CRISPR（Clustered regularly interspaced short palindromic repeats）是生命進化歷史上，細菌和病毒進行斗爭產(chǎn)生的免疫武器，簡單說就是病毒能把自己的基因整合到細菌，利用細菌的細胞工具為自己的基因復制服務，細菌為了將病毒的外來入侵基因清除，進化出CRISPR系統(tǒng)，利用這個系統(tǒng)，細菌可以不動聲色地把病毒基因從自己的染色體上切除，這是細菌特有的免疫系統(tǒng)。微生物學家10年前就掌握了細菌擁有多種切除外來病毒基因的免疫功能，其中比較典型的模式是依靠一個復合物，該復合物能在一段RNA指導下，定向尋找目標DNA序列，然后將該序列進行切除。許多細菌免疫復合物都相對復雜，其中科學家掌握了對一種蛋白Cas9的操作技術，并先后對多種目標細胞DNA進行切除。這種技術被稱為CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)，迅速成為生命科學最熱門的技術。

海星生物技術團隊自主研發(fā)的基因編輯系統(tǒng)——ClonePlus?技術和VIRUS-Free?技術，為您的課題保駕護航。

ClonePlus?技術

ClonePlus?技術：是Cas9X技術平臺研發(fā)的專有高效細胞敲除的新技術，主要通過高通量電轉系統(tǒng)和高通量的克隆分選技術結合，獲得基因編輯的單細胞，其克隆形成率可以達98%，就算是克隆形成率低的細胞株也能獲得敲除單克隆，針對懸浮細胞也有更高的單克隆形成率。

輕松幫您實現(xiàn)細胞系（Cell Line）、永生化細胞（Immortalized Cell）、干細胞（Stem Cell）的基因編輯，無論是懸浮細胞（THP-1、K562、U937、Jurkat等）還是貼壁細胞（Hela、HEK293、HepG2等）或是易分化的細胞（MSCs、NSC、ES、BV2等）。

VIRUS-Free? 技術

VIRUS-Free??是一種利用轉座子進行細胞穩(wěn)轉株的構建和篩選的技術，以替代慢病毒感染構建穩(wěn)轉細胞株的技術。其載體中包括了轉座子的識別區(qū)域，能將目的片段從載體上或者BAC分子上切割下來形成一個小環(huán)結構，并在基因組里面的固定序列位置進行插入，從而實現(xiàn)穩(wěn)轉。

目前已經(jīng)在CAR-T細胞治療中得到較多的臨床應用，并充分體現(xiàn)出其：低成本、高效率、基因表達穩(wěn)定的特點。

海星生物通過不斷探索，開發(fā)的VIRUS-Free技術通過構建轉座系統(tǒng)質粒，將質粒轉染細胞，在轉座酶的作用下，高拷貝的Cas9蛋白與sgRNA表達元件被整合到基因組上，比傳統(tǒng)的病毒法節(jié)省了3-4周，價格節(jié)省了約40%。

部分成功案例

案例1：THP-1細胞基因敲除(KO）

敲除基因：A基因；敲除區(qū)域：Exon 1~13；

敲除片段大?。簙30 Kb

?案例2：SiHa細胞基因敲除（KO）

敲除基因：C基因；敲除區(qū)域：Exon 4；

敲除片段大?。?.4 Kb

作者：海星生物

公眾號：海星生物科技

以上內容由海星生物（http://www.cas9x.com)提供?

我們的服務：CRISPR/Cas9細胞基因編輯、載體構建/病毒包裝、分子診斷標準品/突變基因標準品/融合基因標準品、細胞穩(wěn)轉/細胞干擾

我們的產(chǎn)品：HyCyte干細胞/原代細胞/細胞株、三系誘導培養(yǎng)試劑、ClonePlus 專用培養(yǎng)基、基因編輯試盒、病毒現(xiàn)貨、細胞專用血清