如何快速檢測細胞上清中存在蛋白表達?
His標(biāo)簽是由6個組氨酸(His-His-His-His-His-His)組成的短肽,通常連接在蛋白質(zhì)的N端或C端,能夠用于重組蛋白的分離純化。His標(biāo)簽的分子量很小,一般不影響重組蛋白的結(jié)構(gòu)及生物活性,是目前應(yīng)用最為廣泛的純化標(biāo)簽之一。
德泰生物His標(biāo)簽蛋白快速檢測試劑盒,利用側(cè)向?qū)游雒庖邫z測技術(shù),可快速定性檢測細胞培養(yǎng)上清、細胞/細菌裂解產(chǎn)物或純化后的His標(biāo)簽蛋白。檢測時,僅需將試紙條加樣區(qū)按箭頭指示加入樣品中,或吸取少量樣品加至試紙條加樣區(qū),等待10分鐘,即可讀取檢驗結(jié)果。
使用場景
判斷His標(biāo)簽融合蛋白是否表達
蛋白表達過程中優(yōu)化蛋白表達誘導(dǎo)時間
蛋白純化過程中檢驗各個洗脫組是否含有目標(biāo)蛋白
操作步驟
1.樣本要求
①本檢測試劑盒適用檢測細胞培養(yǎng)上清、細胞/細菌裂解產(chǎn)物或蛋白純化后產(chǎn)物,如果樣品出現(xiàn)明顯渾濁,請離心后取上清檢測;
②對于細胞培養(yǎng)上清、細胞/細菌裂解產(chǎn)物樣品,不用稀釋,可直接上樣檢測;對于蛋白純化后產(chǎn)物樣品,可根據(jù)需要稀釋一定比例后上樣檢測;
③測試前,冷藏的樣本須恢復(fù)至室溫,冷凍的樣本須完全融化后,混勻,恢復(fù)至室溫后再檢測。
2.檢測方法
①取出試紙條,平衡至室溫;
②可將試紙條按箭頭指示插入樣品中,或者吸取75 μL樣品添加至試紙條加樣區(qū),加樣時注意不要產(chǎn)生明顯氣泡,計時器記時,10 分鐘判讀結(jié)果。
3.檢驗結(jié)果
①陰性結(jié)果:質(zhì)控線C和檢測線T都出現(xiàn)紅色條帶。
②陽性結(jié)果:質(zhì)控線C出現(xiàn)紅色條帶,檢測線T不出現(xiàn)紅色條帶。
③無效結(jié)果:質(zhì)控線C不出現(xiàn)紅色條帶。

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