第一章 蛋白質(zhì)化學

I 主要內(nèi)容

一、蛋白質(zhì)的生物學意義

? ? 蛋白質(zhì)是生物體內(nèi)最為重要的有機化學物質(zhì)之一，它幾乎參與了生物體所有的生命活動，如生物體的構(gòu)成、機體的運動、化學催化、機體的免疫保護、生物遺傳信息的傳遞與表達等等，可以說蛋白質(zhì)是一切生命活動的重要支柱，沒有蛋白質(zhì)就沒有生命現(xiàn)象的存在，因此，蛋白質(zhì)化學是生物化學中一個重要的研究方面。

二、 蛋白質(zhì)的元素組成

? ? 蛋白質(zhì)是由C、H、O、N、S等幾種元素構(gòu)成，其中C 50-55%、H 6-8%、O 20-30%、 N 15-17%、S 0-4%，且含量基本相同，因此通過測定蛋白質(zhì)樣品中元素含量就可以推測出樣品中蛋白質(zhì)的含量。

三、 蛋白質(zhì)的氨基酸組成

? ? （一）氨基酸的結(jié)構(gòu)及特點

? ? 一般的蛋白質(zhì)都是由20種氨基酸構(gòu)成，這些氨基酸都是在蛋白質(zhì)的合成過程中直接加進去的，并有專門的遺傳密碼與其對應(yīng)，這些構(gòu)成蛋白質(zhì)的基本氨基酸稱為天然氨基酸(通用氨基酸)。天然氨基酸具有如下特點：

? ? 1. 20種天然氨基酸均有專門的遺傳密碼與其對應(yīng)，它們在蛋白質(zhì)的合成中是直接加上去的。

? ? 2. 除甘氨酸外，其它氨基酸至少含有一個手性碳原子。

? ? 3. 除脯氨酸外，其它氨基酸均為-氨基酸。?

? ? 4.? 氨基酸雖有D、L–型之分，但存在于天然蛋白質(zhì)中的氨基酸均為L-型氨基酸。?

? ?（二）天然氨基酸的分類?

? ? 1.根據(jù)氨基酸分子中氨基和羧基的相對數(shù)量進行分類

? ? 2.根據(jù)氨基酸分子結(jié)構(gòu)分類

? ? 3.根據(jù)氨基酸側(cè)鏈基團極性分類

? ? 氨基酸根據(jù)其側(cè)鏈基團在近中性的pH條件下是否帶電荷以及帶電荷的種類分成四類：非極性氨基酸、極性不帶電荷氨基酸、極性帶正電荷氨基酸、極性帶負電荷氨基酸。

? ?（三）稀有蛋白質(zhì)氨基酸

? ? 這部分主要是指雖然在蛋白質(zhì)中有所存在，含量卻較少的一類氨基酸。蛋白質(zhì)中的稀有氨基酸是在蛋白質(zhì)合成后的加工過程中通過化學的方法在天然氨基酸的基礎(chǔ)上增加某些基團而形成的。

? ?（四）非蛋白質(zhì)氨基酸

? ? 非蛋白質(zhì)氨基酸是細胞中不參與天然蛋白質(zhì)合成的一類氨基酸。

? ?（五）氨基酸的重要理化性質(zhì)

? ? 1. 一般理化性質(zhì)

? ? 2. 氨基酸的酸堿性質(zhì)與等電點

? ? 3. 氨基酸的主要化學性質(zhì)

? ?（1）茚三酮反應(yīng)

? ?（2）桑格反應(yīng)（Sanger reaction）

? ?（3）埃德曼反應(yīng)（Edman reaction ）

? ? 4. 氨基酸的光學性質(zhì)

? ? 由于氨基酸分子中除甘氨酸外都有不對稱碳原子的存在，因此，天然氨基酸中除甘氨酸外均有旋光現(xiàn)象的存在。20種天然氨基酸在可見光范圍內(nèi)都沒有明顯的光吸收現(xiàn)象，但在紫外區(qū)有三種氨基酸確有明顯的光吸收作用。

五、蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)

? ? 為研究方便，人們將蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分成不同的層次，1952年Linderstron-Lang 將蛋白質(zhì)分成三個結(jié)構(gòu)層次，1953年Bernal又提出四級結(jié)構(gòu)，此后人們又在結(jié)構(gòu)與功能的研究中提出了超二級結(jié)構(gòu)及結(jié)構(gòu)域概念，因此，目前，目前人們認為蛋白質(zhì)可以分成六個結(jié)構(gòu)層次進行研究。

? ?（一）蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)

? ? 根據(jù)1969年國際理論化學和應(yīng)用化學協(xié)會（IUPAC）的規(guī)定蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)（Primary structure）是指蛋白質(zhì)分子中氨基酸的排列順序。? ? ?

? ? 氨基酸與氨基酸之間通過酰胺鍵相連構(gòu)成的化合物稱為肽或蛋白質(zhì)，通常構(gòu)成肽鏈的氨基酸數(shù)目在10個以下的稱為寡肽，10以上者稱為多肽或蛋白質(zhì)。

? ? 蛋白質(zhì)與多肽鏈的區(qū)別：

? ?（1）氨基酸組成數(shù)量。一般都在100個以上，分子量在10，000以上。

? ?（2）具有特定的空間結(jié)構(gòu)。

? ?（3）結(jié)構(gòu)與功能之間的對應(yīng)關(guān)系。

? （二）蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)

? ? 蛋白質(zhì)多肽鏈主鏈本身、局部的、有規(guī)則的空間排布方式——蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)。蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)主要包括-螺旋結(jié)構(gòu)、-折疊、-轉(zhuǎn)角、無規(guī)則卷曲（自由回轉(zhuǎn)）

? ? 1、蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的主要類型

? ? -螺旋結(jié)構(gòu)是美國麻省理工學院的Pauling、 Corey 在 1953 年對動物毛發(fā)結(jié)構(gòu)的X- 光衍射分析中發(fā)現(xiàn)的一種蛋白結(jié)構(gòu)， - 螺旋結(jié)構(gòu)有左旋和右旋兩種。 ①多肽鏈主鏈圍繞其中心軸盤繞而成的一種螺旋管狀結(jié)構(gòu)，螺旋結(jié)構(gòu)每螺旋上升一圈需要3.6個氨基酸殘基，垂直上升0.54nm；②螺旋結(jié)構(gòu)中每個氨基酸殘基上的氨基氫與其后第四個氨基酸殘基的羰基氧形成氫鍵，其氫鍵的走向與螺旋軸平行。

? ? -折疊結(jié)構(gòu)也是Pauling和Corey在蠶絲絲心蛋白中發(fā)現(xiàn)的一種蛋白結(jié)構(gòu)。 ① -折疊結(jié)構(gòu)是由幾條多肽鏈或一條多肽鏈的幾個片段平行折疊形成的一種片層結(jié)構(gòu)；②相鄰的主鏈之間借助于鏈內(nèi)或鏈間氫鏈相連形成片層，主鏈中相鄰氨基酸殘基的側(cè)鏈基團上下交替排列在片層的上方或下方；③-折疊結(jié)構(gòu)分平行或反平行兩種結(jié)構(gòu)。?

? ? - 轉(zhuǎn)角是指多肽鏈走向發(fā)生180°回折，其轉(zhuǎn)角處的結(jié)構(gòu)。

? ? 無規(guī)則卷曲（自由回轉(zhuǎn)）

? ? 2、超二級結(jié)構(gòu)與結(jié)構(gòu)域

? ?（1）超二級結(jié)構(gòu)（Supersecodary? structure）是指由兩個或多個二級結(jié)構(gòu)單元被長度不等，走向不規(guī)則的連接肽彼此相連，形成的有規(guī)律的、在空間上可以辨認的二級結(jié)構(gòu)組合體稱為超二級結(jié)構(gòu)。超二級結(jié)構(gòu)根據(jù)其復雜程度分為簡單超二級結(jié)構(gòu)和復雜超二級結(jié)構(gòu)兩種類型。

由兩個或少數(shù)構(gòu)象單元經(jīng)連接肽相連形成的超二級結(jié)構(gòu)稱簡單超二級結(jié)構(gòu)，一般包括- corner）、-發(fā)夾 （-hairpin）、 -發(fā)夾（-hairpin）、拱形結(jié)構(gòu)（arch）。

? ? 由多個構(gòu)象單元或由簡單的超二級結(jié)構(gòu)進一步組合形成的有規(guī)律的在空間上可辯識的結(jié)構(gòu)，具體可分為-螺旋超螺旋、 X結(jié)構(gòu)、 -迂回、 -折疊桶四種形式。

（2）結(jié)構(gòu)域（Structural domain）

? ? 也叫轄區(qū)，是指存在于球狀蛋白質(zhì)分子內(nèi)部由相鄰的多個二級結(jié)構(gòu)單元彼此相連形成的球狀亞單位。結(jié)構(gòu)域是獨立的結(jié)構(gòu)單位、功能單位和獨立的結(jié)構(gòu)形成單位。結(jié)構(gòu)域主要包括-結(jié)構(gòu)域、-折疊域、+ 結(jié)構(gòu)域和/ 結(jié)構(gòu)域。

? ? 結(jié)構(gòu)域作為獨立的結(jié)構(gòu)單位，具有內(nèi)在的穩(wěn)定性，結(jié)構(gòu)域之間通過柔性肽段相連。多數(shù)蛋白質(zhì)具有多個結(jié)構(gòu)域，其結(jié)構(gòu)域可能相同，如磷酸丙糖異構(gòu)酶具有兩個相似的結(jié)構(gòu)域，也可能不同，如丙酮酸激酶。

（三）蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)?

在二級結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上，多肽鏈進一步盤繞折疊形成的球狀蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)稱為蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)。換言之是指構(gòu)成球狀蛋白質(zhì)的多肽鏈中所有原子和基團的空間排布。它是由不同的二級結(jié)構(gòu)單元按照一定的方式彼此組合而成的一種蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)。?

? ?（四）蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu)

? ? 由兩個及其以上具有三級結(jié)構(gòu)的多肽鏈鏈相互聚集形成的蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)稱為蛋白質(zhì)四級結(jié)構(gòu)。四級結(jié)構(gòu)形成的意義：①四級結(jié)構(gòu)賦予蛋白質(zhì)更加復雜的結(jié)構(gòu)，以便執(zhí)行更復雜的功能如在酶類中，除功能簡單的水解酶，其它酶大多數(shù)是寡聚蛋白。②通過亞基間的相互作用，可以對酶或其它功能蛋白的活性進行調(diào)節(jié)。③催化相關(guān)代謝的酶形成多酶復合物，可以提高酶促反應(yīng)的速度。④可以得用大小、種類有限的亞基組合成結(jié)構(gòu)復雜的大分子蛋白質(zhì)。⑤可以降低細胞內(nèi)的滲透壓。⑥節(jié)約編碼的信息量。

? ? (五)維持蛋白質(zhì)空間構(gòu)象的作用力

? ? 在不同蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中起主要作用的穩(wěn)定因素不同，在蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)中起主要穩(wěn)定作用的因素是共價鍵；在蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)中起主要作用的穩(wěn)定因素是氫鍵；在蛋白質(zhì)三、四級結(jié)構(gòu)中起最主要作用的因素是疏水力。

五、蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系

? ?（一）蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系

? ? 蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)是決定蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)及其生物學功能的重要基礎(chǔ)，在細胞內(nèi)特定的環(huán)境條件下，蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)決定蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)通過決定蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的方式間接地決定和影響蛋白質(zhì)的生物學功能。蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)與生物進化的關(guān)系、蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)與分子病的關(guān)系是生物化學中研究較為清楚的兩個例子。

? ?(二)蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系

蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)直接決定和影響蛋白質(zhì)的功能，蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的變化必然導致蛋白質(zhì)生物功能的改變，如核糖核酸酶空間結(jié)構(gòu)變化與功能關(guān)系、血紅蛋白空間結(jié)構(gòu)變化與功能關(guān)系以及調(diào)節(jié)酶結(jié)構(gòu)變化與酶活性變化等。

II 習? 題

一、名詞解釋

? ?１．Ｎ端與Ｃ端:

? ?２．蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu):

? ?３．氨基酸殘基:

? ?４．Ｓn=3.613:

? ?５．肽單位、肽平面:

? ?６．寡聚蛋白:

? ?７．蛋白質(zhì)變性:

8．超二級結(jié)構(gòu)與結(jié)構(gòu)域:

二、是非題? 判斷下列各句話意思的正確與否，正確的在題后括號內(nèi)畫“√”，錯誤 的畫“×”，如果是錯誤的，請說明其理由

1.組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸，它們至少含有一個不對稱碳原子。

2.氨基酸立體異構(gòu)體雖有Ｄ-型和Ｌ-型之分，但在蛋白質(zhì)中所發(fā)現(xiàn)的氨基酸均為Ｌ－型。

3.等摩爾的Ｄ-Ａla和Ｌ-Ａla混合液，不能引起偏振光平面的偏轉(zhuǎn)。

4.從蛋白質(zhì)酸水解液中可以得到所有20種天然氨基酸。

5.氨基酸在水溶液或固體狀態(tài)是以兩性離子形式存在的。

6.內(nèi)部氫鍵的形成的是驅(qū)使蛋白質(zhì)折疊的主要力量。

7.在外界環(huán)境一定的條件下，蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)主要是由它的一級結(jié)構(gòu)所決定的。

8.原來溶于水的蛋白質(zhì)，經(jīng)加熱后從水中析出主要是因為蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)破壞，原來位于分子內(nèi)部的疏水氨基酸外露的結(jié)果。

9.天然蛋白質(zhì)中多肽鏈的螺旋構(gòu)象都是右旋的。

10.SDS－聚丙烯酰胺電泳測定白質(zhì)分子量的方法是根椐蛋白質(zhì)所帶電荷的不同。

11.某一蛋白質(zhì)樣品，當其酸性氨基酸數(shù)目等于堿性氨基酸數(shù)目時，此蛋白質(zhì)樣品的等電點pH是７。

12.在膠原蛋白質(zhì)中，由于組分中主要是甘氨酸、脯氨酸和羥脯氨酸，它們在參于肽鍵形成后，不再含有可供形成氫鍵的氫原子，故不能形成α－螺旋，膠原蛋白中多肽鏈構(gòu)象主要是β－折疊結(jié)構(gòu)。

13.血紅蛋白和細胞色素Ｃ都是含鐵卟啉的色蛋白，兩者的功能雖然不同，但它們的作用機制相同，都是通過鐵離子化合價的變化來實現(xiàn)的。

14．用層析技術(shù)分離氨基酸是根據(jù)各種氨基酸的極性不同。

15．用凝膠電泳技術(shù)分離蛋白質(zhì)是根據(jù)各種蛋白質(zhì)的分子大小和電荷不同。

16．從細胞內(nèi)提取出某種物質(zhì)，用羧肽酶A不能使其水解，與茚三酮反應(yīng)呈陰性，因此可以肯定地判斷它是非肽物質(zhì)。

17．蛋白質(zhì)構(gòu)象的變化伴隨自由能的變化，最穩(wěn)定的構(gòu)象自由能最低。

18．剛性平面結(jié)構(gòu)的肽單位是蛋白質(zhì)主鏈骨架的重復單位。

19．蛋白質(zhì)分子的亞基就是蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)域。

20．脯氨酸不能維持α—螺旋，凡有脯氨酸的部位肽鏈都發(fā)生彎轉(zhuǎn)。

21．有機溶劑引起蛋白質(zhì)變性的主要原因之一是降低介質(zhì)的介電常數(shù)。

22．血紅蛋白比肌紅蛋白攜氧能力高，這是因為它有多個亞基。

23．蛋白質(zhì)和酶原的激活過程說明蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)變化與蛋白質(zhì)的功能密切相關(guān)。

24．肌紅蛋白和血紅蛋白的α和β鏈有共同的三級結(jié)構(gòu)。?

25．利用鹽濃度的不同可以提高或降低蛋白質(zhì)的溶解度。

三、填空題?

? ? １．組成蛋白質(zhì)的氨基酸有20種，其中，必須氨基酸有? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?種，即? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?。

２．通用氨基酸除? ? ? ? ? ? ? 外都有旋光性；? ? ? ? ? ? ?和? ? ? ? ? ? 分子量比較小而且不合硫，在折疊的多肽鏈中能形成氫鍵；? ? ? ? ? ? ? 在穩(wěn)定許多蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中起重要作用，因為它可參與形成鏈內(nèi)和鏈間的共價鍵。? ? ? ? ? ? ?具有非極性側(cè)鏈且是生成酪氨酸的前體。

３．氨基酸結(jié)構(gòu)上的共同點是：(1)? ? ? ? ? ? ? ? ,(2)? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ，(3)? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 。

４．在蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)測定中，常用來做Ｎ－端分析的方法有? ? ? ? ? ? ? ?,? ? ? ? ? ? ? ? 和? ? ? ? ? ? ? ? 三種。

? ? ５．有一蛋白質(zhì)經(jīng)末端分析知道有兩個Ｎ－末端，ＳＤＳ電泳均顯示兩條帶，說明該蛋白質(zhì)含有? ? ? ? ?亞基，另一種蛋白質(zhì)分子用羥基乙醇處理，在酸性堿性條件下均顯示一條帶，說明該蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)特點是? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?。

６．蛋白質(zhì)的主鏈構(gòu)象單元有? ? ? ? ?，? ? ? ? ? ，? ? ? ? ? ，? ? ? ? ? ? 四種。

７．鹽濃度低時，鹽的加入使蛋白質(zhì)的溶解度? ? ? ? ? ? ? ，稱為? ? ? ? ? ? ?現(xiàn)象；鹽濃度高時，鹽的加入使蛋白質(zhì)的溶解度? ? ? ? ? ? ? ?，稱為? ? ? ? ? ? ? ?現(xiàn)象。

８．在典型的α－螺旋結(jié)構(gòu)中，一個氨基酸的氨基氫與其前面第? ? ? ? ? ? 個氨基酸殘基的羰基氧形成氫鍵，在此封閉體系內(nèi)，共含有? ? ? ? ? ?個主鏈原子。

9．在正常生理條件下(pH＝7)，蛋白質(zhì)分子中? ? ? ? ? ?和? ? ? ? ? ? 的側(cè)鏈部分帶正電荷。

10．2，4—二硝基氟苯(DNFB或FDNB)與氨基酸作用可生成黃色的? ? ? ? ? ? ? ，簡稱? ? ? ? ? ? ? ? ?。

11．球蛋白分子中? ? ? ? ? ? ? ? 基團排列在外部，? ? ? ? ? ? ?基團排列在分子的內(nèi)部。

12．1953年英國科學家? ? ? ? ? ? ? 等人首次完成牛胰島素? ? ? ? ? ? ? 的測定，證明牛胰島素是由? ? ? ? ? ? 條多肽鏈，共? ? ? ? ? ? ? 個氨基酸組成。

13．生活在西藏高原的人血液中，2，3—二磷酸甘油酸的濃度比一般人? ? ? ? ? 。

14．用紫外光吸收法測定蛋白質(zhì)含量的依據(jù)是所有的蛋白質(zhì)分子中都含有? ? ? ? ? ?、

? ? ? ? ? ? 和? ? ? ? ? ?三種氨基酸。。

15． 1965年中國科學家完成了由51個氨基酸殘基組成的? ? ? ? ? ? ? ? 合成。

16．目前己知的超二級結(jié)構(gòu)有? ? ? ? ? ? 、? ? ? ? ? ? 、? ? ? ? ? ?和? ? ? ? ?四種基本形式。

l7．維持蛋白質(zhì)三級結(jié)構(gòu)的作用力是? ? ? ? ? ?，? ? ? ? ? ? ，? ? ? ? ? ? 和鹽鍵。

18．膠原蛋白的基本組成單位是由? ? ? ? ? ? ? 組成的原膠原蛋白，再經(jīng)多次聚合形? ?

? ? ? ? ? ? ? ? ?。

19．在pH6.0時將G1y，A1a，G1u，Lys，Arg和Ser的混合物進行紙電泳，向陽極移動? ? 快的是? ? ? ? ? ；向陰極移動最快的是? ? ? ? ? 和? ? ? ? ? ?；移動很慢接近原點的是? ? ? ? ? ，? ? ? ? ?和? ? ? ? ? ?。?

20．測定肽段常用的方法是Edman化學降解法，Edman試劑是? ? ? ? ? ? ? ?。

22．去污劑如十二烷基磺酸鈉(SDS)使蛋白質(zhì)變性是由于SDS能破壞? ? ? ? ? ? ? 使疏水基團暴露到介質(zhì)中。

23．研究蛋白質(zhì)構(gòu)象的方法很多，但主要是應(yīng)用? ? ? ? ? ? ? ?。

四、選擇題

１．在生理ＰH條件下，帶正電荷的氨基酸是：

? ? Ａ Ala? ? ? ? ? ? ? ? ? ? Ｂ Try

? ? Ｃ Trp? ? ? ? ? ? ? ? ? ? Ｄ Lys

２．下列哪些氨基酸只含非必須氨基酸：

? ? Ａ 芳香族氨基酸 Ｂ 堿性氨基酸

? ? Ｃ 酸性氨基酸 Ｄ 支鏈氨基酸

３．下列哪些蛋白質(zhì)是不溶于水的？

? ? Ａ 血紅蛋白? ? ? ? ? ? ? ? Ｂ 酶

? ? Ｃ 抗體? ? ? ? ? ? ? ? ? ? Ｄ 膠原蛋白

４．細胞色素氧化酶除含有血色素輔基外，還含有：

? ? Ａ 銅? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? Ｂ 鐵

? ? Ｃ 鎂? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? Ｄ 鋅

５．蛋白質(zhì)在280nm有最大光吸收，主要是因為其中含有：

? ? Ａ Phe? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?Ｂ Tyr

? ? Ｃ His? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?Ｄ Trp

６．pＩ在pH７附近的ＡＡ是：

? ? Ａ Ser? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?Ｂ Glu

? ? Ｃ Asn? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?Ｄ His

７．下列哪種蛋白質(zhì)含有三股螺旋：

? ? Ａ α－角蛋白? ? ? ? ? ? ? Ｂ 血紅蛋白

? ? Ｃ 原膠原蛋白? ? ? ? ? ? ? Ｄ 絲心蛋白

８．維持蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的主要因素是：

? ? Ａ 疏水作用? ? ? ? ? ? ? ? Ｂ 氫鍵

? ? Ｃ 范德華作用力? ? ? ? ? ? Ｄ 鹽鍵

９．茚三酮與脯氨酸反應(yīng)時，在濾紙層析譜上呈現(xiàn)：

? ? Ａ 藍紫色? ? ? ? ? ? ? ? ? Ｂ 紅色

? ? Ｃ 黃色? ? ? ? ? ? ? ? ? ? Ｄ 綠色

10．在效應(yīng)物作用下，蛋白質(zhì)產(chǎn)生的變構(gòu)(或別構(gòu))效應(yīng)是由于蛋白質(zhì)的

? ? A? 一級結(jié)構(gòu)發(fā)生變化 B 構(gòu)型發(fā)生變化

? C? 構(gòu)象發(fā)生變化 D 氨基酸序列發(fā)生變化

11．下列具有協(xié)同效應(yīng)的蛋白質(zhì)是：

? A? 肌紅蛋白 B 血紅蛋白

? C? 絲心蛋白 D 彈性蛋白

12．同源蛋白是指：

? A? 來源相同的各種蛋白質(zhì)? ? ? B? 來源不同的同一種蛋白質(zhì)

? C? 來源相同的同一種蛋白質(zhì)? ? D? 來源不同的各種蛋白質(zhì)

13．如下哪些敘述是正確的：

? ?Ａ 肽鍵中的Ｃ－Ｎ具有部分雙鍵性質(zhì)；

? ?Ｂ 肽單位中的六個原子處在一個平面上；

? ?Ｃ 兩個相鄰近的α－碳呈反式分布；

? ?Ｄ α－Ｃ的二面角在0～180°內(nèi)可以自由旋轉(zhuǎn)。

14．膠原蛋白中含量最多的氨基酸是：

? A? 甘氨酸和丙氨酸 ? ?B? 脯氨酸和羥脯氨酸

C? 谷氨酸和天冬氨酸? ? D? 精氨酸和賴氨酸

15．蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)穩(wěn)定機制中，包括下列哪種氨基酸與賴氨酸殘基的相互作用。

A? G1u? ? B? Arg

C? His? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?D? Asp

五、問答與計算

1．什么是蛋白質(zhì)的一、二、三、四級結(jié)構(gòu)？主要的穩(wěn)定因素各是什么？?

2．什么是蛋白質(zhì)的等電點(pI)?為什么說在等電點時蛋白質(zhì)的溶解度最低?

3．將固體氨基酸溶于pH7的水中所得的氨基酸溶液，有的pH大于7，有的小于7，這種現(xiàn)象說明什么?

4．根據(jù)下列信息推斷含等量Met，Phe，Asp，Ser，Thr的五肽序列：

? (1)用BrCN處理五肽，釋放出肽段和一個游離的高絲氨酸；

? (2)用胰凝乳蛋白酶處理五肽得到兩個碎片，酸性較強的碎片含甲硫氨酸；

(3)用羧肽酶A處理五肽，迅速放出Ser，隨后放出Thr。

5．指出用電泳技術(shù)分離下列物質(zhì)，pH是多少時最合適?

(1)血清清蛋白(pI＝4.9)和血紅蛋白(pI＝6.8)；

(2)肌紅蛋白(pI＝7.0)和胰凝乳蛋白梅(pI＝9.5)；

(3)卵清蛋白(pI＝4.6)、血清清蛋白和肽酶(pI＝5.0)。?

6．10ml溶液內(nèi)含有某化合物5mg，從此溶液中取2ml稀釋至20ml，取此溶液1.5ml置于0.5cm光徑的比色杯中，測得280nm處的O.D值為0.4，設(shè)此化合物的摩爾消光系數(shù)為1×104，Ｍ.Ｗ為500，求此化合物的濃度？

? ? 7．某氨基酸的水溶液pH值為6.0，問此氨基酸的等電點是大于6，等于6，還是小于6？

? ? 8．用畫圖法比較肌紅蛋白和血紅蛋白氧合曲線的差異，并說明為什么? 2，3—二磷酸甘油酸(DPG)與血紅蛋白對氧的親和力有什么影響

9．舉例說明蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系？

10．用你學過的蛋白質(zhì)理化性質(zhì)，設(shè)計一條由毛發(fā)水解制備胱氨酸的流程圖，并說明其原因。