糖基化，尤其是N-糖基化修飾是生物體調(diào)控蛋白質(zhì)在組織和細(xì)胞中的定位、功能、活性、壽命和多樣性的一種普遍的翻譯后方式。N-糖基化位點(diǎn)研究是理解糖鏈功能的重要前提之一。在N-糖基化相關(guān)的信息中，發(fā)生N-糖基化的位點(diǎn)是我們理解其糖鏈功能的基礎(chǔ)。除了傳統(tǒng)生物化學(xué)中應(yīng)用點(diǎn)突變等方法對糖基化位點(diǎn)進(jìn)行研究，生物質(zhì)譜技術(shù)也在N-糖基化位點(diǎn)的鑒定中發(fā)揮了重要作用。MALDI TOF MS及nano LC-ESI-MS/MS常用于抗體中N-/O-糖基化位點(diǎn)的鑒定。

糖基化位點(diǎn)鑒定過程

（1） 使用trypsin或其他適當(dāng)?shù)牡鞍酌笇悠愤M(jìn)行酶切；
（2） 選取合適的色譜柱對N-glycopeptides, O-glycopeptides及其他多肽進(jìn)行分離；
（3） 脫糖基化處理；
（4） 通過MALDI-TOF MS, ESI-MS或MS/MS 對多肽圖譜進(jìn)行分析，找出糖基化的理論位置；
（5） 通過多肽圖譜確定每一個(gè)N-/O-糖原的位點(diǎn)；
（6） 對不同批次樣品的糖基化位點(diǎn)進(jìn)行比對。