2等基團的物質(zhì)或含有過量銨鹽的物質(zhì)都會對此反應產(chǎn)生干擾。
從上述實驗原理我們可以看出,氨基酸并不能進行此反應,所以該反應也可以用來檢測蛋白質(zhì)的水解程度。

詳細的實驗步驟如下:
① 取1支試管,加入少許尿素,試管口放一片濕潤的石蕊試紙,加熱至試紙變?yōu)樗{色,且試管內(nèi)物質(zhì)蒸干后停止加熱。冷卻后用吸量管加入10%的NaOH試劑1ml搖勻,再加入2~4滴1%的CuSO4,搖勻觀察溶液顏色變化。
② 取1支試管,加入稀釋后的雞蛋清。用吸量管加入10%的NaOH試劑1ml搖勻,再加入2~4滴1%的CuSO4,搖勻觀察溶液顏色變化。(需要準備:藥匙、吸量管、洗耳球、試管夾、試管架、尿素、NaOH、CuSO4)
PS:自己在家中進行實驗的話,可以用雞蛋清的稀釋液進行蛋白質(zhì)的檢測。在實驗過程中需要注意的是,配制雙縮脲試劑時,應避免CuSO4過量生成藍色的Cu(OH)2,其顏色會對結(jié)果產(chǎn)生干擾。有條件的可以嘗試用氨基酸和雙縮脲進行反應。

? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?作者:神州
? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?審核:未名
? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ??APC編輯部科普組
? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文章來自APC編輯部科普組
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