Waters Q-tof液質(zhì)聯(lián)用儀的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程3.4-3.13（全部更新）
3.5LockSpray Setup
Lockspray setup為測試Lockmass的強(qiáng)度。在做Calibration之前先進(jìn)行Lockspray setup。IntelliStart 能自動(dòng)為質(zhì)量鎖Lockmass物質(zhì)建立離子源參數(shù)以保證在采集中得到足夠的離子強(qiáng)度。
3.5.1在Masslynx主界面單擊MS Tune圖標(biāo)，打開調(diào)諧窗口。
3.5.2將擋板切換到LockSpray, 正離子m/z556.2771或負(fù)離子m/z554.2615峰強(qiáng)度達(dá)到e5 分辨率Resolution>20000,則可以開始LockSpray setup。
3.5.3在MS Console界面，左側(cè)位置選中選擇SYNAPT G2-SI /Intellistart，在右側(cè)窗口菜單中勾選Lockspray ?setup。然后點(diǎn)擊Start.
3.5.4從下拉單里選擇lockmass的Profile文件（如果沒有合適的，可以點(diǎn)擊本窗口左下角 的Lockmass Editor按鈕進(jìn)行編輯并創(chuàng)建新的lockmass）保證亮氨酸腦啡肽物質(zhì)從Lockspray口進(jìn)樣, 點(diǎn)擊Next.
Note:LockSpray Profile editor
3.5.5選擇 custom 和Display Report復(fù)選框, 然后點(diǎn)擊 Next.
3.5.6選擇 tune page 復(fù)選框,點(diǎn)擊Next.
3.5.7選擇 tune page 復(fù)選框,點(diǎn)擊Next
3.5.8確保B瓶中有樣品，點(diǎn)擊Start.
3.5.9當(dāng)Lockspray source setup完成后，自動(dòng)出報(bào)告同時(shí)MS console界面會(huì)出現(xiàn)綠勾.
3.6 Create calibration
為保證樣品質(zhì)量數(shù)準(zhǔn)確測定，軟件需要校正質(zhì)量軸。進(jìn)樣一系列已知質(zhì)量數(shù)參比溶液，軟件會(huì)比較預(yù)期質(zhì)量數(shù)與實(shí)測質(zhì)量數(shù)的差別，生成一校正曲線。校正曲線可以用IntelliStart 部分或完全自動(dòng)生成。IntelliStart可以讓操作者自動(dòng)去核對(duì)校正曲線的質(zhì)量。
3.6.1將擋板打到Sample,將LockSpray
,打開Sample flow
等峰強(qiáng)度達(dá)到e5 分辨率Resolution>20000,則可以開始Create Calibration進(jìn)行校正質(zhì)量軸
3.6.2在MS Console界面，左側(cè)位置選中選擇SYNAPT G2-SI /Intellistart，在右側(cè)窗口菜單中勾選Create Calibration。然后點(diǎn)擊Start.
3.6.3在彈出的向?qū)Ы缑纥c(diǎn)擊Next 以進(jìn)入建立校正曲線。
3.6.4從下拉菜單里選擇校正文件，注意橙色三角形表示校正文件已經(jīng)定義過，但還沒有被校正。然后點(diǎn)擊Next。
Note: Calibration ?Profile editor
3.6.5選擇Mode, 并勾選Display Report 和 Make the Calibration ProfileActive 復(fù)選框點(diǎn)擊Next。
3.6.6點(diǎn)擊Next
3.6.7選擇Tune Page,點(diǎn)擊Next。
3.6.8保證甲酸鈉Sodium Formate樣品在C瓶里，然后點(diǎn)擊Start.
3.6.9當(dāng)Create Calibration完成后，自動(dòng)出報(bào)告同時(shí)MS console界面會(huì)出現(xiàn)綠勾.
3.7 UPLC的準(zhǔn)備
3.7.1準(zhǔn)備溶液
A1：水；A2：甲酸水；B1：乙腈或甲醇; 強(qiáng)洗溶液90：10乙腈：水(B2和wash放在強(qiáng)洗溶液中); 弱洗溶液10:90乙腈：水(purge和seal wash放在弱洗溶液中)。
3.7.2灌注流動(dòng)相Prime solvent
進(jìn)入MS Console —> Binary Solvent Manager, 在Control —> Prime A/B solvents…下選擇要prime的管路。A1、A2、 B1 、B2各4分鐘。
3.7.3灌注 seal wash。
在泵長時(shí)間未用（幾個(gè)小時(shí)或更長時(shí)間）、用過緩沖液流動(dòng)相以及泵流路中溶液走干的情況下，還需要灌注密封圈（Prime Seal wash）Seal wash溶液一般為10%的有機(jī)相，不含任何緩沖鹽。選擇左欄Binary Solvent Manager ，在右側(cè)窗口中選擇菜單Control > Prime seal wash，單擊Yes，開始灌注,seal wash的灌注不能設(shè)時(shí)間，需手動(dòng)停止：Control > Prime seal wash。
3.7.4灌注自動(dòng)進(jìn)樣器
（更換了新的強(qiáng)洗弱洗溶液或sample syringe有氣泡等情況下）還需灌注sample manager流路（MS Console —>Sample Manager / Control —>Prime syringe）；如更換溶劑，建議做5個(gè)cycles。
3.7.4設(shè)定流速平衡系統(tǒng)
在Masslynx主界面，單擊Inlet Method 圖標(biāo)，打開液相方法編輯窗口。
單擊status > ACQUITY Additional Status ，進(jìn)入液相控制臺(tái)。單擊 A1 或 B1或流速的位置，出現(xiàn)流速、比例設(shè)定對(duì)話框設(shè)定液相流速與比例，單擊
。
3.8建立液相方法
3.8.1在Masslynx主界面，單擊Inlet Method 圖標(biāo)，打開液相方法編輯窗口編輯泵相關(guān)方法，主要有梯度組成、運(yùn)行時(shí)間等。
3.8.2單擊Autosampler 圖標(biāo) 打開自動(dòng)進(jìn)樣器編輯窗口，編輯sample manager及column相關(guān)方法，主要有強(qiáng)洗弱洗、柱溫及樣品室溫度(設(shè)定方法如下圖所示)。樣品室溫度如樣品非特殊要求，建議不要長期設(shè)置在10℃以下。
3.8.3選擇 File > Save As 保存方法. 并單擊Load Method將液相方法配置給儀器，以平衡系統(tǒng)。
3.9建立質(zhì)譜方法
3.9.1在MassLynx 主界面左側(cè)快捷工具欄, 點(diǎn)擊MS Method。
3.9.2選擇File>New,建立TOF MS方法參數(shù)如下：
Notes:對(duì)于SYNAPT G2-Si,低能通道電壓設(shè)置選擇off，儀器使用默認(rèn)電壓6V。低能通道的作用是選擇離子，6V默認(rèn)電壓較低，沒有起到選擇離子的作用，使離子全部通過.
3.9.3點(diǎn)擊Lockspray圖標(biāo)，編輯Lockmass，選擇合適的Lockspray profile file. 若用Masslynx分析數(shù)據(jù)選擇第一項(xiàng)Acquire Lockspary-Apply correction,若用UNIFI軟件分析數(shù)據(jù)選擇第二項(xiàng)Acquire Lockspary-Do not Apply correction,從下拉單里選擇LockMass Profile。
3.9.4點(diǎn)擊 Method Events，選擇Enable 復(fù)選框。
3.9.5保存質(zhì)譜方法。
3.10建立樣品序列表
3.10.1在Masslynx主窗口，選擇 File > New建立一個(gè)空白的樣品表Sample list。
3.10.2可點(diǎn)擊右鍵> Add, 增加樣品表的行數(shù)。
3.10.3在空白的金樣列表中輸入以下信息：文件名File Name（英文字母，數(shù)字和下劃線）、樣品信息 File Text，雙擊MS File選擇質(zhì)譜方法（或右鍵點(diǎn)擊browse選擇質(zhì)譜方法），雙擊Inlet File選擇液相方法（或右鍵點(diǎn)擊browse選擇液相方法），在Bottle位置中輸入樣品瓶的 位置，在 Inject Volume中輸入進(jìn)樣體積。
Note:選擇小瓶位置
Note: File name不能重名，如重名將會(huì)覆蓋原有的數(shù)據(jù)。
3.10.4編輯完畢，保存樣品表：File > Save As。
3.11運(yùn)行樣品
3.11運(yùn)行樣品：進(jìn)入 UPLC 界面，等壓差小于30psi 才可以開始進(jìn)樣選中要采集的樣品，單擊Run > Start ,選擇Acquire Sample Data only,并單擊OK 開始進(jìn)樣并采集。
3.12數(shù)據(jù)的簡單處理
3.12.1在Masslynx軟件界面，點(diǎn)擊Chromatogram,進(jìn)入色譜圖數(shù)據(jù)瀏覽窗口。
3.12.2菜單Display > TIC可以顯示其它通道的色譜圖，一般情況下最后一個(gè)質(zhì)譜通道為 lockspary通道。
打開BPI色譜圖：Display/TIC Chromtagram/把BPI Chromtogram
三個(gè)通道的色譜圖如下：
3.12.3提取離子流圖
菜單Display > Mass可以顯示某一質(zhì)量數(shù)的提取離子流色譜圖。
3.12.4色譜圖的重疊
3.13關(guān)機(jī)過程
3.13.1自動(dòng)關(guān)機(jī)
當(dāng)運(yùn)行序列表時(shí)可以設(shè)置自動(dòng)關(guān)機(jī)，自動(dòng)關(guān)機(jī)程序如下：選中Edit Shutdown or Start up,在Shutdown界面進(jìn)行勾選Enable shutdown after batch和Shutdown if queue is in pause。在Auto Control Tasks界面選擇 Source Standby 和LC Pump off.
3.13.2日常關(guān)機(jī)
1. 沖洗質(zhì)譜管路，沖洗完色譜柱后再進(jìn)樣幾針空白乙腈，最后用50%乙腈-水分別沖洗Sample和LockSpray的噴針，將噴針里面的鹽置換出來。
2.停止色譜泵：進(jìn)樣結(jié)束后需沖洗色譜柱，最后以 100%有機(jī)相保存色譜柱， 沖洗完管路后，逐漸把流速降為 0 ml/min。
2.關(guān)閉柱溫控制器：進(jìn)入 UPLC 界面，點(diǎn)擊 Column Manager 處的溫度，輸入 off，點(diǎn)擊√。
3. 關(guān)閉高壓
點(diǎn)擊此處指示燈由綠色變?yōu)辄S色，選擇Setup下的Instrument standby. 指示燈由黃色變?yōu)榧t色。Note: Source standby：氮?dú)?、氬氣停，毛?xì)管電壓、錐孔電壓停，離子源溫度降為室溫。Instrument standby：在source standby基礎(chǔ)上，將加在TOF上的高壓電關(guān)閉。若儀器只停幾個(gè)小時(shí)可選擇Source standby，若儀器停兩天以上需選擇Instrument standby。
4.待源溫降低后再關(guān)閉隔離閥，關(guān)閉氮?dú)狻?/span>
3.13.3關(guān)機(jī)過程
打開MS tune窗口，點(diǎn)擊Vacuum/Vent，在彈出的對(duì)話框中選擇yes。
等待約5分鐘。（在這個(gè)過程中應(yīng)該能聽到分子泵降速的聲音，也可以觀察MS tune\View\Vacuum, 六個(gè)Turbo speed會(huì)逐漸下降，直至六個(gè)分子泵的轉(zhuǎn)速均降至5以下，表明真空已經(jīng)關(guān)閉）。
關(guān)閉所有軟件和電腦。
關(guān)閉液相所有模塊的電源。
關(guān)閉質(zhì)譜的電源（在質(zhì)譜背面板右側(cè)位置有四個(gè)黑色的可以上下搬動(dòng)的開關(guān)，按照從上向下的順序依次將這四個(gè)開關(guān)搬到向下的位置。）
關(guān)閉氮?dú)獍l(fā)生器的電源或是液氮罐的開關(guān)。
關(guān)閉氬氣減壓閥（如果是HDMS還需要關(guān)閉氦氣減壓閥）。
關(guān)機(jī)結(jié)束
3.14儀器重啟過程（儀器出現(xiàn)通訊問題）
關(guān)閉所有的軟件，并重啟電腦，直至顯示windows桌面。
在質(zhì)譜背面板右側(cè)位置有一個(gè)銀色的可以左右搬動(dòng)的按鈕，將其搬至向右的位置（向左的位置為Auto,向右的位置為Pump Override,在搬動(dòng)過程中，需要將按鈕向外稍微用力才可以上下搬動(dòng)）
從上向下依次關(guān)閉質(zhì)譜背面板右側(cè)除了Vacuum位置的其他三個(gè)黑色的開關(guān)。
等待15分鐘。
從下向上依次將質(zhì)譜背面板右側(cè)除了Vacuum位置的其他三個(gè)黑色的開關(guān)搬到向上的位置。
等待5分鐘。（或是進(jìn)入桌面的 hyperterminal 文件夾，雙擊其中的的 hypertrm 圖標(biāo)，在 name 處輸入 epc 并點(diǎn)擊 OK，接著在彈出的窗口中在 Connect using 中選擇 com2并點(diǎn)擊 ok，在彈出的窗口中將 Bits per second 設(shè)為 9600 并點(diǎn)擊 ok，在彈出的窗口中直至出現(xiàn) Done executing startup script 'script.txt'的信息， 表明質(zhì)譜啟動(dòng)完畢）
雙擊桌面上的Masslynx V4.1圖標(biāo)，打開Masslynx軟件，等待在Masslynx 的主窗口狀態(tài)欄中部偏右的位置出現(xiàn)“Not Scanning”的信息。
打開MS tune 窗口，單擊氬氣的控制開關(guān)，使氬氣關(guān)閉?？吹組S tune左下角出現(xiàn)“Pump Override Activated”信息后，找到質(zhì)譜背面板中下部的一個(gè)銀色按鈕，將上方的按鈕搬到向上的位置。這時(shí)“Pump Override Activated”信息將會(huì)消失。
點(diǎn)擊MS tune窗口右下角的operate按鈕，看到右下角紅色方塊變成綠色后完成。
重啟完畢。
3.15亮氨酸腦啡肽溶液和甲酸鈉溶液的配制過程
1 ng/μL leucine enkephalin
1. Using a 5-mL pipette, add 7.5 mL of water to the contents of a 3 ±0.15 mg bottle of leucine enkephalin.
2. Recap, shake well, and sonicate for 5 minutes.
3. Label as "400 ng/μL leucine enkephalin in water" and store in the freezer (expires in 3 months).
4. Using a 200-μL pipette, transfer 50 μL of the 400 ng/μL leucine enkephalin in water to a 20-mL volumetric flask.
5. Make up to 20 mL with 50:50 acetonitrile:water + 0.1% formic acid and sonicate for5 minutes.
6. Label as "1 ng/μL leucine enkephalin in 50:50 acetonitrile:water + 0.1% formic acid"and store in the freezer (expires in 1 month).
7. For Fluidics systems, transfer from the 20-mL volumetric flask to a 30-mL fluidics container and label as "1 ng/μL leucine enkephalin in 50:50 acetonitrile:water + 0.1% formic acid" and store in the freezer (expires in 1 month).
50:50 acetonitrile:water + 0.1% formic acid的配制過程
用100ml的量筒轉(zhuǎn)移25ml LCMS級(jí)乙腈到100ml的容量瓶中。
用100ml的量筒轉(zhuǎn)移25ml去離子水到100ml的容量瓶中。
用200ul的移液槍加50ul的甲酸到100ml的容量瓶中。
超聲10分鐘，標(biāo)簽為50:50 acetonitrile:water + 0.1% formic acid
5 mM sodium formate solution in 90:10 2-propanol:water
1. Using a 1000-μL pipette, transfer 1000 μL of 0.1 M sodium hydroxide solution to a 20-mL volumetric flask.
2. Using a 1000-μL pipette, transfer 900 μL of deionized or LCMS-grade water to the 20-mL volumetric flask.
3. Using a 200-μL pipette, add 100 μL formic acid to the 20-mL volumetric flask.
4. Make up to 20 mL with 90:10 2-propanol:water and sonicate for 5 minutes.
5. Label as "5 mM sodium formate solution in 90:10 2-propanol:water" and store in the refrigerator (expires in 1 week).
6. For Fluidics systems, transfer from the 20-mL volumetric flask to a 30-mL fluidics container and label as "5 mM sodium formate solution in 90:10 2-propanol:water" and store in the refrigerator (expires in 1 week).
0.5 mM sodium formate solution in 90:10 2-propanol:water
1. Using a 1000-μL pipette, add 2000 μL of 5 mM sodium formate solution to a 20-mL volumetric flask.
2. Make up to 20 mL with 90:10 2-propanol:water and sonicate for 5 minutes.
3. Label as "0.5 mM sodium formate solution in 90:10 2-propanol:water" and store in the refrigerator (expires in 1 week).
4. For Fluidics systems, transfer from the 20-mL volumetric flask to a 30-mL fluidics container and label as "0.5 mM sodium formate solution in 90:10 2-propanol:water" and store in the refrigerator (expires in 1 week). ?
Notes:
1.試劑的級(jí)別：2-propanol異丙醇（HPLC級(jí)）、Acetonitrile乙腈（LC-MS級(jí)）、Methanol甲醇（LC-MS級(jí)）、deionized or LCMS-grade water。
2.配制過程需用10/100ml量筒、20/100ml的容量瓶、200/1000ul移液槍
3.所有的玻璃器皿需潔凈，用甲醇沖洗，使用前干燥（不能用任何洗滌劑清洗）
4.配制0.1 M sodium hydroxide in water需提前燒開水，除去水中的CO2.
4注意事項(xiàng)
4.1流動(dòng)相和清洗液
1.總是使用清潔的玻璃器皿(瓶子, 量筒或溶劑過濾裝置),并在用前沖洗干凈；盡量保持一組溶劑瓶和玻璃器皿專用于ACQUITY UPLC系統(tǒng)。決不要用其他實(shí)驗(yàn)室(例如微生物實(shí)驗(yàn)室等)的玻璃器具來沖洗UPLC的玻璃容器需在試劑瓶上做好標(biāo)簽如日期、姓名、組成等
2.A1：水 A2：甲酸水 B1：乙腈或甲醇 ? B2和wash放在強(qiáng)洗溶液中（乙腈：水9:1） ?purge和seal wash放在弱洗溶液中（水：乙腈9:1）。質(zhì)譜部分的清洗液為50:50甲醇：水。
3.超純水和緩沖液一般使用不得超過二天。低有機(jī)相溶劑（10%以下的有機(jī)相，避免長菌，影響分析及儀器性能）不要超過一周。有機(jī)溶劑也不應(yīng)一次性加的體積過多，有機(jī)相長期不用時(shí)也需要重新配置，避免長時(shí)間不換變質(zhì)。
4.不能將新配的流動(dòng)相直接倒入沒有充分清洗或還存有舊流動(dòng)相的儲(chǔ)液瓶內(nèi)。每24-48小時(shí)即應(yīng)仔細(xì)清洗流動(dòng)相瓶并配制新鮮流動(dòng)相。
5.有機(jī)相要使用原裝進(jìn)口的質(zhì)譜純?nèi)軇?/span>，常用的有 MERCK，F(xiàn)ISHER 等品牌的質(zhì)譜級(jí)甲醇、乙腈有機(jī)溶劑，水相一般為屈臣氏純凈水。
6.超純水和緩沖液一般使用不得超過二天。
7.緩沖鹽一定是可揮發(fā)的，一般濃度不超過10mM。常用的緩沖鹽有：甲酸，乙酸，甲酸銨，乙酸銨，氨水等。使用所能得到的最高等級(jí)（至少為色譜級(jí)）的緩沖鹽。緩沖鹽會(huì)在離子源部分結(jié)晶、沉積會(huì)把錐孔燒黑。
8. 仔細(xì)檢查所有流動(dòng)相和清洗液， 確定瓶內(nèi)無沉積物和絮狀物后方可使用。
9.樣品保存：甲酸LC-MS級(jí)。甲酸需置于冰箱-4℃中保存。亮氨酸腦啡肽溶液：母液需置于冰箱-20℃中保存（防止亮氨酸腦啡肽分解），用時(shí)解凍。
10.樣品瓶是UPLC分析中易被忽視的地方，使用不當(dāng)往往會(huì)使SM出現(xiàn)進(jìn)樣針故障。推薦使用有預(yù)開口設(shè)計(jì)的瓶蓋。
4.2液質(zhì)常用的流動(dòng)相和添加劑
LCMS常用的流動(dòng)相： 水 乙腈 甲醇 異丙醇
LCMS常用的添加劑：乙酸 甲酸 三氟乙酸（正離子） 氨水 氫氧化銨 甲酸銨* 乙酸銨* 碳酸氫銨 * 鹽濃度應(yīng)限制在10 mM 以下
LC/MS流動(dòng)相中不適宜的添加劑
非揮發(fā)性的鹽： (磷酸鹽, 硼酸鹽, 檸檬酸鹽, 碳酸鹽等等)，會(huì)在離子源部分結(jié)晶、沉積
無機(jī)酸：具腐蝕性（硫酸、高氯酸、磷酸、鹽酸、磺酸等）
三氟醋酸 (TFA)：濃度 ??0.01% 時(shí)會(huì)抑制電噴霧的正離子會(huì)大大抑制電噴霧的負(fù)離子。
堿：季胺 強(qiáng)堿 三乙胺 (TEA)：對(duì)弱堿性化合物而言，將會(huì)抑制電噴霧的正離子且極容易電離得到非常強(qiáng)的 m/z 102 分子離子（MH+）
四氫呋喃（THF）非常易燃
表面活性劑 /洗滌劑 ：會(huì)抑制電噴霧電離.
4.4樣品預(yù)處理方法的選擇
樣品處理的好壞直接關(guān)系到整個(gè)LC-MS分析的成敗，必須要有成熟規(guī)范的樣品制備方法。樣品預(yù)處理各步不能隨意省略，如萃取、分離、去鹽等。某些化合物必須化學(xué)衍生化以適應(yīng)LC-MS 要求，如磷酸酯水解。若MS信號(hào)實(shí)在太低，考慮更換樣品處理方法。此外濃度非常低的樣品不能保存太長時(shí)間，容器吸附、分解等原因使樣品濃度降低，標(biāo)準(zhǔn)品工作液現(xiàn)配現(xiàn)用。
在生物樣品預(yù)處理中經(jīng)常使用到的方法主要有以下三種-沉淀蛋白法、液液提取法和固相萃取法（SPE），而這三種方法的選擇，主要取決于化合物的特性。分析極性比較大的化合物，優(yōu)先考慮使用沉淀蛋白法，這種方法操作簡單，省時(shí)省力；缺點(diǎn)是生物基質(zhì)中內(nèi)源性物質(zhì)去除的不徹底，基質(zhì)效應(yīng)較大，使得方法靈敏度不高。分析極性較小的化合物，我們可以選擇液液萃取法，這種方法根據(jù)相似相溶的原則進(jìn)行分離提取，優(yōu)點(diǎn)在于處理完的樣品較干凈，內(nèi)源性物質(zhì)去除徹底；缺點(diǎn)在于消耗有機(jī)試劑的量很大，對(duì)操作人員、環(huán)境的污染也大。固相萃取法采用固相萃取小柱作為分離媒介，小柱添加了不同填料的固定相，如以鍵合硅膠為基質(zhì)的如C18、NH2、 COOH、PSA、SAX等，是硅膠的表面活性大為降低，最大程度的降低了極性化合物的不可吸附和拖尾，使樣品回收率和重現(xiàn)性得到保障；以高分子聚合物為基質(zhì)的如PEP、HXN、PAX、PCX等，具有高純度、高比表面的特點(diǎn)；以吸附型填料為固定相的如硅酸鎂、氧化鋁等，主要通過表面的極性吸附達(dá)到分離的目的。因此，固相萃取法適用于各種極性的化合物，樣品處理過程中使用的設(shè)備簡單，柱子活化便捷，基質(zhì)效應(yīng)低；缺點(diǎn)是價(jià)格昂貴。如今出現(xiàn)了96孔板的固相萃取小柱，可以批量處理樣品，耗材少，耗時(shí)短，大大提高了工作效率。
4.5用PEEK管時(shí)注意溶劑的使用，HNO3，H2SO4會(huì)腐蝕PEEK管。DMSO 、THF、CH2Cl2會(huì)溶脹PEEK管。
4.6樣品貯存在塑料離心管中，其中的添加劑很容易混入，尤其是被有機(jī)溶劑浸泡 時(shí)間較長時(shí)，會(huì)產(chǎn)生干擾物信號(hào)
4.7工作站計(jì)算機(jī)不要安裝與儀器操作無關(guān)的軟件，要經(jīng)常清理計(jì)算機(jī)磁盤碎片， 定期查殺病毒，定期備份實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
