編者按

隨著CAR-T細(xì)胞療法的蓬勃發(fā)展，每月都會(huì)出現(xiàn)新的CAR-T理念和技術(shù)。小編嘗試把其中一些編錄于此，以鼓勵(lì)我們的患者——抗癌路上，有無(wú)數(shù)的科學(xué)家、醫(yī)務(wù)工作者和我們并肩作戰(zhàn)，并且不斷取得新的勝利。

乳腺癌的新型CAR-T療法

在以前的研究中，研究人員生成了針對(duì)EGFRvIII突變的CAR-T細(xì)胞，為治療晚期乳腺癌帶來(lái)了希望。然而，其抗腫瘤效能被認(rèn)為是有限的，這可能是由于CAR-T細(xì)胞無(wú)法在腫瘤部位積累足夠的數(shù)量，或者很快失去活性，無(wú)法持續(xù)有效地攻擊癌細(xì)胞。

研究人員注意到，CXCR2可以顯著提高CAR-T細(xì)胞在體內(nèi)和體外的遷移和腫瘤特異性積累。CXCLs是一種信號(hào)蛋白，在乳腺癌的腫瘤環(huán)境中高度表達(dá)。當(dāng)與免疫細(xì)胞表面的主要受體CXCR2結(jié)合時(shí)，它們可以觸發(fā)細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路，促使免疫細(xì)胞向化學(xué)因子的來(lái)源方向遷移。

研究人員創(chuàng)新性生成了能合成白介素15或白介素18的CXCR2 CAR。白介素15和白介素18都是可以刺激T細(xì)胞增殖的細(xì)胞因子。通過(guò)在CXCR2 CAR中共表達(dá)這些因子，可以顯著抑制T細(xì)胞的耗竭和凋亡。這一發(fā)現(xiàn)對(duì)于提高CAR-T細(xì)胞的生存和功能至關(guān)重要。

在隨后進(jìn)行的細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中，這些CAR-T細(xì)胞都能特異性溶解EGFRvIII陽(yáng)性靶細(xì)胞。與其它類型的CAR-T細(xì)胞相比，它們?cè)诠舭┘?xì)胞時(shí)產(chǎn)生了更多的顆粒酶B、干擾素-γ和腫瘤壞死因子-α。

在小鼠腫瘤移植模型中，這些CXCR2 CAR顯著增強(qiáng)了抗腫瘤效果。小鼠的腫瘤組織中顯示了更多的CD8+ T細(xì)胞積累，顯著改善了小鼠的存活率，并沒(méi)有引起嚴(yán)重的毒性。研究人員檢測(cè)到實(shí)驗(yàn)小鼠的白介素15和白介素18釋放較低，也未在心、肝、脾、肺和腎的組織切片中出現(xiàn)形態(tài)異常。

納米抗體CAR-T增強(qiáng)淋巴瘤治療效果

T細(xì)胞淋巴瘤是一組高度異質(zhì)的疾病，預(yù)后不良，5年總生存率較低，現(xiàn)有的治療方案效果相對(duì)較差。而單靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞治療需要大量和多次輸注，也增加了治療的風(fēng)險(xiǎn)和成本。

近日，研究人員選擇CD30和CD5這兩個(gè)在T細(xì)胞淋巴瘤中表達(dá)的標(biāo)記物。然后又成功篩選出針對(duì)CD30和CD5的高親和力納米抗體，可以精確地與CD30和CD5結(jié)合。

借助納米抗體，科學(xué)家們創(chuàng)建了一種新型的CAR-T細(xì)胞，能夠同時(shí)識(shí)別CD30和CD5。這就是所謂的雙特異性，通過(guò)同時(shí)針對(duì)兩個(gè)標(biāo)記物，這些CAR-T細(xì)胞可以更精確地識(shí)別癌細(xì)胞，即使癌細(xì)胞改變其中一個(gè)，CAR-T細(xì)胞仍然可以識(shí)別并攻擊它們。同時(shí)也可以減少CAR-T細(xì)胞對(duì)正常細(xì)胞的攻擊。

隨后進(jìn)行的體外實(shí)驗(yàn)表明，新型CAR-T細(xì)胞對(duì)靶細(xì)胞的細(xì)胞毒性明顯高于單靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞。

在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，這些雙特異性CAR-T細(xì)胞展示了對(duì)T細(xì)胞淋巴瘤的卓越抗腫瘤能力，相比單一目標(biāo)的CAR-T細(xì)胞效果更好。通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)和免疫熒光分析，發(fā)現(xiàn)雙特異性納米抗體CAR-T細(xì)胞組的腫瘤浸潤(rùn)T細(xì)胞顯著增加，并分泌更高水平的效應(yīng)細(xì)胞因子。能顯著抑制腫瘤生長(zhǎng)，延長(zhǎng)腫瘤攜帶小鼠的壽命，達(dá)到90天（對(duì)照組的小鼠在腫瘤細(xì)胞移植后的45天內(nèi)全部死亡），且未引發(fā)潛在毒性或?qū)φ＝M織的非靶標(biāo)損傷。

CTLA-4尾部融合增強(qiáng)CAR-T能力

細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原-4（簡(jiǎn)稱CTLA-4）是一種免疫檢查點(diǎn)分子，對(duì)于維持細(xì)胞的自我耐受和穩(wěn)態(tài)至關(guān)重要。CTLA-4的細(xì)胞質(zhì)尾部（簡(jiǎn)稱CCT）具有高度的內(nèi)吞作用（細(xì)胞通過(guò)包裹和吞噬外部物質(zhì)使其進(jìn)入細(xì)胞的過(guò)程），并且不斷在細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)部之間循環(huán)，以限制CTLA-4的表面表達(dá)。因此，CCT被認(rèn)為是通過(guò)調(diào)節(jié)CTLA-4的表面可用性來(lái)優(yōu)化T細(xì)胞的激活。

研究人員利用CCT設(shè)計(jì)了一種新型的CAR，通過(guò)利用CCT的獨(dú)特動(dòng)態(tài)特性，并將其與C端CAR融合，改變了CAR分子的動(dòng)態(tài)特性，加速了它們的內(nèi)吞作用、降解和再循環(huán)。這反過(guò)來(lái)導(dǎo)致了T細(xì)胞激活、炎性細(xì)胞因子產(chǎn)生、有限的噬細(xì)胞作用和癌癥抗原丟失的減少，從而減輕了隨后的CAR-T細(xì)胞自相殘殺的可能性。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)均觀察到CCT融合有效改善了體內(nèi)外CAR-T細(xì)胞的存活，同時(shí)還減少了凋亡。

這種方法有效地增加了CAR-T細(xì)胞中T中央記憶T細(xì)胞的持續(xù)性和比例，從而顯著改善了其體內(nèi)的抗腫瘤效果。

CD19 CAR-T與阿納白滯素治療淋巴瘤

CAR-T細(xì)胞治療可能會(huì)導(dǎo)致一些嚴(yán)重的副作用，如細(xì)胞因子釋放綜合癥（CRS）和免疫效應(yīng)細(xì)胞相關(guān)的神經(jīng)毒性綜合癥（ICANS）。臨床前試驗(yàn)表明，預(yù)防性給予阿納白滯素可消除CAR-T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫毒性，而不影響效能。據(jù)此，研究人員啟動(dòng)了一項(xiàng)2期臨床試驗(yàn)，以評(píng)估阿納白滯素在接受針對(duì)B細(xì)胞淋巴瘤的CD19定向CAR-T細(xì)胞治療的患者中預(yù)防嚴(yán)重ICANS方面的效能。

試驗(yàn)的結(jié)果確實(shí)是積極的。通過(guò)在治療開(kāi)始時(shí)預(yù)防性地使用阿納白滯素，所有級(jí)別的ICANS發(fā)生率降至19%，而嚴(yán)重的ICANS（≥3級(jí)）發(fā)生率降至9.7%。與以前的臨床試驗(yàn)和現(xiàn)實(shí)世界的數(shù)據(jù)相比，這一降低是顯著的，以前的臨床試驗(yàn)和現(xiàn)實(shí)世界數(shù)據(jù)報(bào)告的所有級(jí)別和≥3級(jí)的ICANS發(fā)生率分別為55-69%和31-38%。此外，阿納白滯素的使用并未影響CAR-T細(xì)胞治療的效果，患者的總體疾病反應(yīng)率為77%，完全反應(yīng)率為65%，這與以前的研究相當(dāng)。

這項(xiàng)研究還強(qiáng)調(diào)了阿納白滯素劑量和使用時(shí)機(jī)的重要性。在本研究中，阿納白滯素是在CAR T細(xì)胞輸注的第二天或早期CRS發(fā)作后開(kāi)始使用的。劑量從每12小時(shí)100毫克開(kāi)始，并允許迅速增加到每6小時(shí)100毫克，以更有效地早期抑制白介素1。這一方案的設(shè)計(jì)允許根據(jù)毒性情況對(duì)阿納白滯素劑量進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)適應(yīng)調(diào)整，從而在早期更有效地抑制白介素1。

此外，阿納白滯素的使用還顯示了它如何迅速分布到體內(nèi)并抑制與ICANS相關(guān)的其他因子。與其它治療方法相比，阿納金拉還具有能夠穿越血腦屏障并直接在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)發(fā)揮作用的優(yōu)勢(shì)。

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