實驗器材和試劑，流式細(xì)胞儀、離心機、一液器、12孔細(xì)胞培養(yǎng)板、一次性無菌巴氏氣管、15毫升無菌離心管、1.5毫升無菌離心管、300墨濾網(wǎng)、10%胎牛血清的1640細(xì)胞培養(yǎng)液、PBS緩沖溶液、NU6和卡蘇米細(xì)胞四種流式抗體。實驗過程，在超進工作臺內(nèi)準(zhǔn)備兩個15毫升細(xì)胞離心管，分別標(biāo)注為K和N，放在試管架上備用。將培養(yǎng)的卡蘇米細(xì)胞懸液加入標(biāo)記了K的離心管中，將培養(yǎng)的那六細(xì)胞懸液加入標(biāo)記了N的離心管中，平衡后將。兩管細(xì)胞懸液，室溫下500支離心五分鐘，超凈工作臺內(nèi)氣上經(jīng)驗，每管再加入五毫升的細(xì)胞培養(yǎng)液，重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液加入細(xì)胞培養(yǎng)瓶。二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)，按上述步驟隔天更換培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)二至三天，致細(xì)胞處于對數(shù)生長期，鏡檢細(xì)胞狀態(tài)良好備用。

取兩個15毫升離心管，標(biāo)記K和N，分別將培養(yǎng)好的卡蘇米和拉姆六細(xì)胞懸液加入標(biāo)記有K和N離心管中500支，離心五分鐘氣上精液，用遇冷的PBS離心洗滌細(xì)胞兩次2000轉(zhuǎn)，離心五分鐘，棄上清液。

500微升PBS重懸細(xì)胞取100微升細(xì)胞懸液，用流氏細(xì)胞儀進行細(xì)胞計數(shù)，調(diào)整細(xì)胞密度為1.0乘十的六次方，

每毫升取100微升卡蘇米細(xì)胞與標(biāo)記為K的1.5毫升離心管中取100微升囊六細(xì)胞與標(biāo)記為N的1.5毫升離心管中選取四種熒光標(biāo)記的抗體中的任意兩種進行組合，進行相關(guān)表型的檢測。

本實驗需要做四種表面抗原的檢測，如果每次檢測兩種抗原，四種抗體一共可以有六種組合方式，如選擇A組合檢。檢測了細(xì)胞表面抗原CD13CD22，那接下來正確的選擇應(yīng)該是，一組合檢測CD19CD33，其他同理，B和F組合，C和D組合。將K和N離心管中分別加入選定的抗體組合CD13CD22各五微升室溫避光浴15到20分鐘，用遇冷PBS離心洗滌細(xì)胞三次，每次一毫升，2000轉(zhuǎn)離心五分鐘。氣上精液取300微升PBS。重懸細(xì)胞取上述兩種細(xì)胞懸液過300目濾網(wǎng)與兩個新的離心管中備用，同樣另取兩管培養(yǎng)好的卡蘇米和囊六細(xì)胞懸液500支，離心五分鐘，系上心液，用遇冷的PBS離心洗滌細(xì)胞兩次2000轉(zhuǎn)，離心五分鐘。選取另一組熒光標(biāo)記抗體組合CD19和CD33，取密度為1.0乘十的六次方每毫升的卡蘇米和NUMBER6細(xì)胞血液各100微升，分別置于K管和N管中，每管加入CD19和CD33熒光標(biāo)記抗體。室溫避光伏日15到20分鐘，用遇冷PBS離心洗滌細(xì)胞三次，每次一毫升，2000轉(zhuǎn)離心五分鐘，氣上清液300微升PBS重懸細(xì)胞系上興液。300微升PBS重懸細(xì)胞，取上述兩種細(xì)胞懸液，分別過300目濾網(wǎng)與兩個新的離心管中備用。