一、實驗目的要求

1．了解糖發(fā)酵的原理和在腸道細菌鑒定中的重要作用。

2．掌握通過糖發(fā)酵鑒別不同微生物的方法。

二、實驗內容與原理

糖發(fā)酵試驗是常用的鑒別微生物的生化反應，在腸道細菌的鑒定上尤為重要。絕大多數細菌都能利用糖類作為碳源和能源，但是它們在分解糖類物質的能力上有很大的差異。有些細菌能分解某種糖產生有機酸(如乳酸、醋酸、丙酸等)和氣體(如氫氣、甲烷、二氧化碳等)；有些細菌只產酸不產氣。例如大腸桿菌和產氣桿菌能分解乳糖和葡萄糖產酸并產氣；傷寒桿菌分解葡萄糖產酸不產氣，不能分解乳糖；普通變形桿菌分解葡萄糖產酸產氣，不能分解乳糖。發(fā)酵培養(yǎng)基含有蛋白胨，指示劑(溴甲酚紫)，倒置的德漢氏小管和不同的糖類。當發(fā)酵產酸時，溴甲酚紫指示劑可由紫色(pH6.8)變?yōu)辄S色(pH5.2)。氣體的產生可由倒置的德漢氏小管中有無氣泡來證明。

三、主要儀器與設備

1．菌種 ?大腸桿菌，產氣桿菌斜面各一支。

2．培養(yǎng)基 ?葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基試管和乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基試管各3支(內裝有倒置的德漢氏小管)。

3．儀器或其他用具 ?試管架，接種環(huán)等。

四、操作方法、實驗步驟

1．用記號筆在各試管外壁上分別標明發(fā)酵培養(yǎng)基名稱和所接種的細菌菌名。

2．取葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基試管2支，分別接入大腸桿菌，產氣桿菌。另取乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基試管2支，同樣分別接入大腸桿菌，產氣桿菌。

在接種后，輕緩搖動試管，使其均勻，防止倒置的小管進入氣泡。

3．將接種過4支試管均置37℃培養(yǎng)24~48 h。

4．觀察各試管顏色變化及德漢氏小管中有無氣泡。

五、實驗數據與處理

六、實驗結果（現象）與分析

請對實驗結果做以分析。

七、討論

假如某種微生物可以有氧代謝葡萄糖，發(fā)酵試驗應該出現什么結果?