組織培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基和組培儀器
MS培養(yǎng)基
MS培養(yǎng)基是目前使用最普遍的培養(yǎng)基。其具有較高的無機鹽濃度,能夠保證組織生長所需的礦質營養(yǎng)還能加速愈傷組織的生長。由于配方中的離子濃度高,在配制、貯存和消毒等過程中,即使有些成分略有出入,也不會影響離子間的平衡。MS固體培養(yǎng)基可用于誘導愈傷組織,也可用于胚、莖段、莖尖及花藥的培養(yǎng),其液體培養(yǎng)基用于細胞懸浮培養(yǎng)時能獲得明顯的成功。MS培養(yǎng)基的無機養(yǎng)分的數(shù)量和比例比較合適,足以滿足植物細胞在營養(yǎng)上和生理上的需要。因此,一般情況下,不用再添加氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有機附加成分。和其它培養(yǎng)基的基本成分相比,MS培養(yǎng)基中的硝酸鹽、鉀和銨的含量高,這是它的顯著特點。
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B5培養(yǎng)基
與其他培養(yǎng)基相比,它的主要特點是含有較低的銨,而銨這一營養(yǎng)成分可能對有些培養(yǎng)基有抑制生長的作用。當愈傷組織和懸浮培養(yǎng)中對B5培養(yǎng)基與MS培養(yǎng)基進行對比培養(yǎng)試驗時,發(fā)現(xiàn)有些植物的愈傷組織和細胞培養(yǎng)物在MS培養(yǎng)基上生長得好,有些在B5培養(yǎng)基上生長得更適宜。
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N6培養(yǎng)基
為水稻的花藥培養(yǎng)設計,成分簡單,硝酸銨含量高,不含鉬,用于花藥(谷物)培養(yǎng)。
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White培養(yǎng)基
為培養(yǎng)番茄根尖培養(yǎng)設計,無機鹽濃度低,屬于低鹽培養(yǎng)基。適用于生根培養(yǎng),成熟胚胎培養(yǎng),后作了改良,多用于本草植物。

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常用培養(yǎng)基母液成分及配置過程
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培養(yǎng)基母液的各種成分包括大量元素、微量元素、Fe鹽、有機成分、肌醇、激素等。
大量元素母液的配制(10X,1 L)


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微量元素母液的配置(100X,0.5 L)

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Fe鹽母液的配置(100X,0.2 L)


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有機成分母液的配置(100X,200ml,無肌醇)

肌醇母液配置(100X,200ml)?


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激素母液的配置

注意事項?
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配制大量元素母液時,某些無機成分如Ca2+、SO42-、Mg 2+和H2PO4一等在一起可能發(fā)生化學反應,產生沉淀物。為避免此現(xiàn)象發(fā)生,母液配制時要用純度高的重蒸餾水溶解,藥品采用等級較高的分析純,各種化學藥品必須先以少量重蒸餾水使其充分溶解后才能混合,混合時應注意先后順序。特別應將Ca2+、SO42-、Mg2+和H2PO4-等離子錯開混合,速度宜慢,邊攪拌邊混合。CaCl2·2H2O要在最后單獨加入,在溶解CaCl2·2H2O時,蒸餾水需加熱沸騰,除去水中的CO2,以防沉淀。另外,CaCl2·2H2O放入沸水中易沸騰,操作時要防止其溢出。
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使用電子分析天平時注意不要把藥品撒到稱盤上,用完以后,用吸耳球將天平內的臟物清理干凈。
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在配制鐵鹽時,如果加熱攪拌時間過短,會造成FeS04和Na2-EDTA鰲合不徹底,此時若將其冷藏,F(xiàn)eSO4會結晶析。為避免此現(xiàn)象發(fā)生,配制鐵鹽母液時,F(xiàn)eSO4和Na2-EDTA應分別加熱溶解后混合,并置于加熱攪拌器上不斷攪拌至溶液呈金黃色(約加熱20 - 30 min),調pH值至5 .5,室溫放置冷卻后,再冷藏。
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由于維生素母液營養(yǎng)豐富,因此貯藏時極易染菌。被菌類污染的維生素母液,有效濃度降低,并且易給后期培養(yǎng)造成傷害,不宜再用。避免此現(xiàn)象發(fā)生的方法是:配制母液時用無菌重蒸餾水溶解維生素,并貯存在棕色無菌瓶中,或縮短貯藏時間。
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所有的母液都應保存好,若母液出現(xiàn)沉淀或霉團則不能繼續(xù)使用。
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計算時,要考慮周全,無論是配置母液時的計算還是配置培養(yǎng)基時吸取量的計算,都要考慮周全,尤其是母液配置時的計算,因為貫穿以后的實驗,必須準確制備。

組培室組建常用的儀器設備器材

超凈臺

超凈臺

立式滅菌器

中央實驗臺

培養(yǎng)架

臥式滅菌器
病毒檢測流程及超凈臺
無菌室走廊
配藥室
無菌室凈化板
超凈臺
無菌走廊
組培架
灌裝室及參觀區(qū)
鋁箔組培架
帶開關全光譜燈
混合色光譜燈
平板混合色組培燈
培養(yǎng)室
彩色組培燈

鋁箔組培架

層板組培架

混合色燈光

貼鋁箔款組培架

層板組培架

黃光組培架

透氣卡扣式組培架

山東濰坊培養(yǎng)室

華南農大培養(yǎng)室

惠州培養(yǎng)室

銀川培養(yǎng)室

大連培養(yǎng)室

三亞培養(yǎng)室

帶開關組培燈

培養(yǎng)室場景

使用場景

使用場景

組培筐


塑料組培瓶款式
組培瓶使用場景
煉苗
組培瓶
組培瓶使用場景
煉苗
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