北京大學(xué)曾克武老師官網(wǎng)簡介：http://dnm.sps.bjmu.edu.cn/szdw_20180110150803713087/trywhxyjs_20180110150803713087/192684.htm

一、背景

1.天然產(chǎn)物很好：

青蒿素、砒霜、二甲雙胍（修飾山羊豆來源的山羊豆堿）、石杉堿甲（來源于蛇足草）、達(dá)菲（修飾八角茴香來源的莽草酸）

2.如何產(chǎn)生活性

產(chǎn)物活性分子與靶器官靶點結(jié)合發(fā)揮作用（化學(xué)生物學(xué)

）

二、實驗室方法（其實驗室2012年開始）

1.生物素標(biāo)記法。

標(biāo)記天然分子

蘇木酮A抗神經(jīng)炎

從細(xì)胞裂解液中獲取結(jié)合蛋白，結(jié)合高分辨質(zhì)譜鑒定靶標(biāo)蛋白

葫蘆素B抗腫瘤

2.基于環(huán)氧基標(biāo)記策略（類似生物素標(biāo)記）

合歡皂苷J(rèn)13抗腫瘤

老師說是因為他結(jié)構(gòu)復(fù)雜，生物素掛不上去

松果菊苷抗腦缺血

野菊花內(nèi)酯

3.基于蛋白微陣列技術(shù)

前面兩種方法基于組織細(xì)胞裂解液

豐度低的轉(zhuǎn)錄因子，蛋白可以通過此法改善。

野馬追內(nèi)酯

4.基于點擊化學(xué)的細(xì)胞胞內(nèi)靶點鑒定

活性分子結(jié)合某特定標(biāo)簽，在胞內(nèi)和靶標(biāo)結(jié)合，照射UV后能形成穩(wěn)定復(fù)合物。（有一篇類似工作港大孫紅哲教授團隊在nature communication上確定了鉻元素結(jié)合蛋白）

原人參二醇

5.****非標(biāo)記技術(shù)。不對藥物分子修飾

一類技術(shù)，在這僅介紹一些。

蛋白結(jié)合靶標(biāo)后穩(wěn)定性會變，原來60℃變性，與天然產(chǎn)物結(jié)合后不變了。通過電泳判斷條帶差異

原蘇木素A

確定結(jié)合位點-點突變驗證-分子互作研究

6.****多組分，中藥復(fù)雜成分

1.磁性微球結(jié)合二硫甲酮，UV下活化，和天然產(chǎn)物分子無差別光交聯(lián)→中藥芯片，在細(xì)胞裂解液中吊

w五味子醇甲

y野菊花復(fù)雜成分-巨噬細(xì)胞

納米金載體代替磁微球研究蘇木

7.從小分子到大分子

z中藥炮制或咖啡烘煮過程自組裝

三、答疑

1. 方法只是普篩，只關(guān)心該技術(shù)能篩到什么，至于全不全，是不是關(guān)鍵的核心分子，或者篩不到，就換一個植物再研究，反正我國中草藥多。
2. ?

   48:37

   ?
   藥物分子和靶標(biāo)共晶很重要，可以和結(jié)構(gòu)生物學(xué)實驗室合作
3. 有商業(yè)化探針購買
4. 生物素是最可靠的，有些方法學(xué)實驗室他有很多探針僅用于發(fā)表論文，生物素穩(wěn)定可靠公認(rèn)，點擊化學(xué)近年很火（上文提到）。
5. 很多藥物多靶標(biāo)。只能多方法共同確認(rèn)。如何通過技術(shù)方法區(qū)分結(jié)合蛋白與關(guān)鍵靶標(biāo)
6. 如果不能確認(rèn)功能，如抗炎，抗腫瘤。從傳統(tǒng)角度來講，有些中藥抗疲勞，很宏觀的藥效，可以研究肌肉組織試圖找靶點；補脾益氣-消化道。
7. 和第一個問題差不多。比如人參和全身多組織作用
8. 芯片技術(shù)很成熟，可以直接購買。

工作出色，工作量大，希望大家有條件可以多關(guān)注他們課題組的文章（雖然我沒在知網(wǎng)上找到他指導(dǎo)的學(xué)位論文，北大好像自己數(shù)據(jù)庫）