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Wistar大鼠1型和2型糖尿病模型對比,找到區(qū)別一次學會兩種模型構(gòu)建

2022-10-20 16:08 作者:基礎(chǔ)醫(yī)學科研實驗安靜  | 我要投稿

糖尿病是一組以高血糖為特征的代謝性疾病。糖尿病的主要特點是血糖過高、糖尿、多尿、多飲、多食、消瘦。?

長期的高血糖狀態(tài)會導致各種組織,尤其是眼、腎、心臟、血管、神經(jīng)的慢性損害、功能障礙。

糖尿病主要分為1型糖尿病和2型糖尿病,1型糖尿病的特點是發(fā)病一般比較急驟,口渴、多飲、多尿、多食以及乏力消瘦,體重急劇下降等癥狀十分明顯,有的患者首發(fā)即有酮癥酸中毒。1型糖尿病需要通過胰島素治療,所以1型糖尿病又稱為胰島素依賴型糖尿病。2型糖尿病患者體內(nèi)產(chǎn)生胰島素的能力并非完全喪失,有的患者體內(nèi)胰島素甚至產(chǎn)生過多,但胰島素的作用效果較差,因此患者體內(nèi)的胰島素是一種相對缺乏,可以通過某些口服藥物刺激體內(nèi)胰島素的分泌。但到后期仍有一些病人需要使用胰島素治療。


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在醫(yī)學研究中常使用Wistar大鼠構(gòu)造1型糖尿病和2型糖尿病模型來研究這兩種疾病。下面來了解一下這兩種造模方法吧!

一型糖尿病造模

  1. 實驗動物:取適應性飼養(yǎng)一周的健康雄性Wistar大鼠。

  2. 實驗所需器械:

    1)注射器

    2)鏈尿佐菌素(STZ):? STZ對一定種屬動物的胰島β細胞有選擇性破壞作用,能誘發(fā)許多動物產(chǎn)生糖尿病,常用大鼠和小鼠糖尿病模型造模。

    3)檸檬酸緩沖液(PH4.2,檸檬酸、檸檬酸鈉)

  3. STZ配制:用檸檬酸緩沖液(PH4.2)配制,STZ終濃度為1%。檸檬酸(FW:210.14)2.1g加入雙蒸水100mL中配成A液;檸檬酸鈉(FW:294.10)2.94g加入雙蒸水100mL中配成B液。用時將A、B液按1:1,PH計測定PH值,調(diào)節(jié)PH=4.2-4.5,即是所需配置STZ的檸檬酸緩沖液,緩沖液須4℃保存,時效一周。STZ要現(xiàn)配現(xiàn)用,配置最好在冰上操作,注意避光,因為STZ見光易分解。

  4. ?注射造模:大鼠禁食24h后,精確稱量體重,按照60mg/kg的劑量予大鼠一次性腹腔注射1%STZ溶液。

  5. 飲食:普通飲食,勤加水,勤換墊料。

  6. 驗證:注射72h后,剪掉大鼠尾部尖端少許,用血糖儀測量大鼠血糖,血糖高于16.7mmol/L視為造模成功

二型糖尿病造模

  1. 實驗動物:取適應性飼養(yǎng)一周的健康雄性Wistar大鼠,大鼠體重在200左右,月齡在7周左右(具體選擇根據(jù)要求確定)。

  2. 實驗所需器械:

    1)注射器

    2)鏈尿佐菌素(STZ)

    3)檸檬酸緩沖液(PH4.2,檸檬酸、檸檬酸鈉)

  3. STZ配制:用檸檬酸緩沖液(PH4.2)配制,STZ終濃度為1%。檸檬酸(FW:210.14)2.1g加入雙蒸水100mL中配成A液;檸檬酸鈉(FW:294.10)2.94g加入雙蒸水100mL中配成B液。用時將A、B液按1:1,PH計測定PH值,調(diào)節(jié)PH=4.2-4.5,即是所需配置STZ的檸檬酸緩沖液,緩沖液須4℃保存,時效一周。STZ要現(xiàn)配現(xiàn)用,配置最好在冰上操作,注意避光,因為STZ見光易分解。

  4. 注射造模:精確稱量體重,按照25-40mg/kg的劑量予大鼠腹腔注射1%STZ溶液,連續(xù)注射5天。(建議30mg/kg,雄性大鼠一般注射1-2次即可成功,給藥量過多可能造成死亡)

  5. 飲食:高糖高脂飲食,勤加水,勤換墊料。持續(xù)一個月。

  6. 驗證:末次注射72h后,剪掉大鼠尾部尖端少許,用血糖儀測量大鼠血糖,血糖高于16.7mmol/L視為造模成功。

注意:2型糖尿病模型通過高糖高脂飼養(yǎng)聯(lián)合小劑量STZ使大鼠機體產(chǎn)生胰島素抵抗和胰島損傷,這是相對于1型糖尿病最大的區(qū)別。


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