? ? ? 來自細菌或病毒的核酸在受感染的細胞中會產(chǎn)生強效的免疫反應(yīng)，而病原體衍生核酸的檢測是宿主感知感染并啟動保護性免疫反應(yīng)的核心策略。cGAS (Cyclic GMP-AMP synthase) 是一種雙鏈?DNA 傳感器，可催化?cGAMP（cyclic GMP-AMP）的合成。cGAMP，刺激通過?STING-TBK1-IRF-3?信號軸刺激誘導(dǎo)?I?型干擾素的生成。STING?與?cGAMP?結(jié)合后寡聚化，從而導(dǎo)致?TBK1?激酶的募集和活化。然后?IRF-3?轉(zhuǎn)錄因子被招募到信號復(fù)合物中并被?TBK1?激活。在整個過程中，TBK1?的活化是?cGAS-STING?信號傳遞通路激活的關(guān)鍵步驟，可是?TBK1?如何被招募以及活化的分子機理一直不是很清楚。

? ? ?研究人員在探究 STING 突變體功能的過程中，偶然發(fā)現(xiàn)當(dāng) STING C-末端的9個氨基酸被剪切后，STING 就失去活力。通過細胞定位的方式發(fā)現(xiàn)，失去?C-末端 9個氨基酸的?STING 不能與 TBK1 結(jié)合發(fā)揮相應(yīng)的生物學(xué)作用。免疫共沉淀的實驗結(jié)果再次證實了，截斷的 STING 不能和 TBK1 結(jié)合-介導(dǎo)下游 TBK1 發(fā)揮相應(yīng)的生物學(xué)功能（如圖1.?所示）。

圖1. STING 失活（剪切 C 端 9 Aa）

? ? ? 隨后， 研究人員表達了野生型?STING?和它幾種突變體，并將 STING 的?9?個氨基酸一一突變?yōu)楸彼幔ˋlanine），發(fā)現(xiàn)其中-?L374A 點突變會讓?STING?徹底失去活性。根據(jù)?IFN-β? 熒光素酶報告實驗，研究人員發(fā)現(xiàn)這些突變還會影響干擾素的表達。為了排除物種間的差異，研究人員對不同物種的?STING?氨基酸序列進行分析，發(fā)現(xiàn)結(jié)合?TBK1?的序列?PLPLRT/SD?非常保守。

為了研究 STING 如何結(jié)合TBK1，研究人員分析了 STING C-末端和 TBK1 復(fù)合物的晶體結(jié)構(gòu)（如圖2. 所示）。結(jié)構(gòu)表明 STING 的 PLPLRT/SD 模塊結(jié)合在 TBK1 二體的表面上。根據(jù)晶體結(jié)構(gòu)，研究人員設(shè)計了多個?TBK1?的突變體,且用?CRISPR-Cas9?技術(shù)制備了?TBK1-knockout?細胞。研究人員對這些突變體的功能研究發(fā)現(xiàn)，與?STING?結(jié)合的殘基一旦突變，就會影響?STING?下游的信號通路的激活。研究人員同時還發(fā)現(xiàn)?TBK1-STING 結(jié)合區(qū)域的突變，也會影響 STING?下游信號通路發(fā)揮相應(yīng)的生物學(xué)功能。

圖2.?STING C-末端和 TBK1 復(fù)合物的晶體結(jié)構(gòu)

綜上所述，STING 保守基序 PLPLRT/SD 可介導(dǎo) TBK1 的募集和激活，影響?I?型干擾素的生成過程，進而影響其發(fā)揮相應(yīng)的生物學(xué)功能。

圖3. 文章概述圖

原文鏈接：

https://doi.org/10.1038/s41586-019-1228-x

相關(guān)產(chǎn)品：

BX795

BX795 是一種有效的，選擇性的?TBK1/PDK1?雙重抑制劑，IC50?值為6 nM/6 nM，對其選擇性是對 PKA，PKC，c-Kit，GSK3β 等的 50 多倍。BX795 抑制 S6K1，Akt，PKCδ 和 GSK3β 的磷酸化。

cGAMP?

cGAMP (CyclicGMP-AMP) 是多細胞動物內(nèi)源性第二信使，能激發(fā)干擾素的產(chǎn)生，STING 配體和活化劑。

C-176?

C-176 是干擾素基因刺激受體?(STING)?的強效共價抑制劑。

H-151?

H-151 是一種高效、選擇性、共價的?STING?拮抗劑，能夠降低 TBK1 的磷酸化，抑制人 STING 的棕櫚?；?。