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Enzo丨Enzo 鏈霉親和素阻滯劑/稀釋劑方案

2022-11-03 14:46 作者:艾美捷  | 我要投稿

Enzo?鏈霉親和素阻滯劑/稀釋劑:即用封閉緩沖液和稀釋劑,用于SAVIEW?PLUS檢測(cè)試劑。

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艾美捷Enzo?鏈霉親和素阻斷劑/稀釋劑可用于防止IHC和ISH的生物素綴合檢測(cè)系統(tǒng)中的非特異性結(jié)合。它也可用作生物素化抗體的稀釋劑。該試劑用于福爾馬林固定石蠟包埋組織切片和冷凍切片的定性免疫組織化學(xué)和原位雜交。阻斷劑/稀釋劑也可用于血液涂片、細(xì)胞測(cè)量?jī)x和細(xì)胞制劑。

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艾美捷Enzo?鏈霉親和素阻滯劑/稀釋劑化學(xué)性質(zhì):

應(yīng)用:IHC

原位雜交

發(fā)貨:藍(lán)冰未冷凍

長(zhǎng)期儲(chǔ)存:+4°C

技術(shù)信息說明:鏈霉親和素阻斷劑/稀釋劑是一種獨(dú)特的阻斷溶液,用于防止非特異性背景染色。除免疫組織化學(xué)外,鏈霉親和素阻斷劑/稀釋劑也可用于ISH。

鏈霉親和素阻滯劑/稀釋劑也可用作SAVIEW?PLUS HRP試劑(ENZ-ACC102)和SAVIEW?PLUS AP試劑(ENZ-ACC111)的稀釋劑。它也可以作為生物素化抗體的稀釋劑。

艾美捷Enzo?鏈霉親和素阻滯劑/稀釋劑方案:

將福爾馬林固定石蠟包埋(FFPE)組織切片置于載玻片夾中。

在55-60°C的干燥爐中加熱20分鐘。

用二甲苯(或二甲苯替代物)脫蠟10分鐘。

然后用100%乙醇浸泡6分鐘。

在每個(gè)步驟中將載玻片再水化1分鐘:90%、70%、50%乙醇,最后在蒸餾水或去離子水中。

用抗原回收試劑(檸檬酸鹽,pH6)或抗原回收劑(Tris-EDTA,pH9)在99°C下回收抗原20分鐘。

用PBST洗滌5分鐘。

擦拭載玻片切片周圍的多余液體,并用PAP筆環(huán)繞組織切片。

干燥幻燈片10秒

將組織培養(yǎng)至過氧化物酶塊5分鐘。

用PBST清洗2分鐘。

研究人員需要優(yōu)化生物素化一級(jí)抗體的濃度和培養(yǎng)時(shí)間(建議時(shí)間:20至30分鐘)

用PBST清洗5分鐘。

如果使用未標(biāo)記的小鼠一級(jí)抗體,切片必須與生物素化的抗小鼠抗體孵育,如果使用未標(biāo)簽的兔一級(jí)抗體則使用生物素化兔抗小鼠接頭(在阻斷劑/稀釋劑中稀釋)15分鐘。

用PBST清洗5分鐘。

用足夠的Streptavidin阻斷劑/稀釋劑孵育切片,覆蓋組織切片10分鐘,以阻斷SAVIEW?PLUS HRP的非特異性結(jié)合(用于色原檢測(cè))

使用SAVIEW?PLUS檢測(cè)試劑和HIGHDEF?顯色劑可視化抗原。

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艾美捷Enzo?鏈霉親和素阻滯劑/稀釋劑ISH(原位雜交)推薦方案:

將福爾馬林固定石蠟包埋(FFPE)組織切片置于載玻片夾中。

在55-60°C的干燥爐中加熱20分鐘。

用二甲苯(或二甲苯替代物)脫蠟10分鐘。

然后用100%乙醇浸泡6分鐘。

在每個(gè)步驟中將載玻片再水化1分鐘:90%、70%、50%乙醇,最后在蒸餾水或去離子水中。

擦拭載玻片切片周圍的多余液體,并用PAP筆環(huán)繞組織切片。

干燥幻燈片10秒。

將組織暴露于過氧化物酶阻斷劑5分鐘。

用洗滌緩沖液洗滌2分鐘。

將載玻片放在37°C的熱板上。

添加最佳濃度的蛋白酶K(建議:25-80μg/mL,隨組織類型和厚度變化),并在37°C下孵育10分鐘。

用PBST清洗5分鐘。

研究人員需要優(yōu)化生物素化RNA或DNA探針的濃度和孵育時(shí)間(建議:在95°C下變性10分鐘,雜交至少120分鐘,DNA探針通常在37°C下,RNA探針為42°C)。

將變性探針添加到切片中。

帶蓋玻片的蓋子

雜交后用40%甲酰胺+6X SSPE緩沖液嚴(yán)格清洗10分鐘。

用PBST清洗5分鐘。

用足夠的Streptavidin阻斷劑/稀釋劑孵育切片,覆蓋組織切片10分鐘,以阻斷SAVIEW?PLUS檢測(cè)試劑的非特異性結(jié)合。

使用SAVIEW?PLUS檢測(cè)試劑和HIGHDEF?顯色劑可視化抗原。

監(jiān)管狀態(tài):RUO-僅供研究使用

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Enzo Life Sciences專注于標(biāo)記和檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域,涵蓋蛋白質(zhì)、抗體、肽、小分子、標(biāo)記探針染料和試劑盒組合等生物試劑研究,為生命科學(xué)研究/生物制藥提供用于目標(biāo)識(shí)別/驗(yàn)證、高含量分析、基因表達(dá)分析、核酸檢測(cè)、蛋白質(zhì)生物化學(xué)檢測(cè)以及細(xì)胞分析的諸多工具。艾美捷科技是Enzo?的中國(guó)代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。


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