利用液相色譜檢測蔗糖及其他糖類含量方法及驗證
蔗糖,化學名β-D-果糖呋喃糖基-α-D-葡萄吡喃糖苷,分子式C12H22O11,分子量342.30,具有易溶于水,微溶于乙醇,不溶于醚的物理特性,在化學藥物制劑中有著極其廣泛的用途,例如可作為黏合劑、增溶劑、甜味劑及賦性劑等,在糖漿劑、顆粒劑等劑型中用量較大。另外還通過作為凍干保護劑,廣泛應用于各類菌種、疫苗等生物制劑中。
蔗糖含量測定方法可照髙效液相色譜法(《中國藥典》(通則0512)測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗采用糖分析柱,以水為流動相,流速為每分鐘0.5ml,柱溫為80℃,示差折光檢測器,檢測溫度為40℃。取棉子糖、蔗糖、葡萄糖、果糖對照品適量,用水溶解并定量稀釋制成每1ml中約0.5mg的系統(tǒng)適用性溶液,搖勻,取10μl注入液相色譜儀,記錄色譜圖。棉子糖、蔗糖、葡萄糖、果糖之間的分離度均應大于 1.5。
測定法取本品適量,精密稱定,用水溶解稀釋制成每1ml中約含1mg的溶液,搖勻,精密量取10μl,注入液相色譜儀,記錄色譜圖;另取蔗糖對照品,同法測定,按外標法以峰面積計算,即得。
另外實驗室還可利用例如化學分析法,氣相色譜法,離子色譜對蔗糖含量進行檢測,其中離子色譜是高效液相色譜的重要分支,無需衍生化,分辨率高,重現(xiàn)性好,適用于某些熱敏性糖類和多糖分子量的檢測。文章分享一種利用離子色譜對蔗糖含量的檢測方法。
選擇色譜柱(3mm×30mm,6.5μm)流動相5mmol/LNaOH溶液,流速0.4mL/min,柱溫30℃;進樣量10μL,將配制好的系列標準工作溶液,進樣5μL測定,以目標物峰面積為縱坐標(Y),相應質(zhì)量濃度(μg/mL)為橫坐標(X),繪制標準曲線,該方法穩(wěn)定、準確、分離度好、靈敏度高,且操作簡單、快速,適合蔗糖的檢測及含量測定。
微源檢測實驗室擁有光譜、色譜、質(zhì)譜、波譜、電鏡、核磁等多類檢測設備儀器,可根據(jù)樣品情況對糖類含量變化進行檢測,為生物醫(yī)藥、化工等領域伙伴提供評估報告、方法開發(fā)、驗證及樣品檢測等一系列完整的解決方案,提供單糖、寡糖、多糖等糖類含量檢測服務,更多檢測項目請咨詢客服。
參考資料:中國藥典2020;文章部分圖片來源網(wǎng)絡侵刪。