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氨基酸、葡萄糖、BSA改良后的KSOM培養(yǎng)基有多厲害?

2021-06-15 16:04 作者:艾美捷  | 我要投稿

KSOM培養(yǎng)基(KSOM Medium)是一種小鼠胚胎培養(yǎng)液。KSOM培養(yǎng)基能夠讓受精卵克服雙細(xì)胞障礙,支持體外和體內(nèi)發(fā)育。KSOM培養(yǎng)基能夠獲得更高的細(xì)胞分裂率,產(chǎn)生更多的囊胚發(fā)育。

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KSOM培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分調(diào)整對(duì)小鼠植入前期胚體外發(fā)育的影響

目的囊胚發(fā)育率低和發(fā)育遲緩是繼"2-細(xì)胞阻滯"解決后小鼠胚胎體外培養(yǎng)中面臨的兩大問題。實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)KSOM培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分的調(diào)整,觀察對(duì)胚胎發(fā)育的影響,優(yōu)化培養(yǎng)基的構(gòu)成。方法采用微滴培養(yǎng)法培養(yǎng)昆明小鼠單細(xì)胞胚胎,以胚胎發(fā)育到囊胚的比例、孵出比例以及注射hCG后120 h囊胚全細(xì)胞數(shù)作為判斷培養(yǎng)效果的標(biāo)準(zhǔn),比較KSOM在葡萄糖、牛血清白蛋白、氨基酸3種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不同濃度下對(duì)小鼠植入前胚體外培養(yǎng)的效果。

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結(jié)果在未加氨基酸時(shí)葡萄糖、牛血清白蛋白的變化對(duì)注射hCG后120 h囊胚形成率、囊胚全細(xì)胞數(shù)影響不大,添加氨基酸后,囊胚發(fā)育速度提高,部分孵出和全部孵出比例提高,囊胚全細(xì)胞數(shù)增大明顯,且葡萄糖、牛血清白蛋白與氨基酸對(duì)囊胚的發(fā)育有共同促進(jìn)的作用。

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結(jié)論通過(guò)添加適量的氨基酸、葡萄糖、BSA改良KSOM培養(yǎng)基能很好的促進(jìn)小鼠植入前胚體外發(fā)育。

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增加葡萄糖的影響

相關(guān)研究表明,在未加氨基酸時(shí),單獨(dú)增加KSOM中葡萄糖和BSA濃度或同時(shí)增加二者濃度,對(duì)早期囊胚的形成率和囊胚卵裂球數(shù)無(wú)顯著影響,幾種情況下,KSOM與以往報(bào)道的培養(yǎng)基想必,均顯示了較高的囊胚形成率和囊胚卵裂球數(shù)。

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增加BSA的影響

KSOM中BSA的濃度已經(jīng)基本能滿足胚胎發(fā)育到早期囊胚的需求。

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增加氨基酸的影響

KSOM中單獨(dú)添加氨基酸在囊胚發(fā)育的中后期顯示明顯的促進(jìn)作用,部分孵出和完全孵出的比例明顯提高,囊胚卵裂球數(shù)明顯增加,顯示了氨基酸在發(fā)育后期有BSA不可替代的加快生長(zhǎng)和促進(jìn)分化作用。

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研究表明,通過(guò)增加KSOM培養(yǎng)基中葡萄糖和BSA濃度,同時(shí)添加一定濃度的Eagle必需氨基酸和非必需氨基酸,能很好的滿足小鼠植入前期胚體外生長(zhǎng)、發(fā)育的需求。

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美國(guó)Caisson Labs致力于生物技術(shù)和生命科學(xué)等行業(yè)領(lǐng)域,專注于植物生物學(xué)技術(shù)研究,以滿足全球不斷增長(zhǎng)的食品,能源、醫(yī)藥日益增長(zhǎng)的需求和發(fā)展。作為Caisson Labs的中國(guó)區(qū)域代理,艾美捷科技為中國(guó)客戶提供Caisson Labs制造的全系列產(chǎn)品,包括植物生物學(xué)產(chǎn)品(包括植物組織培養(yǎng)基、凝膠系列產(chǎn)品、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、抗生素&抗菌劑、生化試劑以及植物組培容器和耗材)和動(dòng)物以及微生物細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品。


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